【推荐1】黄金大米是一种新型转基因大米，其β-胡萝卜素含量是普通大米的23倍，因大米在抛光后呈黄色而得名。八氢番茄红素合酶（其基因用psy表示）和胡萝卜素脱饱和酶（其基因用crtI表示）参与β-胡萝卜素的合成。pmi 为磷酸甘露醇异构酶基因，它编码的蛋白质可使细胞在特殊培养基上生长。科学家将psy和crtI基因转入水稻，使水稻胚乳中含有β-胡萝卜素，由此生产出的大米称为“黄金大米”。
(1)科学家在培育“黄金大米”时，将psy和crtI基因导入含pmi基因的质粒中，构建了质粒pSYN12424。基因表达载体都含有标记基因，其作用是_________。该项研究的标记基因是_______。
(2)在PCR技术中，引物的作用是_______，若用PCR技术扩增psy或crtI基因，需要在PCR扩增仪中加入________种引物。psy基因和crtI基因进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为_________________。
(3)在构建质粒载体时，目的基因的内部（不包括两端）能否含有用到的限制酶识别序列?_____，原因是_____________________。
(4)我国对农业转基因生物实施标识制度，比如由转基因大米加工制成的麦芽糖，标注为“本产品加工原料中含有转基因大米，但本产品已不再含有转基因成分”，其相关的生物学依据是__________________________。

【推荐2】科研人员将R基因作为目的基因，构建基因表达载体，下图是目的基因的DNA的片段和所用到的质粒。回答下列问题：

   

(1)在扩增R基因时，需要加入引物，根据R基因______（填“内部”或“两端”）的核苷酸序列来设计特异性引物；利用PCR技术合成的DNA分子与模板DNA分子比较，长度一般______（选填“较长”或“较短”）。
(2)构建基因表达载体时，一般选择同种限制酶，据图分析，可以选择的酶是______，但用一种限制酶切割，会出现R基因和质粒的自身环化，或者R基因与质粒的反向连接。为避免上述现象，并且要在基因表达载体中保留标记基因，在切割质粒和目的基因时都采用两种限制酶切割，据图分析，该过程最适合选用的两种酶是______。
(3)将上述过程构建的基因表达载体导入到细菌，这些细菌将会获得对______的抗性。导入前，一般先用钙离子处理细菌，使其处于能吸收环境中______的生理状态。
(4)如果要将表达载体导入动物受精卵，常用的方法是______。

【推荐1】下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛的大致过程，请据图回答问题。

（1）获得赖氨酸转基因克隆奶牛所用的细胞工程技术手段包括______________________。通过____________去除卵母细胞中的核，用物理或化学方法方法激活受体细胞，使其完成_____________进程，构建重组胚胎。克隆牛诞生的主要原理是___________________，这个过程属于________（有性生殖/无性生殖）。
（2）将编码赖氨酸的基因转入胚胎成纤维细胞的核心步骤是____________________。
（3）赖氨酸转基因克隆奶牛的早期胚胎在母体子宫内形成后，所以能够收集，其依据的生理学基础是____________________________________________；赖氨酸转基因克隆奶牛的乳汁中富含赖氨酸，因此我们将之称为____________________反应器。

【推荐2】新冠病毒是一种单链RNA病毒，常用“荧光RT-PCR技术”进行检测，方法是取检测者的mRNA在试剂盒中逆转录出cDNA，并大量扩增，同时利用盒中荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA，在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加，可通过荧光强度的变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如下图）。请回答下列问题：

（1）题中“荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中应该含有_________；检测者mRNA、_________、逆转录酶、引物，dNTP、缓冲体系。
（2）如果要同时扩增两种基因，则试剂盒中的引物应该有_______种，引物的作用是_____________。
（3）上图中“平台期”出现的最可能的原因是___________________。理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明检测结果呈________（填“阴”或“阳”）性，但为了保证检测结果的准确性，一般要达到或超过阈值时才确诊。现有甲乙两个待检样本，检测时都出现了上述形态的曲线，但甲的a点比乙的a点明显左移，请给这种结果做出科学合理的解释（试剂盒合格且正富，操作过程规范且准确）：___________________。
（4）除核酸检测外，研究人员还研发了利用生产单克隆抗体的技术，生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。当杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养时，为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害；应采取的措施是_______________，最后所得抗体的优点是：__________。

【推荐3】酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可生产食品和药品等．科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒．基本的操作过程如下：

(1)该技术定向改变了酵母菌的性状，这在可遗传变异的来源中属于_____ 。
(2)获取LTP1基因需要用到限制酶，此酶可以断开两个脱氧核苷酸间的_____（化学键）；然后用_____技术扩增LTP1基因；为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是质粒，除此之外，还有_____和动植物病毒也可作为基因工程中的运载体。
(3)此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是：在含有青霉素的培养基上_____（能，不能）存活，在含有四环素的培养基上_____（能，不能）存活。
(4)C的组成部分中有一个叫做_____，它是RNA聚合酶识别和结合部位。
(5)除了看啤酒泡沫丰富与否外，还可以用_____来检测LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表达LTP1蛋白。

【推荐1】民以食为天，粮食安全是国家安全重要基础，足够的农田是农业稳产的保障，而大量的盐碱地不适合农作物生长。寻找耐盐碱基因，通过基因工程技术定向培育耐盐碱作物新品种有重要意义。科研工作者在盐碱地中找到了一种生长良好且耐盐碱的植物（以下简称植物a）。研究人员发现，植物a的液泡膜上特有一种Na⁺/K⁺逆向转运蛋白，这种蛋白是植物a耐盐碱的原因，并在植物a中找到控制该蛋白合成的Na⁺/K⁺逆向转运蛋白基因（TaNHX₂基因）。该基因就是研究人员要找的耐盐碱的目的基因。研究人员进一步获得了如下图所示的物质结构。拟利用这些材料，用基因工程技术培育转基因棉花。

Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶（Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的黏性末端相同）
用基因工程技术培育转基因棉花的操作程序包括四个步骤：
(1)目的基因的获取：将植物a不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为____________。
(2)构建基因表达载体：计划用EcoRⅠ分别切割左上图中DNA片段和右上图所示质粒，以构建基因表达载体。
①构建表达载体除限制酶外还需要的工具酶是_____________；
②本方案的缺陷是：可能导致_________________以及目的基因与质粒的反向连接。
③为避免上述缺陷，最佳方案是用___________切割左上图的DNA片段，用________切割右上图质粒。
(3)将____________导入受体细胞。成功导入受体细胞后，还需要利用___________技术才能得到转基因棉花幼苗，这一技术的原理是_________________。
(4)目的基因的检测与鉴定：要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果，检测方法是_____________。

【推荐2】玉米是重要的粮食作物，其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白的转基因玉米，回答下列问题。
(1)利用PCR技术以图1中的DNA片段为模板扩增P基因，需要的引物有____________（从A、B、C、D四种单链DNA片段中选择）。

(2)培育超量表达P蛋白的转基因玉米过程中所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图2所示。强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_____________识别并结合，驱动基因的持续转录。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用___________________酶组合，将片段和Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是__________________________________________。
(3)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织进行植物组织培养，培养基中需加入__________进行筛选，筛选出的愈伤组织______________形成丛芽，最终获得多个转基因玉米株系。

(4)P蛋白在玉米株系的表达量如图3所示，不能选择a₄玉米株系作为超量表达P蛋白转基因玉米的生理特性研究的实验材料，理由是____________________________。

【推荐3】A、B是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，A含有效成分X，B含有效成分Y。某研究小组拟培育同时含有X和Y的新型药用植物。回答下列问题∶
(1)为了培育该新型药用植物，可取A和B的叶片，先用_______________酶去除细胞壁，获得具有活力的___________________，再用化学诱导剂诱导二者融合，形成的融合细胞经过脱分化培养形成愈伤组织，然后经过再分化形成完整的杂种植株C。这种培育技术称为_____________________。
(2)上述杂种植株C属于多倍体，含有______个染色体组。假设A与B能通过有性杂交产生后代植株D，且产生的后代植株D是不育的，而上述杂种植株C是可育的，造成这种差异的原因是_______________。 请简要写出解决后代植株D不育的方法∶________________。
(3)经植物组织培养得到的_________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子，人工种子中除了充入各种营养物质外，还应该充入_________（填两种）等植物激素。