【推荐1】果蝇灰体和黑体、红眼和白眼分别由等位基因A（a）和B（b）控制，两对基因均不位于Y染色体上。偶然出现的XXY个体为雌性可育。现有两组杂交实验结果如下：
实验一：

P	子代表现型及比例
	F1	F2
黑体红眼♀×灰体白眼♂	1灰体红眼♂：1灰体红眼♀：1灰体白眼♂：1灰体白眼♀	6灰体红眼♂：12灰体红眼♀：18灰体白眼♂：9灰体白眼♀：2黑体红眼♂：4黑体红眼♀：6黑体白眼♂：3黑体白眼♀

实验二：

P	黑体红眼♂×灰体白眼♀
F1个体数	灰体红眼♀   灰体白眼♂   灰体白眼♀      993               989               1

（1）果蝇眼色的遗传遵循_____定律，眼色的这种显性现象的表现形式称为_____，白眼的遗传方式为_____。
（2）实验一中的雌性亲本基因型为_____。若F₂灰体红眼雌雄个体随机交配，产生的F₃有_____种表现型，F₃中灰体红眼个体所占的比例为_____。
（3）实验二F₁中出现了1只例外的白眼雌蝇，请分析：
若该蝇是基因突变导致的，则该蝇的基因型为_____；若该蝇是亲本减数分裂过程中X染色体未分离导致的，则该蝇产生的配子为_____。检验该蝇产生的原因可用表现型为_____的果蝇与其杂交。

【推荐2】某自花传粉植物果实的形状有圆形和三角形两种。某兴趣小组进行了如下实验。选用多对圆形果实和三角形果实植株进行杂交，F₁的果实全表现为圆形，F₁自交得到的F₂中圆形：三角形=15：1。
对此实验结果，兴趣小组的同学提出了两种假设：
假设I：果实形状受一对基因（相关基因用A/a表示）控制，F₁产生的具有受精能力的基因型为A与a两种雌配子或两种雄配子的数量不同。
假设II：该种植物果实形状的遗传受两对独立遗传基因的控制（相关基因用A/a、B/b表示）；
请回答：
（1）对该种植物进行杂交实验时，需进行去雄操作，去雄是指除去__________。实验过程中应对子代的表现型进行记录，并对实验结果进行__________分析。
（2）若假设I成立且雌配子正常，则F₁植株产生的具有受精能力的雄配子基因型及比例是__________；F₂出现15：1需满足的条件有：________________________（至少答出2个）。
（3）若假设II成立，理论上F₁测交后代的表现型及比例为__________；题干F₂中圆形果实植株中基因型与亲本相同的比例占__________；F₂中自交后代发生性状分离的基因型有__________；若F₂的全部圆形果实的植株自交，后代植株中结圆形果实所占的比例是__________。
（4）在假设II的基础上将F₁基因型为AAbb的植株与三角形的植株杂交。后代产生一株结三角形果实植株，推测该植株细胞中可能的原因有：染色体中丢失一条含_____________的染色体；两对基因中一个基因发生突变所致或基因A/a、B/b以外的另一对基因中一个基因发生__________（填“显性”或“隐性”）突变所致（三对基因独立遗传）。
①可采用__________（简便）方法确定是否丢失一条染色体。
②若为基因突变，进一步确定是哪种突变，写出实验方案及预期实验结果______________。

【推荐3】水稻（2N=24）是自花传粉的植物，水稻胚芽鞘上具有紫线性状，该性状可用于杂交水稻种子的筛选。
（1）我国遗传学家率先绘制出世界上第一张水稻基因遗传图，为水稻基因组计划作出了重要贡献。欲测定水稻的基因组序列，需对________条染色体进行基因测序。杂交水稻具有杂种优势，但自交后代不全是高产类型，这种现象称为_________。育种时为保证杂交顺利进行，需对母本作________处理。
（2）为探明紫线性状的遗传规律，科研人员利用纯种水稻进行如下杂交实验（图1）。

由杂交结果可知：控制胚芽鞘有无紫线的两对等位基因（B和b，D和d）位于非同源染色体上，则籼稻1和粳稻2的基因型分别是_________、_________，籼稻2和粳稻1杂交后的F₂代紫线个体中纯合子比例是_________。
（3）已知胚芽鞘具有紫线是因为有花青素，进一步研究发现B基因是花青素合成所需的调控蛋白基因，D基因是花青素合成所需的酶基因，对转录的模板DNA链进行序列分析，结果如图2所示。

据图2分析：产生b基因和d基因的机制分别是____________、_____________；基因型BBdd的水稻胚芽鞘不能合成花青素合成所需酶的原因是____________。
（4）进一步研究发现种子外壳尖紫色、胚芽鞘紫线是由相同基因控制。已知种子外壳尖是由母本的体细胞发育而来，胚芽鞘由受精卵发育而来。科研人员根据表现型能够快速把籼稻（BBdd）和粳稻（bbDD）杂交后的种子与自交种子，人为混入的种子（外壳尖紫色、胚芽鞘紫线）区分，依据是_________。

【推荐2】重组PCR技术是一项新的PCR技术，可将原来两个不相关的DNA连接起来，组成一个新的分子。实验小组从猪源大肠杆菌中扩增得到LTB基因和ST1基因片段，用重组PCR技术构建了LTB-STl融合基因。融合基因的制备过程如图所示。回答下列问题：
   
(1)PCR实验中，为防止外源DNA等因素的污染，使用的微量离心管、缓冲液、蒸馏水等在使用前必须进行________。PCR过程中，子链延伸需要在______进行，在________的催化作用下，该酶需要被________（填离子）激活后才能发挥作用。
(2)设计引物时，引物P1与引物P2的碱基序列________（填“能”或“不能”）互补；引物P2与引物P3的碱基序列________（填“能”或“不能”）部分互补，原因是________。
(3)DNA子链是从5′端向3′端延伸。为了使杂交链顺利延伸子链，至少需要经过2次循环才能得到用于杂交的目的链L、S，则第2次循环的目的是________________。
(4)杂交链延伸生成LTB-ST1融合基因的过程中，________（填“需要”或“不需要”）加入引物。在图中标出杂交链两条母链的3′端和5′端，________
   

【推荐3】水稻的甲品系和乙品系虽然能进行杂交，但杂交后代经常出现不育，这一现象与3号染色体上S基因有关。我国科研人员用甲品系（一对3号染色体为AA）和乙品系（一对3号染色体为BB）进行杂交实验，结果如图1。

   

(1)在F₁减数分裂的过程中，_____彼此分离，形成含A或B甲品系染色体的雌雄配子。据图1可知，雌雄配子结合形成的F₂中染色体为AA的个体极少，因此F₂个体染色体的比例约为AB：BB=1：1。
(2)对3号染色体的s基因测序发现，甲、乙品系的S基因分别为Sa和Sb。甲、乙品系及F₁花粉的显微照片如图2．

   

请依据图2结果，解释图1所示杂交中出现F₂结果的原因：_____。
(3)为探究花粉发育不良的原因，科研人员利用PCR技术检测Sa基因的表达情况，结果如图3。

   

①提取_____，在逆转录酶的作用下形成_____，作为PCR的模板。PCR扩增时，反应体系中还需加入的物质有_____。
②由图3结果推测，F₁植株中Sa基因的表达受到Sb基因的_____（抑制、促进），推测的依据是_____。
(4)研究发现，乙品系、丙品系和丁品系水稻植株S基因位点上Sb基因的拷贝数不同。科研人员用不同品系的水稻进行杂交，检测后代中SaSa基因型的比例，结果如下表所示。

杂交组合	F1基因型	F2中SaSa基因型比例
甲品系×乙品系	Sa/3×Sb	0.4
甲品系×丙品系	Sa/1×Sb	21.0
甲品系×丁品系	Sa/2×Sb	9.7

注：表中的3×、2×、1×代表相应Sb基因的拷贝数量。
实验结果说明，_____。

【推荐1】野生型甜玉米与普通玉米相比，可溶性糖向淀粉的转化较慢导致可溶性糖含量高，汁多质脆，富含多种维生素。为提高甜玉米的生产应用价值，科研人员培育出了超量表达G蛋白转基因甜玉米。在超量表达G基因载体的构建中，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图1、2所示。
   
(1)强启动子能被_______识别并结合，驱动基因持续转录。T-DNA在培育转基因甜玉米中的作用是_____。为使DNA片段能定向插入T-DNA中，可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列，M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是_____。处理好的DNA片段与Ti质粒的重组过程共需要____种酶。
(2)外植体经脱分化形成的愈伤组织放入农杆菌液浸泡后进行植物组织培养，培养基中需加入___进行筛选，获得玉米株系、、、。通过对四个株系的G蛋白表达量进行测定，发现株系的表达量与野生型相近，原因可能是_________。
(3)真核基因的编码区含有内含子和外显子。下图为淀粉酶合成基因片段，其转录后形成的前体RNA需通过剪接（切去内含子对应序列）和加工后方能用于翻译。科研人员希望通过降低淀粉酶合成基因的表达，进一步提高甜玉米中可溶性糖的含量，将吗啉反义寡核苷酸（RNA剪接抑制剂）导入玉米受精卵中，发现其基因表达受阻。科研人员对它的具体作用提出两种假说。
假说1：导致RNA前体上内含子1的对应序列不能被剪切；
假说2：导致RNA前体上外显子2的对应序列被剪切。
   
①为验证上述假说，分别从受精卵发育后3天的实验组和对照组胚细胞中提取_____，逆转录形成cDNA。若假说1成立，使用图示引物2和引物4进行PCR后电泳的结果为_____（填字母）。
A.实验组有目的条带                    B.实验组无目的条带
C.对照组有目的条带                    D.对照组无目的条带
②若要证明假说2，需选择图示引物_____进行PCR。

【推荐2】某两性花植物花小不易进行杂交育种工作。已知雄性可育基因对雄性不育基因为显性。某科研团队利用基因工程将育性恢复基因A、花粉致死基因B、绿色荧光蛋白基因C连锁成为一个A-B-C基因并导入雄性不育个体的一条染色体上，获得育性恢复植株甲。雄性不育植株雄蕊发育不正常，但雌蕊正常。使用无缝克隆技术可将A、B、C基因连接成DNA片段，其机理如图。回答下列问题：

(1)基因工程需要使用的工具酶有_________，后者主要是连接DNA片段之间的磷酸二酯键。与用单酶切割目的基因与载体相比，双酶切割法的优点是_________。
(2)无缝克隆时，T5核酸外切酶沿5'→3'的方向水解DNA，其目的是_________。与传统的酶切再连法相比，无缝克隆技术构建重组质粒的优点有_________（写出2点即可）。
(3)甲植株自交得F₁，F₁中雄性不育植株所占比例为_________。
(4)假设雄性可育植株与育性恢复植株、不育植株可区分。请利用雄性可育纯合植株、甲植株和荧光检测仪，设计杂交实验，探究导入的A-B-C基因是否与雄性不育基因在同一条染色体上（不考虑互换，不用具体描述荧光检测过程）。实验设计方案：甲植株作为母本与雄性可育纯合植株杂交，F₁中通过荧光检测仪检测并选取有荧光的雄性可育植株进行自交，观察并统计F₂中的表型及比例。预期结果：①若有荧光雄性可育植株：有荧光育性恢复植株：无荧光雄性可育植株：无荧光雄性不育植株的比例为3：1：3：1，则_________；②若_________。

【推荐3】人的血清白蛋白在临床上需求量很大，利用转基因奶牛乳腺生物反应器可生产人的血清白蛋白。回答问题：
（1）在培育转基因奶牛时，血清白蛋白基因应与多种调控组建重组在一起，其中_______应连接在目的基因首端。通过______________技术将其导入奶牛的受精卵中。
（2）导入目的基因的受精卵需培养到__________________阶段才可进行胚胎移植。暂不移入的早期胚胎可使用______________方法保存。
（3）进行胚胎移植前需要进行_________，目前最有效最准确的方法是_________，操作的基本程序是:从被检测的囊胚中取出滋养层细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，若未出现杂交链，则胚胎性别为____________，而基因工程中的______________步骤也会用到DNA探针。

【推荐1】人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，由a链和β链（hCGβ）结合而成。近年研究显示，hCGβ也可表达于结肠癌等多种恶性肿瘤细胞，与肿瘤的发生、发展及转移有一定关系。研发抗hCGβ疫苗已成为近年来肿瘤生物治疗新的热点，下图1为其制备的基本方案。
   
(1)构建基因表达载体。图中获取hCGβ基因的方法属于._______，hCGβ基因需要与甲序列一起构建形成融合基因，其目的是_______。当目的基因两侧的小段序列与基因表达载体上某序列相同时，在重组酶作用下发生同源切割，将目的基因直接插入。本方案中研究人员运用同源切割的方式在hCGβ基因两端加上一组同源序列A、B，然后将hCGβ基因与线性质粒载体混合后，在重组酶和DNA连接酶的作用下可形成环化质粒。这一过程与传统重组质粒构建过程相比，无需使用的酶是_______。
(2)扩增基因表达载体。阶段Ⅱ将环化质粒导入用_______处理的大肠杆菌，然后在含有_______的培养基中筛选得到含hCGβ基因表达载体的大肠杆菌后进行扩增。
(3)鉴定基因表达载体。为了检验目的基因是否融合成功，提取大肠杆菌中的质粒为模板，设计相应的引物对融合基因进行PCR，再将扩增产物进行电泳。电泳时需将待测样品与上样缓冲液混合后加入加样孔，缓冲液中含有的溴酚蓝作为电泳指示剂，以防_______。电泳后得到图2所示结果，据图可判断_______号样品最符合要求。
   
(4)导入受体细胞。阶段IV时，需将处理后的酵母菌接种在培养基上培养，该培养基不需要添加以下哪些成分_______（A.氨苄青霉素B.组氨酸C.无机盐D.琼脂），可在此培养基上生长的酵母菌即为含有hCGβ基因表达载体的目的菌株。
(5)目的基因检测与鉴定。转化成功后的酵母菌菌株接种到液体培养基中，30℃恒温摇床上培养后获得培养物。将培养物离心后分出细胞和培养液两部分，细胞经_______处理后，再次离心取上清液，用抗hCGβ单克隆抗体分别进行检测。若培养液及上清液中均能检测到hCGβ蛋白，则说明_______。
(6)发酵罐生产。从生产控制的角度分析，选用AOX1作为hCGβ基因启动子的优势在于_______。

【推荐2】研究发现，拟南芥的ATMYB44基因与ATMYB77基因均可以参与拟南芥耐旱性的调控。为提高水稻的耐旱性，科研工作者将一个拟南芥ATMYB44基因导入野生水稻的叶肉细胞中，经组织培养后获得了一株耐旱水稻植株M。让植株M自交得到F₁，F₁中耐旱植株：不耐旱植株=3：1.回答下列问题：
(1)科研人员提取拟南芥细胞中的ATMYB44基因的mRNA后通过逆转录可获得ATMYB44基因，通过该方法获得的ATMYB44基因与拟南芥细胞中的ATMYB44基因的DNA序列_____（填“完全一致”或“不完全一致；），原因是_____。
(2)科研工作者认为拟南芥ATMYB44基因已经成功导入了水稻细胞的染色体DNA上，根据题中信息分析，作出这一判断的依据是_____。进一步研究发现该基因己经导入了水稻细胞的J号染色体上。
(3)F₁自交，收获F₁中耐旱植株上的种子进行单独种植，其中不发生性状分离的植株约占_____，F₂中耐旱植株：不耐早植株=_____。科研人员通过反复自交，从中筛选出不发生性状分离的耐旱植株记作纯合品系甲。
(4)利一研工作者采用相同的方法将一个拟南芥AT MYB77基因导入野生水稻的叶肉细胞中，获得了耐旱的纯合品系乙。为探究AT MYB77基因是否也位于水稻细胞的5号染色体上，以纯合品系甲和纯合品系乙为材料设计最简便的遗传实验来探究，写出实验思路及预期的结果和结论，不考虑染色体互换及其他变异。
实验思路：_____。
预期结果和结论：若_____，则AT MYB77基因导入了水稻细胞的5号染色体上；若_____，则AT MYB77基因未导入水稻细胞的5号染色体上。

【推荐3】人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory syncytial virus,HRSV)是一种单链 RNA病毒，下图是构建人呼吸道合胞病毒基因组载体的示意图，相关限制酶的识别序列及切割位点为：BclI(T↓GATCA)、 EcoR1(G ↓AATTC)、 XbaI (T↓CTAGA)、 Sau3AI(↓GATC)、 BamHI(G↓GATCC),请据图回答：
   
(1)HRSV的基因组为-RNA,入侵细胞后在______________的催化下合成+RNA。被HRSV侵染的人体组织中易观察到“多核细胞”的现象，请解释此现象的可能成因_____。此现象被科学家发现并应用于____________（技术）。
(2)在RT-PCR中添加的某逆转录酶能实现从单链RNA到双链cDNA的合成过程，试推测该逆转录酶具有____________（①依赖于RNA的DNA聚合酶活性②RNaseH(RNA酶）活性③依赖于DNA的DNA聚合酶活性)等多种活性。HIV的逆转录酶还有DNA内切酶活性，试推测这可能与HIV侵染后____________（生理过程）有关。
(3)过程③需要用____两种酶切割质粒A。过程②设计引物时在两种引物的5'端分别添加____两种酶的识别序列，酶切位点一般不能添加在引物的3'端的主要原因是______。
(4)为制备减毒突变株，科研人员将单个突变碱基引入HRSV基因组cDNA质粒克隆中，流程如下图。已知在细菌体内合成的DNA分子有甲基化修饰，通过PCR扩增的DNA链无甲基化修饰。

   
①DpnI识别甲基化的GATC四个碱基序列，因此其能将图中的_____链水解消化掉，以留下带突变碱基DNA链，其上缺刻（缝隙）在大肠杆菌细胞内完成的修复需要_____酶。
②若已知质粒B为a个，经过程①扩增15个循环，需要突变引物_____个，将过程②形成的产物全部转入大肠杆菌后复制n轮，得到双链突变的DNA______个。