水稻胚乳可作为生物反应器用于开发功能性产品。从猪瘟病毒抗原蛋白的预期功能出发，研究小组设计其预期的结构，推测应有的氨基酸序列，合成新的基因X。利用PCR技术对其进行扩增并连接启动子1，形成Z片段。把Z片段插入Ti质粒的T-DNA中，将构建好的基因表达载体导入水稻细胞完成转化，在胚乳中获得相应蛋白，最终将蛋白进一步加工为植物源猪瘟疫苗。相关信息如图所示。
回答下列问题。
(1)研究小组通过PCR扩增Z片段，延伸过程中，4种脱氧核苷酸在___ 催化作用下合成新的DNA链。酶切时，限制酶识别序列的重叠会降低切割效率。为构建基因表达载体，选择限制酶HindⅢ和___ 进行切割，可使Z片段插入T-DNA的效率最高。为使基因能够正常表达，质粒上的N和J应都为___ 。
(2)为获得含蛋白X的水稻材料，首先诱导水稻种子脱分化形成___ ，然后通过___ 的侵染，使目的基因进入水稻细胞并完成转化，再将其转接到含特定激素的培养基上，诱导其___ 形成具有根、茎、叶的完整植株。
(3)为验证水稻中目的基因X是否表达（转录和翻译），分子水平上的检测方法有___ （答出2点即可）。
(4)从猪瘟病毒抗原蛋白的预期功能出发，合成基因X，进而得到猪瘟疫苗的过程属于___ 工程的范畴。
回答下列问题。
(1)研究小组通过PCR扩增Z片段，延伸过程中，4种脱氧核苷酸在
(2)为获得含蛋白X的水稻材料，首先诱导水稻种子脱分化形成
(3)为验证水稻中目的基因X是否表达（转录和翻译），分子水平上的检测方法有
(4)从猪瘟病毒抗原蛋白的预期功能出发，合成基因X，进而得到猪瘟疫苗的过程属于
更新时间：2024-03-13 17:30:14
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【推荐1】大花美人蕉枝叶繁茂、花朵艳丽、花期长，具有很高的观赏价值。它还能吸收硫、氯、氟、汞等有害物质，具有净化空气、保护环境的作用。美人蕉传统的繁殖方式主要采用分切地下根茎的方法，繁殖率低，而且连续营养繁殖会被病毒感染，。研究人员拟利用植物组织培养的方式对其进行繁殖，并进行相关研究。
(1)与分切地下根茎的方式相比，植物组织培养具有___________ 、___________ 的优点，植物组织培养包括__________ 、________ 两个阶段。
(2)NAA、2，4-D具有生长素效应，6-BA、TDZ具有细胞分裂素效应。美人蕉芽诱导分化较难，以MS为基本培养基，附加不同浓度的以上物质，以筛选出适宜美人蕉芽诱导分化的配方，实验结果如下
分析上述实验结果可知，第1--9组未统计______ 率，所用培养基的目的为促进_____ 分化，此类培养基的特点为____________ 。该实验的实验结论为__________ 。
(1)与分切地下根茎的方式相比，植物组织培养具有
(2)NAA、2，4-D具有生长素效应，6-BA、TDZ具有细胞分裂素效应。美人蕉芽诱导分化较难，以MS为基本培养基，附加不同浓度的以上物质，以筛选出适宜美人蕉芽诱导分化的配方，实验结果如下
分析上述实验结果可知，第1--9组未统计
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【推荐2】失败乃成功之母，旁门左道也许能曲径通幽。让我们做一次科学畅想吧。在组织培养某植物中发现，有一个MS培养基中没有加入杠杆激素的培养瓶中也长出了与加有杠杆激素的培养瓶中一样的愈伤组织，瓶中还长出了一些某种真菌的菌落。
(1)回顾操作过程，操作环境的消毒过程、培养基和器具的灭菌过程应该没有问题，可能是对外植体的________ 处理和接种外植体环节没有____________ 进行严格的无菌操作。
(2)研究人员没有放弃这难得的机遇，初步做出一个假设，继续进行实验：
他们就地取材，在_______ 培养基上采用__________ 法纯化培养该真菌。再增设一组实验，具体做法是，在MS培养基中加入经高压蒸汽灭菌处理的该种真菌或经高压蒸汽灭菌处理过的________________ 的培养基，再接种外植体，其他环境条件与正常组培相同，观察能否培养出正常的愈伤组织。
预测结果：如果产生了正常的愈伤组织，支持该假设。如果没有产生愈伤组织，不支持假设。他们做的假设是：________________ 。
(3)去该植物生长地考察发现，根系发达的植物土壤中该真菌的密度很大。据此推测该植物和该真菌的关系很可能是___________ 。设想将它们融合培育成一种新的植物。先在一定浓度的蔗糖溶液中加入某些酶处理植物，制备出所需的___________ ，真菌也做类似的处理。再经过诱导融合，组培，最终长成新的植物体。所用的一定浓度的蔗糖溶液的主要作用是____________________________ 。
(1)回顾操作过程，操作环境的消毒过程、培养基和器具的灭菌过程应该没有问题，可能是对外植体的
(2)研究人员没有放弃这难得的机遇，初步做出一个假设，继续进行实验：
他们就地取材，在
预测结果：如果产生了正常的愈伤组织，支持该假设。如果没有产生愈伤组织，不支持假设。他们做的假设是：
(3)去该植物生长地考察发现，根系发达的植物土壤中该真菌的密度很大。据此推测该植物和该真菌的关系很可能是
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【推荐3】生物技术实践与人们的生产和生活密切相关，也为许多学生将来就业奠定了知识基础和能力基础。请回答下列有关生物技术实践中的问题。
(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有_____ 灭菌、干热灭菌和_____ 灭菌。
(2)在果醋，泡菜的制作过程中，需要氧气的是_____ 的制作；在制作果醋过程中，榨取的果汁非常浑浊，解决的方法是_____ 。
(3)进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、_____ 、接种、培养，移栽，栽培。花药离体培养时，选择_____ 期的花粉能提高诱导成功率，确定花粉发育时期最常用的染色方法是_____ 。花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中_____ 。
(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有
(2)在果醋，泡菜的制作过程中，需要氧气的是
(3)进行菊花组织培养的基本实验操作步骤是：制备MS固体培养基、
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解题方法
【推荐1】B基因存在于水稻基因组中，其在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计并完成了如下实验来获取能够在卵细胞中表达B基因的转基因植株。请回答下列问题：
(1)图中所示的基因表达载体需含有启动子，它是_____ 识别并结合的位点。
(2)从水稻体细胞中提取总RNA，在_____ 酶的催化下构建cDNA文库，进而获得B基因编码蛋白的序列。Luc基因是荧光酶基因，能催化荧光素产生荧光，B-Luc融合基因形成过程中需要的酶是_____ 。
(3)用Ca2＋处理农杆菌，使细胞处于一种_____ 的生理状态，然后将重组的基因表达载体导入其中。
(4)外植体经_____ 形成的水稻愈伤组织放入农杆菌液浸泡后进行植物组织培养，培养基中需加入_____ 进行筛选。
(5)个体水平可以通过_____ 筛选出能表达B基因的转基因植株。
(6)扩增目的基因时，常用PCR技术，在PCR的反应体系中用到TaqDNA聚合酶，此酶需要_____ （离子）激活。
(1)图中所示的基因表达载体需含有启动子，它是
(2)从水稻体细胞中提取总RNA，在
(3)用Ca2＋处理农杆菌，使细胞处于一种
(4)外植体经
(5)个体水平可以通过
(6)扩增目的基因时，常用PCR技术，在PCR的反应体系中用到TaqDNA聚合酶，此酶需要
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【推荐2】当今社会发展倡导以绿色为核心的生态发展观，绿色农产品的生产是人们健康生活的源头。为降解农产品的农药（马拉硫磷）残留，科学家用基因工程技术生产了 CarE（羧酸酯酶）制剂，生产过程如图所示。
(1)提取抗马拉硫磷小菜蛾总RNA，经①_______ 过程获得总cDNA，利用PCR技术可以选择性扩增CarE基因的cDNA，原因是___________________ 。
(2)与从基因组文库中获得的基因相比，经①②得到的CarE基因不能直接用于构建基因表达载体，原因是____________________ 。
(3)在③过程中，要用CaCl2处理大肠杆菌，使其变成______ 细胞；该状态的细胞特点是_____________ 。
(4)若经以上过程得到的CarE制剂效果不理想，则可以用蛋白质工程技术，通过______ ，间接实现对CarE的改造，以满足生产和生活的需求。
(5)假如请你为CarE（羧酸酯酶）制剂设计产品说明书，你认为在保存以及使用上应注意哪些事项？___________________ （写出1点，合理即可）
(1)提取抗马拉硫磷小菜蛾总RNA，经①
(2)与从基因组文库中获得的基因相比，经①②得到的CarE基因不能直接用于构建基因表达载体，原因是
(3)在③过程中，要用CaCl2处理大肠杆菌，使其变成
(4)若经以上过程得到的CarE制剂效果不理想，则可以用蛋白质工程技术，通过
(5)假如请你为CarE（羧酸酯酶）制剂设计产品说明书，你认为在保存以及使用上应注意哪些事项？
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【推荐3】铀是一种广泛分布在岩石和土壤中的天然放射性元素，铀导致的水体污染越来越受到重视，物理化学处理含铀废水的经济性和有效性低，因而采用耐辐射奇球菌净化成为优先方法。某研究小组拟将已连接还原基因dsrA的重组载体pRADK—dsrA转入耐辐射奇球菌DR中，构建兼备高还原性和强辐射抗性的基因工程菌Deino—dsrA，其构建过程如图所示(注：KanR是卡那霉素抗性基因、AmpR是氨苄青霉素抗性基因、ori是复制原点)。四种
限制酶的识别序列及切割位点见表。回答下列问题：
(1)过程①含dsrA基因的DNA片段时需在反应液中加入一对引物，其作用是_______ ，对该对引物的设计要求有_______ (答出1点即可)。PCR扩增过程中，变性的温度需上升到90℃以上的目的是_______ 。
(2)过程④要选择合适的限制酶切割含dsrA基因的DNA片段和pRADK质粒，应选用的表中的两种限制酶是_______ ，不选用其他限制酶的理由是_______ ，与单酶切相比，采用双酶切的优点有_______ 。
(3)为成功筛选出成功导入重组pRADK—dsrA载体的耐辐射奇球菌，可用含青霉素的培养基培养该细菌，一段时间后_______ (填“保留”或“淘汰”)能存活的细菌即可。
限制酶的识别序列及切割位点见表。回答下列问题：
| 限制酶 | BamHI | BssHII | NdeI | SspI |
| 识别序列和切割位点 |  |  |  |  |
(1)过程①含dsrA基因的DNA片段时需在反应液中加入一对引物，其作用是
(2)过程④要选择合适的限制酶切割含dsrA基因的DNA片段和pRADK质粒，应选用的表中的两种限制酶是
(3)为成功筛选出成功导入重组pRADK—dsrA载体的耐辐射奇球菌，可用含青霉素的培养基培养该细菌，一段时间后
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【推荐1】α1-抗胰蛋白缺乏症是一种在北美较为常见的单基因遗传病，患者成年后会出现肺气肿及其他疾病，严重者甚至死亡。对于该致病患者常可采用注射人α1-抗胰蛋白酶来缓解症状。
（1）图1表示获取人α1-抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：
①a过程是在__________ 酶的作用下完成的，该酶的作用特点是识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。
②c过程称为__________ ，该过程需要的原料是_____________________ 。
③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用______________ 技术检测该基因的碱基序列。
（2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2。
①获得目的基因后，常利用__________ 技术在体外将其大量扩增。
②载体上绿色荧光蛋白（GEP）基因的作用是便于__________ 。基因表达载体d，除图中的标示部分外，还必须含有启动子、终止子。
③若要使转基因羊的后代均保持其特有的性状，理论上应选用__________ 技术进行繁殖。
（1）图1表示获取人α1-抗胰蛋白酶基因的两种方法，请回答下列问题：
①a过程是在
②c过程称为
③要确定获得的基因是否是所需的目的基因，可以从分子水平上利用
（2）利用转基因技术将控制该酶合成的基因导入羊的受精卵，最终培育出能在乳腺细胞表达人α1-抗胰蛋白酶的转基因羊，从而更易获得这种酶，简要过程如图2。
①获得目的基因后，常利用
②载体上绿色荧光蛋白（GEP）基因的作用是便于
③若要使转基因羊的后代均保持其特有的性状，理论上应选用
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【推荐2】据图回答有关基因工程的问题：
（1）图中正在构建基因表达载体，构建时所需的工具酶有_____________ 和__________ 。
（2）一个完整的基因表达载体包括四部分，分别是启动子、____________ 、____________ 、目的基因。
（3）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是_____________ 识别与结合的位点，促进转录的开始。
（4）如果要将此表达载体导入大肠杆菌细胞中，通常要用___________ 对大肠杆菌处理，使之变成_________ 细胞。该细胞的特性是_________________________________ 。
（1）图中正在构建基因表达载体，构建时所需的工具酶有
（2）一个完整的基因表达载体包括四部分，分别是启动子、
（3）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是
（4）如果要将此表达载体导入大肠杆菌细胞中，通常要用
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【推荐3】科学家将抗胰蛋白酶基因转入山羊体内，并在其乳腺中获得高效表达，该转基因山羊的培育过程如图所示。请据图回答问题。
（1）将治疗肺气肿的a-抗胰蛋白酶基因导入山羊体内，转基因山羊就可以变成批量生产药物的工厂。转基因山羊培育过程中，过程①是基因工程的核心，也就是____________ 。艾弗里等人可以说是基因工程的先导，他们所做的实验不仅证明了生物的遗传物质是DNA，还证明了____________________ 。
（2）选取的山羊成纤维细胞在体外培养时，一般都选用传至10代以内的细胞，原因是______________ 。
（3）收集的卵母细胞，要在体外培养到___________ （填时期）。在过程②之前，必须先去除受体卵母细胞的细胞核，目的是__________________ 。
（4）转基因山羊的培育还依赖于许多技术手段，其中过程③代表的技术手段为________ 。若要保证获得的转基因山羊为雌性，在过程③之前需要对重组胚胎进行___________ 。
（1）将治疗肺气肿的a-抗胰蛋白酶基因导入山羊体内，转基因山羊就可以变成批量生产药物的工厂。转基因山羊培育过程中，过程①是基因工程的核心，也就是
（2）选取的山羊成纤维细胞在体外培养时，一般都选用传至10代以内的细胞，原因是
（3）收集的卵母细胞，要在体外培养到
（4）转基因山羊的培育还依赖于许多技术手段，其中过程③代表的技术手段为
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【推荐1】我国是世界最大的棉花消费国、第二大棉花生产国。利用基因工程技术获得的转基因抗虫棉投入种植生产已经非常成熟，尤其是我国独创的花粉管通道法更是一种十分简便经济的方法，为推动基因工程技术的发展也做出了贡献。
（1）花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后滴加_____ （填“目的基因”或“含目的基因的表达载体”），使目的基因借助花粉管通道进入_____ 。
（2）目的基因导入后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过_____ 才能知道。为确定转基因棉花的DNA上是否插入了目的基因和转基因棉花的目的基因是否成功转录，都会用到分子杂交技术，但两者从杂交对象上的区别是_____ 。
（3）为检验棉花植株是否被赋予抗虫特性，可以在个体水平上做_____ 实验。如果抗虫基因导入成功，且与某一条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交一代，预计后代中抗虫植株的比例占_____ 。
（4）基因工程在原则上只能生产自然界_____ （选填“已存在”或“不存在”）的蛋白质，这些蛋白质不一定完全符合人类生产和生活的需求。因此，在基因工程基础上产生了蛋白质工程，通过_____ ，对现有蛋白质进行改造，或制造新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。
（1）花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后滴加
（2）目的基因导入后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过
（3）为检验棉花植株是否被赋予抗虫特性，可以在个体水平上做
（4）基因工程在原则上只能生产自然界
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【推荐2】【《现代生物科技》专题】下图是从酵母菌中获取棉株需要的某种酶基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题。
（1）图中cDNA文库________ （填“大于”、“等于”或者“小于”）基因组文库。
（2）①过程提取的DNA需要________ 的切割，B是________ 过程。
（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用________ 扩增的方法，其原理是_______________________ 。
（4）农杆菌中的Ti质粒上的TDNA具有________________________________ 的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是___________________ ，可以用________________ 技术进行检测。
（5）如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要利用基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的__________ ，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的___________ 。
（1）图中cDNA文库
（2）①过程提取的DNA需要
（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用
（4）农杆菌中的Ti质粒上的TDNA具有
（5）如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要利用基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的
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【推荐3】阅读下列资料，回答相关问题：
资料1:小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”，检测早孕的准确率在90%以上。
资料2:葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10—12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。
资料3:巴西是全球最大的甘蔗生产国，但是甘蔗容易受螟虫的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟虫的转基因甘蔗已培育成功，并且批准该品种进入市场。
（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将__________ 作为抗原对小鼠进行接种后，从脾脏中提取B淋巴细胞，并设法将其与鼠的骨髓瘤细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选，选出融合的杂种细胞，对该细胞还需进行__________ 培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的符合需要的杂交瘤细胞。单克隆抗体最主要的优点有____________________ 。
（2）资料2中提到的生物技术属于_________ 工程的范畴。在该实例中，直接需要操作的是_____ (选填“肽链结构”、“蛋白质空间结构”、“基因结构”)。
（3）资料3中获得转基因甘蔗的过程中，核心步骤是_________ ，为了避免目的基因和运载体的自身连接成环和反向连接，应该采取的措施是_______________ 。
资料1:小鼠制备的抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”，检测早孕的准确率在90%以上。
资料2:葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高其热稳定性，朱国萍等人在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后，用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸，结果其最适反应温度提高了10—12℃，使蛋白质空间结构更具刚性。
资料3:巴西是全球最大的甘蔗生产国，但是甘蔗容易受螟虫的侵害。2017年6月8日，巴西向世界宣布，全球首款能抵抗螟虫的转基因甘蔗已培育成功，并且批准该品种进入市场。
（1）资料1中，在该“单抗”的生产过程中，将
（2）资料2中提到的生物技术属于
（3）资料3中获得转基因甘蔗的过程中，核心步骤是
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