【推荐1】棉花受蚜虫侵染后出现植株矮小，减产等现象。为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）连接成融合基因GA与质粒（pBⅠ121）结合，然后导入棉花细胞。回答下列问题：

(1)载体（pBI121）能将融合基因GA送入受体细胞，应具备的特点是_____（写出两点）。
(2)为获得ACA基因，应用限制酶_____酶切。构建重组载体时，使用限制酶KpnI和XhoI分别切割融合基因和质粒（pBI121），其目的是_____。应将融合基因插入在启动子和终止子之间，启动子的功能是_____。
(3)使用PCR反应快速扩增融合基因，常在PCR扩增仪中自动完成，常采用_____来鉴定PCR的产物。将转基因棉花细胞利用_____技术培育成转基因棉花植株，在该过程中，愈伤组织形成后需要定期地将它们分成小块接种到新培养基上以保证其长期旺盛地生长，否则会停止生长甚至老化变黑死亡，原因是_____（写出一点即可）。

【推荐2】根据资料回答以下问题：
I.抗菌肽具广谱抗细菌特点，科研工作者将若干编码抗菌肽（ABP）序列按照首尾相连插在质粒PLG339的布康唑抗性基因（Bm^r）内部形成重组质粒，如图1。

（注：色氨酸是微生物生长必须的氨基酸，基因trpA的表达产物可使细胞利用无机氮源合成色氨酸）
（1）大肠杆菌和酵母菌两种菌群，可作为导入重组质粒的受体细胞是_________，原因_________。
（2）为生产抗菌肽，选择traA基因缺陷型的受体菌，采用以下方法筛选含重组质粒细胞。
第一步：配制培养基，接种受体菌进行筛选。配制培养基时，除加入细胞生长必需营养外，在成分上还应注意______________。
第二步：采用“影印法”，将第一步所得菌落转移到添加___________的培养基上进行培养。
Ⅱ.酿酒酵母不能利用木糖，木酮糖激酶是木糖转化的关键酶。科研人员将两种启动子与木酮糖激酶基因结合并导入酵母细胞，构建能高效利用木糖的重组酵母，如图2.
（1）过程③使用的限制酶是_______________。过程⑤需先用LiAc处理酿酒酵母细胞，目的是_________，使酵母菌易于吸收环境中重组DNA。
（2）对导入两种启动子的重组酵母的发酵性能进行分析，通过检测________________来指示酶的活力，进而比较启动子A与B功能的强弱，筛选出高效的工程菌。

【推荐3】根据所学知识，完成下列题目：
(1)1型糖尿病是因免疫系统将自身胰岛素作为抗原识别而引起的自身免疫病。小肠黏膜长期少量吸收胰岛素抗原，能诱导免疫系统识别该抗原后应答减弱，从而缓解症状。科研人员利用1型糖尿病模型小鼠进行动物实验，使乳酸菌在小鼠肠道内持续产生人胰岛素抗原，为此构建重组表达载体技术路线如下。据图回答：

①为使人胰岛素在乳酸菌中高效表达，需改造其编码序列。下图是改造前后人胰岛素B链编码序列的起始30个核苷酸序列。据图分析，转录形成的mRNA中，该段序列所对应的片段内存在碱基替换的密码子数有________个。

②在人胰岛素A、B肽链编码序列间引入一段短肽编码序列，确保等比例表达A、B肽链。下列有关分析正确的是________。
A．引入短肽编码序列不能含终止子序列               B．引入短肽编码序列不能含终止密码子编码序列
C．引入短肽不能改变A链氨基酸序列                  D．引入短肽不能改变原人胰岛素抗原性
③在重组表达载体中，SacⅠ和XbaⅠ限制酶仅有图示的酶切位点。用这两种酶充分酶切重组表达载体，可形成________种DNA片段。
(2)乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞内合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1)，可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义基因表达载体的结构示意图。
   
①图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的________(填器官名称)中表达。
②从番茄成熟果实中提取________作为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，对它们进行拼接构成融合基因并扩增。
③合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和Xba Ⅰ的酶切位点，用限制酶________对上述两个基因进行切割后，再将它们拼接成融合基因，相应的Ti质粒和融合基因均使用限制酶______________________进行切割，以确保融合基因能够插入载体中。
④为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因________(填“正向”或“反向”)插入启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。
⑤在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，________(填“能”或“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段作探针进行检测，理由是___________________________________________。

【推荐2】基因编码具有高度特异性杀虫活性的C蛋白，V基因编码的V蛋白是结构和作用机理不同于C蛋白的杀虫蛋白。 利用C-V融合基因和载体（如图），获得具有高抗虫性的转基因玉米。 回答下列问题：

(1)作为基因工程的载体需要具备的条件有__________（答两点）。将C-V融合基因插入到T-DNA中，插入不会破坏T-DNA的作用，T-DNA的作用是________。
(2)一般用相同的限制酶分别切割含C-V融合基因的DNA片段和载体，目的是________，然后将切割后的片段拼接起来，需使用________酶处理。载体中卡那霉素抗性基因作为________，可将含目的基因的受体细胞筛选出来。
(3)从个体水平对转基因玉米进行检测与鉴定，具体方法是________。与导入一种抗虫基因相比，此玉米的优点是_______。

【推荐1】农业生产中除草剂的有效成分草甘膦能够专一性抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使农作物受损。现以矮牵牛为实验材料，以EPSP 合酶基因(大约 256个碱基对)为目的基因探究利用转基因技术解决这个问题的一种方法：

限制酶名称	识别序列和切割位点
Sau3AI	↓GATC
BamHI	G↓GATCC
EcoRI	G↓AATTC
SmaI	CCC↓GGG
HindII	GTT↓AAC
KpnI	GGTAC↓C

说明：供体DNA 中的EPSP 基因以β链为转录模板链
(1)综合以上描述，用一句话概括该探究实验的名称__________。
(2)分别选用限制酶__________和__________处理含有目的基因的DNA 和质粒，再用__________(填“E. coli DNA 连接酶”或“T4 DNA 连接酶”)处理并构建重组质粒。
(3)将目的基因导入矮牵牛体细胞内一般采用____________。
(4)研究人员将目的基因导入矮牵牛体细胞，对矮牵牛受体细胞进行检测，并通过电泳技术分析结果。电泳检测结果如图。你认为该电泳结果_____________(填“能”或“不能”)确定1、2、3、4号转基因矮牵牛均培育成功，理由是：___________。

【推荐2】为防止烟草花叶病毒TMV感染烟草造成减产，研究人员在绞股蓝细胞中发现了抗TMV的基因，利用转基因技术培育出了抗TMV烟草，操作流程如图所示。请分析回答以下问题：

（1）图中的RNA来源于____细胞，①表示____过程，通过①②过程获得的目的基因____（填“含有”或“不含有”）启动子。
（2）过程③对目的基因在Ti质粒位置要求是____，过程④最常用的方法是____，过程⑤用到的细胞工程技术是____。
（3）过程⑥目的基因的检测与鉴定，，在个体水平上检验获得的烟草能否抗TMV的方法是_______________。

【推荐3】科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如图所示：

（1）目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入受体细胞染色体DNA上，这需要通过检测才能知道，检测采用的最好方法是____________。
（2）科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于__________。
（3）利用基因工程技术培育抗虫棉，相比诱变育种和杂交育种，具有目的性强和________________等突出的优点。
（4）有人担心种植上述转基因抗虫棉，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”，请提出你的解决方法：_______________________________。