【推荐1】“贵州茅台”被誉为我国的国酒，虽然工艺并不复杂，但是大家公认其独特品质的关键是当地的独特气候、水质、以及当地空气或环境中存在独特的微生物。为了提取当地环境中的独特菌种，某研究小组以优质高粱，上等小麦为原料，制作培养基，搜集、分离空气中的微生物。回答下列问题:
(1)该培养基按成分分类，属于________培养基，培养基在接种微生物前，必须先进行________（灭菌方式）。
(2)将上述培养基暴露在空气中培养一段时间后，取10g该培养基用无菌水制成100ml样品溶液，再将样品溶液稀释10⁴倍后,各取样品溶液0.1 mL在5个细菌培养基平板上接种，培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是______,每克培养基样品中的细菌数量为______×10⁸个;与血细胞计数板相比,此计数方法测得的细菌数目较实际值____,原因是_______。
(3) 生产酒的主要微生物是酵母菌，其代谢类型是_______，其产物乙醇与______试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验。

【推荐2】谷氨酰胺转氨酶（TG酶）被誉为“21世纪超级黏合剂”，TG酶可来源于动植物组织以及通过微生物发酵获得，其中茂原链霉菌（放线菌）是食品行业中常见的TG酶生产菌株。某科研团队通过一系列实验，优化了茂原链霉菌的发酵培养基，所用培养基种类及营养成分配比如下表（酵母膏作用复合，既有氮源也有碳源）。

培养基成分/种类	斜面保存培养基	液体种子培养基	基础发酵培养基
可溶性淀粉	20g/L	20g/L	30g/L
蛋白胨	-	20g/L	30g/L
酵母膏	-	2g/L	2g/L
（NH₄）₂SO4	-	-	-
KNO3	1g/L	-	-
MgSO4·H2O	0.5g/L	2g/L	2g/L
K2HPO4·H2O	0.5g/L	2g/L	2g/L
NaCl	0.5g/L	-	-
FeSO4·H2O	0.01g/L	-	-
琼脂	20g/L	-	-
pH	7.2~7.4	7.0	7.0

回答下列问题：
(1)完成培养基的配制后，常利用______（实验器具名称）进行15～30min的湿热灭菌。
(2)基础发酵培养基中，能够作为氮源的物质有______，实验所用菌种需先在斜面保存培养基上活化，转入液体种子培养基中振荡培养48h后，才能完成菌种的扩大培养。请选择合适的接种工具______（“接种环”“涂布器”或“接种环+涂布器”），振荡培养的目的是______。
(3)将菌种从液体种子培养基中转移到发酵培养基上进行发酵培养，才能产生TG酶，发酵培养基的碳源、氮源种类及其质量浓度均可对茂原链霉菌发酵产生TG酶有影响，现欲探究麦芽糖、蔗糖、葡萄糖、甘油、可溶性淀粉这几种碳源中最适宜的碳源，请简要叙述实验思路______。
   
(4)通过实验，研究团队将葡萄糖确定为最适宜的碳源，并进一步探究较适宜的葡萄糖浓度，如图所示，发酵培养基中，葡萄糖较适宜的质量浓度是______g/L，当质量浓度为50g/L时，酶活性急剧下降，生物量也几乎没有增加，原因可能是______。

【推荐3】研究发现，某种含氨的有机除草剂除草效果良好，但不易降解，长期使用还会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，科研人员按下图所示程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。回答下列问题：

(1)B步骤中使用的培养基应以_____为唯一氮源。一般采用_____法对该培养基进行灭菌。培养基中琼脂的作用是_____。
(2)图中使用的接种工具是_____。用图示方法接种时，接种工具要灭菌_____次。一般从第_____次划线末端处最容易分离到目的菌。若划线时不小心将培养基划破，可能造成的结果是_____。
(3)应选择步骤D中_____的菌落进一步纯化培养，即可获得能净化土壤的目的菌。

【推荐1】下图是植物组织培养的过程，试据图回答相关问题：

(1)外植体是指用于植物组织培养的材料，如：__________________等，在植物组织培养过程中，选择幼嫩的器官、组织用于接种的原因是____________________________。
(2)①②分别是_____________过程，启动①②的关键激素是______________，所以在植物组织培养过程中需要两次“转接”，一是将愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上，二是长出芽后再转接到诱导生根的培养基上。
(3)在植物组织培养过程中，要进行一系列的消毒、灭菌，且要求无菌操作的目的是_____________，且有些杂菌会危害培养物的生长。配制的MS培养基通常用___________进行湿热灭菌。
(4)组织培养得到的试管苗是非常幼嫩的植株，这样的试管苗一般要经过_______________，其目的是______________________________，以保证移植到大田能顺利成活。
(5)植物细胞培养技术是工厂化生产相关代谢产物的一条有效途径，在生产中通常要培养到_______________阶段，与传统的从植物体内提取相比，工厂化生产细胞产物的突出优点是：________________________________。

【推荐2】植物体细胞杂交技术可将不同种植物的优势集中在一个个体上，培育人们生产所需的优良杂种植株。如图为利用某种耐酸植物甲（4N）和高产植物乙（2N），培育高产耐酸植物丙的过程。回答下列问题∶

（1）①过程为酶解法去壁，该过程所需的酶是_____，进行该操作前需对甲、乙植物细胞进行_____处理，以防止杂菌污染。
（2）“甲'+乙'”的名称为______，杂种细胞形成的标志是_____。
（3）②过程表示_____。植物丙'的体细胞中有_____个染色体组，若已确定植物丙'有耐酸的特性，则③过程“选择”的目的是_____。
（4）植物细胞工程可作为植物繁殖的新途径，例如植物微型繁殖技术。请说明与常规的种子繁殖方法相比，植物微型繁殖技术具有的优点∶_____（写出两点）。

【推荐3】玉米原产亚热带，幼苗抗寒能力弱，为提高玉米植株的抗寒性，科学家利用基因工程将耐寒蛋白基因（LEA基因）导入玉米细胞中获得转基因玉米。如图为Ti质粒和LEA基因的酶切位点，其中酶A、B、C均为限制性核酸内切酶。回答下列问题：

(1)获取LEA基因的常用方法有___________________________________（答两种）。将Ti质粒和LEA基因构建成基因表达载体需要利用酶_____切割DNA，原因是__________________________________。
(2)构建好的基因表达载体导入土壤农杆菌前，需要用含Ca²⁺的溶液处理土壤农杆菌，目的是_________________。Ti质粒中的氨苄青霉素抗性基因的作用是__________________。
(3)将导入基因表达载体的土壤农杆菌与玉米根尖或茎尖制成的愈伤组织混合培养，经_________________获得玉米植株。为确保获得的玉米植株是抗寒性较强的转基因玉米，可进行__________________检测，之后再进行玉米植株的耐寒性实验。

【推荐1】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力，再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体，与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如图。
据图回答下列问题：

(1)植物体细胞杂交技术所依据的原理是___________
(2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_____存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____。原生质体经过_____再生，进而脱分化形成愈伤组织。
(4)对杂种植株进行_____接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。

【推荐2】同源四倍体的紫花苜被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）

(1)据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是____。
(2)步骤①可采用化学法进行诱导，化学法除聚乙二醇融合法外，还有____法等。原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是____。融合后的原生质体经过____再生形成杂种细胞，进而经过②脱分化形成愈伤组织。
(3)步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。请判断：得到的杂种植株，理论上是否可育？并简要阐述理由：____。
(4)利用此技术路线培育植物新品种具有独特的优势，这是由于____。

【推荐3】花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图1．

（1）植物细胞融合技术中过程①需要利用_____ 酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体．过程②用化学诱导剂诱导细胞融合，细胞层面可能会得到两两融合的细胞类型有_____种．供体叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体比较所特有的结构是_____，该结构的有无可作为初步筛选杂种细胞的标志．
（2）③④培养过程中在培养基成分上的区别主要是_____的不同．④过程还先后包括下列哪些操作顺序_____．
①诱导形成芽　②取合适外植体　③诱导形成未分化状态的细胞　④诱导形成根
（3）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 通过PCR技术进行扩增，可以得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定．图2是用该引物对双亲及再生植株1﹣4 基因组DNA进行扩增的结果．据图判断，再生植株1﹣4中一定是杂种植株的有_____．

（4）若要筛选出具有高抗性的杂种植株．可对以上杂种植株分别进行_____接种实验．

【推荐1】兰花是大众喜爱的花齐，具有庞大的市场价值。兰花的生产早已形成了成熟的组织培养生产链。下图是植物组织培养基本流程。
外植体 A B 再分化 胚状体→植物体
（1）高度分化的植物细胞具有全能性的原理是___________________。上述过程中A、B分别指的是_______________、_____________。
（2）组织培养的培养基一般为_____________（物理性质）培养基，其主要成分除有机营养成分外，无机营养成分为________________，培养基一般选用蔗糖而不选用葡萄糖的理由是______________________。
（3）在A和“再分化”的培养过程中，需要更换培养基的原因是_____________________。接种后2～5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是_______________。
（4）植物组织培养除了能实现快速繁殖外，还有哪些应用___________________（两点即可）。

【推荐2】科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如下图所示，请据图回答下列问题∶

(1)过程①常用的酶是_____，细胞融合完成的标志是_____。
(2)植物体细胞杂交依据的生物学原理有_____。
(3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂_____诱导，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面的荧光可观察到_____种不同的原生质体（只考虑时细胞两两融合的情况），当观察到_____可判断该原生质体是由番茄原生质体和马铃薯原生质体融合而成的。
(4)过程④中的培养基常添加的植物激素是_____。若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则"番茄—马铃薯"细胞在有丝分裂后期含_____条染色体。则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株为几倍体？_____。
(5)如果形成融合的原生质体来源于同一株番茄的两个细胞，那么更常用且有效地得到番茄杂种植株的处理方法是_____。

【推荐3】两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。

   

(1)过程①用____________酶处理获得原生质体，获得耐盐小麦新品种的原理有____________。
(2)过程②用不同剂量的紫外线照射中间偃麦草原生质体的目的是____________。
(3)过程③用化学法诱导原生质体的融合，除PEG融合法外，还有____________法；若三个及以上的原生质体无法融合，得到原生质体的种类有____________种。
(4)将杂种细胞培养为杂种植株需要用到____________技术，得到的杂种植株不一定是我们需要的新品种，为了减少生产成本和工作量，请尝试提出最佳的筛选的方案。________________________。