传统的玉米淀粉作为原料生产酒精燃料，虽然是目前较为成熟的技术，但已受到限制，在绿色理念的指导下，对可再生能源的研发已经成为全世界关注的焦点。如图为利用玉米秸秆生产酒精燃料的过程，该技术不仅能节约能源，还能保护环境，回答下列问题：
(1)欲筛选出产纤维素酶的母菌，现称取1.0g某土壤样品，进行梯度稀释，分别取0.1ml经104倍稀释后的悬液涂布于固体培养基上，一段时间后每个培养基平均长出了25个酵母菌菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌___________ 个。
(2)筛选出的酵母菌产生的纤维素酶活性较低，研究人员利用基因工程育种得到3株纤维素分解菌株，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。纤维素酶活性最高的是____ 菌株，理由是________ 。
(3)以玉米秸秆为发酵底物时，将秸秆进行粉碎、蒸煮的目的是_________ ，发酵温度一般控制在18~25℃，原因是_____ ，酒精发酵前期需要通入一定的无菌空气，目的是______________ 。
(4)在生产酒精燃料过程中，通常不以粮食为发酵底物，原因是_________ 。
(1)欲筛选出产纤维素酶的母菌，现称取1.0g某土壤样品，进行梯度稀释，分别取0.1ml经104倍稀释后的悬液涂布于固体培养基上，一段时间后每个培养基平均长出了25个酵母菌菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌
(2)筛选出的酵母菌产生的纤维素酶活性较低，研究人员利用基因工程育种得到3株纤维素分解菌株，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。纤维素酶活性最高的是
| 菌株 | 秸秆总重（g） | 秸秆残重（g） | 秸秆失重（%） | 纤维素降解率（%） |
| A | 1.00 | 0.75 | 25.00 | 17.24 |
| B | 1.00 | 0.79 | 21.00 | 15.93 |
| C | 1.00 | 0.68 | 32.00 | 25.28 |
(3)以玉米秸秆为发酵底物时，将秸秆进行粉碎、蒸煮的目的是
(4)在生产酒精燃料过程中，通常不以粮食为发酵底物，原因是
更新时间：2024-03-11 20:51:39
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【推荐1】某制药厂排出的废气有很大异味，经测定废气中含有NH3，于是同学们想找到一种能分解NH3的细菌，请回答在细菌培养与选择方面的相关问题。
（1）同学们从杂菌中选择所需菌种时，培养基中应该加入化学物质NH3，以便选择出能分解NH3的菌种，从培养基的用途上看这种培养基叫做____________ 。
（2）在配制培养基时除了要满足营养物质的需求外，还需满足微生物生长对__________ 、_________ 以及___________ 的要求。
（3）获得纯净目的菌种的关键是________________ ，对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行_____________ ；培养皿、接种器具和培养基等进行_________ 。
（4）在纯化菌种时，可以选择平板划线法或者__________ ，前者一定注意接种环在接触菌体前要_________ 以避免菌种死亡，整个操作都要在________ 附近进行。
（1）同学们从杂菌中选择所需菌种时，培养基中应该加入化学物质NH3，以便选择出能分解NH3的菌种，从培养基的用途上看这种培养基叫做
（2）在配制培养基时除了要满足营养物质的需求外，还需满足微生物生长对
（3）获得纯净目的菌种的关键是
（4）在纯化菌种时，可以选择平板划线法或者
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【推荐2】金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌，由于抗生素的滥用，出现了抗药性强的金黄色葡萄球菌，几乎能抵抗人类所有的药物，但是万古霉素可以对付它。请回答下列问题：
(1)有人认为，抗药性强的金黄色葡萄球菌的产生是滥用抗生素诱发了金黄色葡萄球菌基因突变所致。该观点______ （填“正确”或“不正确”），原因是______________________________ 。
(2)若想对某样品中的超级细菌进行计数，应对样品中的菌株进行纯化，一般采用______ 法进行接种。接种后的平板应______ 放入培养箱中培养一段时间后，统计平板上的菌落数目，这样放置的好处是___________________________ 。
(3)研究发现，不同浓度的万古霉素的效果不同，为探究万古霉素杀灭抗药性强的金黄色葡萄球菌的最佳浓度，实验的设计思路是________________________________________________ 。
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【推荐3】二硝基甲苯遇碱变红，如图表示从被二硝基甲苯污染的土壤中分离具有降解二硝基甲苯能力的光合细菌——球形红细菌的过程。回答下列问题：______ （答出两点）等基本营养成分。
(2)将10g土壤样品加入装有无菌水的三角瓶中制备土壤浸出液。②过程的目的是______ ；③过程所用的接种方法为______ 法。
(3)要测定培养液中的菌体数，可选用稀释涂布平板法统计活菌数目，在5个培养基平板上共接种稀释倍数为105的土壤样液0.5mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，则每毫升土壤样液中的细菌数量为______ 个。用此方法测定的球形红细菌数量比实际活菌数量少，原因是______ 。若用稀释涂布平板法计数时，某一实验组平板上菌落平均数为46个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，请分析说明空白对照组出现菌落的可能性原因是__________________ （答出两点）。
(4)图中甲、乙培养基需置于有光条件下培养，主要原因是______ 。
(2)将10g土壤样品加入装有无菌水的三角瓶中制备土壤浸出液。②过程的目的是
(3)要测定培养液中的菌体数，可选用稀释涂布平板法统计活菌数目，在5个培养基平板上共接种稀释倍数为105的土壤样液0.5mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191，则每毫升土壤样液中的细菌数量为
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【推荐1】玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、胡萝卜素和果糖等，其流程如下：
（1）玉米秸秆经预处理后，需选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖，研究人员能从以下哪些微生物中分离出该酶？____________
A．酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌 D.反刍动物瘤胃中的某些微生物
（2）酒精发酵时一般将温度控制在_____________ 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用___ 法或稀释涂布平板法。
（3）玉米籽粒中富含胡萝卜素，其萃取效率主要取决于________________ ，同时还受到其他多种因素的影响。图为胡萝卜素粗品鉴定的结果，从图中分析可知，出现样品2的结果不可能因为________ 。
A．胡萝卜粉碎颗粒太细 B．干燥温度高，时间长
C．未经浓缩蒸馏 D．点样太快，样点太小
（4）某实验室利用芽孢杆菌提取葡萄糖异构酶，经细胞洗涤、超声波破碎、离心和透析后初分离出含葡萄糖异构酶的蛋白质溶液，透析可去除相对分子质量较________ 的杂质，所用溶液为___________ 。纯化后的葡萄糖异构酶可用电泳法检测其分子量大小，在相同条件下，带电性质相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越_______ 。
（5）探究PH对葡萄糖异构酶活性的影响时，_______ （能/不能）选取斐林试剂进行检测？原因是_________________________________________________________________ 。
（1）玉米秸秆经预处理后，需选用纤维素酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖，研究人员能从以下哪些微生物中分离出该酶？
A．酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌 D.反刍动物瘤胃中的某些微生物
（2）酒精发酵时一般将温度控制在
（3）玉米籽粒中富含胡萝卜素，其萃取效率主要取决于
A．胡萝卜粉碎颗粒太细 B．干燥温度高，时间长
C．未经浓缩蒸馏 D．点样太快，样点太小
（4）某实验室利用芽孢杆菌提取葡萄糖异构酶，经细胞洗涤、超声波破碎、离心和透析后初分离出含葡萄糖异构酶的蛋白质溶液，透析可去除相对分子质量较
（5）探究PH对葡萄糖异构酶活性的影响时，
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【推荐2】现在大力提倡无纸化办公，但是仍然不可避免每年要产生大量的废纸，其主要成分是木质纤维，人类正努力将其转化为一种新的资源——乙醇。如图是工业上利用微生物由纤维素生产乙醇的基本流程。
（1）从土壤中筛选纤维素分解菌需要在培养基中需要加入_________ 作为唯一碳源。
（2）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是____________ 。当形成菌落以后，可以根据菌落周围是否产生___________ 来筛选纤维素分解菌。当利用涂布器涂布平板之后,需要对涂布器进行_____________ 处理。
（3）如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，三种等量酶液的活性_____________ （填“一定相同”“不一定相同”或“一定不同”）,可以通过__________ 进行定量的测定。
（4）根据测定结果,①环节常选择木霉,则②中获得的酶是______ 酶。该酶至少包括___________ 三种组分。
（1）从土壤中筛选纤维素分解菌需要在培养基中需要加入
（2）经过梯度稀释后，要将样品均匀涂布在用于鉴别纤维素分解菌的培养基上,在该培养基中需要加入的特殊染料是
（3）如上所述的筛选中获得了三个菌落，对它们分别培养，并完成环节②，三种等量酶液的活性
（4）根据测定结果,①环节常选择木霉,则②中获得的酶是
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【推荐3】某真菌的W基因可编码一种可高效降解纤维素的酶，已知图乙中W基因转录方向是从左往右。为使放线菌产生该酶，以图甲中质粒为载体，进行重组DNA技术的相关操作。回答下列问题：
(1)若要从土壤中筛选出纤维素分解菌，需要配制以为_____________ 唯一碳源的固体培养基并进行灭菌处理。为便于筛选可在培养基中加入____________ 染料。
(2)限制酶主要是从__________________ （填“真核生物”或“原核生物”）中分离纯化出来的。结合上述图表分析应使用限制酶_________ 切割图甲中质粒，使用限制酶切割______ 图乙中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。
(3)与质粒中启动子结合的酶是______________ 。启动子通常具有物种特异性，在质粒中插入W基因，其上游启动子应选择____________ （填生物类型）启动子，有利于W基因在目的菌中的表达产生高效降解纤维素的酶。
(4)W基因转录的模板链是__________ （填“甲链”或“乙链”）。利用PCR技术对W基因进行扩增时子链延伸的方向是______________ 。
| 限制酶 | BamHⅠ | EcoRⅠ | MfeⅠ | KpnⅠ | HindⅢ |
| 识别序列及切割位点（5′-3′） | G↓GATTC | G↓AATTC | C↓AATTG | GGTAC↓C | A↓AGCTT |
(1)若要从土壤中筛选出纤维素分解菌，需要配制以为
(2)限制酶主要是从
(3)与质粒中启动子结合的酶是
(4)W基因转录的模板链是
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解题方法
【推荐1】厨余垃圾废液中的淀粉、蛋白质和脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用，但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。
(1)为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，以便于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：
①将两种菌液进行不同配比分组处理，如下表所示：
将等量上表菌液分别接种于100 mL某厨余垃圾废液中进行振荡培养。本实验中对照组的处理应为__________________________ 。
②实验操作中所用的吸管的灭菌方法是_______________ 。培养3天后取各组菌液采用______________ 法接种于基本培养基中，培养一段时间后进行计数，并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果如图。
由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是__________________ 。接种量比例为________ 时，废液中两菌的有效活菌数最多。
(2)固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质和淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料，收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晒干后制成蛋白饲料。通过以上处理可实现________(填序号)。
(1)为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比，以便于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：
①将两种菌液进行不同配比分组处理，如下表所示：
编号 | R0 | R1 | R2 | R3 |
圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌 | 1：0 | 0：1 | 1：1 | 2：1 |
②实验操作中所用的吸管的灭菌方法是
由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是
(2)固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质和淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料，收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晒干后制成蛋白饲料。通过以上处理可实现________(填序号)。
| A．物质循环再生 | B．能量多级利用 | C．提高能量传递效率 |
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【推荐2】下表所示的培养基配方可选择某种目的菌。回答下列问题：
（1）此培养基配方中主要为微生物提供碳源和氮源的物质分别是_____________________ 。
（2）该培养基可筛选的目的菌是________________ ，该菌分泌的复合酶中葡萄糖苷酶作用是_____________________ 。
（3）若需要对该目的菌进行计数时，将1ml样液稀释100倍，在3个培养基上分别滴加0.1ml稀释液；经适当培养后，3个培养基上的菌落数分别为40、41、42.据此可得出每升样液中的活菌数为____________ ，而实际值比该值要偏_________ 。
（4）一般来说，在菌落计数时，每隔一定时间统计一次菌落数目，选取__________________ 时记录的数据作为结果，以防止培养时间不足而遗漏菌落数目。
（5）若要判断该选择培养基是否起到了筛选作用，应设置的对照是___________________________________________________ 。
纤维素粉 | 5 g | NaNO3 | 1 g |
Na2HPO4·7H2O | 1.2 g | KH2PO4 | 0.9 g |
MgSO4·7H2O | 0.5 g | KCl | 0.5 g |
酵母膏 | 0.5 g | 水解酪素 | 0.5 g |
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000 mL | |||
（2）该培养基可筛选的目的菌是
（3）若需要对该目的菌进行计数时，将1ml样液稀释100倍，在3个培养基上分别滴加0.1ml稀释液；经适当培养后，3个培养基上的菌落数分别为40、41、42.据此可得出每升样液中的活菌数为
（4）一般来说，在菌落计数时，每隔一定时间统计一次菌落数目，选取
（5）若要判断该选择培养基是否起到了筛选作用，应设置的对照是
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【推荐3】研究发现，活性污泥中能筛选出对蓝色有机染料废水具有高效脱色能力的菌株，它们通过降解具生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN-1的筛选和脱色试验流程，图3表示GN-1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。请回答下列问题：______________ 为唯一碳源；后者为固体培养基，因此除营养成分外，还应添加_______________ （物质），然后用______________ 方法对培养基进行灭菌。
(2)采用稀释涂布平板法进行初次分离、纯化，接种时需要使用图2中的仪器______________ （填写数字序号）。之后应选取菌落_______________ （填写图1中数字序号）用_______________ 法接种，进行进一步分离、纯化。______________ 充分接触。经扩大培养后的GN-1菌株预期密度为每毫升7×109个，则按常规的稀释涂布平板法对其计数，需稀释_____________ 倍进行计数判定。
(4)根据图3所示结果，综合考虑脱色效果（6d脱色率达90%以上为合格）和经济效益，GN-1菌株的最佳接种量为______________ %。_____________ （选填“增强”/“减弱”）。
(2)采用稀释涂布平板法进行初次分离、纯化，接种时需要使用图2中的仪器
(4)根据图3所示结果，综合考虑脱色效果（6d脱色率达90%以上为合格）和经济效益，GN-1菌株的最佳接种量为
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【推荐1】学校开展以“利用传统发酵技术制作食品”为主题的相关活动。小余同学兴致勃勃地回家，发现冰箱中可用的原材料有草莓、豆腐、白萝卜、牛奶等。请回答下列问题：
（1）传统发酵技术一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次发酵保存下来的发酵物中的______ 进行发酵、制作食品的技术。
（2）小余同学将草莓洗净、切块，装入瓶中。加入原浆醋（经粮食直接酿制，不经勾兑）少许、白糖两勺，置于保温箱中，每隔一段时间拧开瓶盖换气，两周后得到草莓醋。小余同学加入原浆醋的目的是接种更多的______ ，加入糖并经常开盖换气的目的是保证______ 都充足。保温箱温度应保持在______ ℃。
（3）小余同学还打算制作一些腐乳和萝卜泡菜给住宿生作早餐。从豆腐到腐乳，多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是_______ ，属于______ （填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也会发生一定的变化，其中蛋白质被分解成______ ，脂肪被分解成______ ；用白萝卜制作泡菜的过程中，能达到缩短腌制时间的操作有______ （填下面的序号）。
①将白萝卜切成小块 ②用沸水短时间处理白萝卜块
③添加陈泡菜汁 ④向容器中通入无菌空气
（4）小余同学欲从泡菜汁中分离制作酸奶的乳酸菌，首先对陈泡菜汁进行过滤，然后取滤液用无菌水进行充分______ ，再用涂布器接种到特定的______ 培养基中进行初步筛选。
（1）传统发酵技术一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次发酵保存下来的发酵物中的
（2）小余同学将草莓洗净、切块，装入瓶中。加入原浆醋（经粮食直接酿制，不经勾兑）少许、白糖两勺，置于保温箱中，每隔一段时间拧开瓶盖换气，两周后得到草莓醋。小余同学加入原浆醋的目的是接种更多的
（3）小余同学还打算制作一些腐乳和萝卜泡菜给住宿生作早餐。从豆腐到腐乳，多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是
①将白萝卜切成小块 ②用沸水短时间处理白萝卜块
③添加陈泡菜汁 ④向容器中通入无菌空气
（4）小余同学欲从泡菜汁中分离制作酸奶的乳酸菌，首先对陈泡菜汁进行过滤，然后取滤液用无菌水进行充分
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【推荐2】 蓝莓果实中富含花青素等营养成分，具有保护视力、防止脑神经老化、 强心、抗癌、软化血管、增强机体免疫等功能。下面是获取蓝莓花青素、蓝莓酒和蓝莓醋的流程图。结合所学知识，回答下列问题：
（1）酿制蓝莓酒时，一般要先通气，目的是________________________ 。通常不需要对蓝莓进行严格的消毒处理，是因为在缺氧、呈酸性的发酵液中 ______________ 。醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源 ____ (填充足或缺少)。酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中会逐渐出现醋酸味，气温高的夏天更易如此，其原因是____________________ 。
（2）若蓝莓果汁中已含有醋酸菌，在蓝莓果酒发酵旺盛时，醋酸菌______________ (填能或不能)将果汁中的糖发酵为醋酸，原因是__________________ 。
（3）为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测___ 作进一步的鉴定。
（1）酿制蓝莓酒时，一般要先通气，目的是
（2）若蓝莓果汁中已含有醋酸菌，在蓝莓果酒发酵旺盛时，醋酸菌
（3）为鉴定蓝莓果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测
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【推荐3】杨梅是浙江省的特色水果之一，为对其进行深加工，某厂进行了杨梅酒和杨梅醋的研制，基本工艺流程如下：
请回答问题。
(1)在制备杨梅酒过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和________ 酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是________ 。发酵一定时间后，观察到发酵罐内液面不再有________ ，说明发酵基本完毕。
(2)甲罐中的主要微生物是________ ，属于生态系统成分中的________ 。若要检测是否产生了酒精可用________ 试剂进行检测。
(3)在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经________ 处理的木材刨花，然后加入含________ 菌的培养液，使该菌附着在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒的________ 来调节。
(4)若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中CO2的产生量是________。
(5)在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，某物质浓度随时间变化的示意图如下，该物质是________ 。
请回答问题。
(1)在制备杨梅酒过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和
(2)甲罐中的主要微生物是
(3)在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经
(4)若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中CO2的产生量是________。
| A．甲罐的两倍 | B．与甲罐的相等 |
| C．甲罐的一半 | D．几乎为零 |
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