【推荐2】黑腹果蝇的棒眼性状是由X染色体上的“16A”区域重复导致。在同一条X染色体上出现两个相邻的“16A”区域时，会出现棒眼；出现三个相邻的“16A”区域时，出现重棒眼性状。各基因型黑腹果蝇复眼中平均小眼数如下表，请回答下列问题：

雌蝇			雄蝇
基因型	16A区域数目	小眼数	基因型	16A区域数目	小眼数
+/+	2	780	+	1	740
+/B	3	360	B	2	90
+/BB	4	45	BB	3	30
B/B	4	70

（1）黑腹果蝇棒眼性状是____________（填变异类型）导致的；
（2）若基因型为+/+（野生型）、+/B（棒眼）的雌果蝇X染色体上16A区域的位置关系如图1、图2所示，请在图3中完善基因型为+/BB的雌果蝇X染色体上16A区域的位置关系图____________。

（3）请根据表分析，果蝇复眼中小眼的数目跟____________和____________有关。
（4）请利用表中各基因型的果蝇设计一个杂交方案，可通过后代果蝇眼形的差异直接判断果蝇的性别，用遗传图解和必要的文字对方案原理加以说明____________。

【推荐3】蜜蜂是一类营社会性生活的昆虫。嗅觉在它们的生存和繁衍过程中具有非常重要的作用。已知蜂王（可育）和工蜂（不育）均为雌蜂（2n=32），是由受精卵发育而来的；雄蜂（n=16）是由卵细胞直接发育而来的。研究发现，在嗅觉正常的蜂群中出现了部分无嗅觉的蜜蜂，现针对蜜蜂的嗅觉进行一系列遗传学实验。回答下列问题：
（1）用一只无嗅觉蜂王与一只嗅觉正常雄蜂交配，其后代F₁中雌蜂均嗅觉正常，雄蜂均无嗅觉。在相对性状中_____________（填“嗅觉正常”或“无嗅觉"）是显性性状，判断的依据是________________________________________________________。
（2）用F₁中的蜂王和雄蜂交配，F₂中出现了两种新的表现型，即传统气味型（嗅觉系统只能识别传统的气味分子，而不能识别非典型气味分子）和非典型气味型（嗅觉系统只能识别非典型气味分子，而不能识别传统的气味分子），已知嗅觉正常型蜜蜂均能识别传统和非典型两类气味分子。杂交结果如下：
F₁嗅觉正常型♀×无嗅觉型♂

↓

F₂嗅觉正常型：传统气味型：非典型气味型：无嗅觉型
①分析可知，蜜蜂嗅觉的相关性状至少由_________对等位基因控制。
②若F₂雌雄蜜蜂中四种表现型的比例为1：1：1：1，则说明相关基因在染色体上的位置关系是_______________，其中，F₂中嗅觉正常型个体的基因型有_________种。
（3）研究发现，蜜蜂体内气味受体分为传统气味受体（由R₁基因控制合成）和非典型气味受体（由R₂基因控制合成）。已知，雄蜂个体中上述基因所在染色体的相应片段缺失则会致死，雌蜂个体中上述基因所在同源染色体的相应片段均缺失才会致死。用紫外线照射F₁中嗅觉正常的蜂王，其后代只出现传统气味型和无嗅觉型，分析造成这种现象的可能原因有：①F₁蜂王的卵原细胞中含有R₂基因的染色体片段缺失；②___________________。请利用上述信息，采用两种较为简便的方法确定造成这种现象的原因_______________。

【推荐1】天然存在的野生型质粒由于分子量大、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷，不能满足作为运载体的要求，因此往往需要以多种野生型质粒为基础进行人工构建新质粒．
假设下列三种质粒A、B、D，分别含有抗生素抗性基因r、s，及酶a、b的酶切位点．现需要通过基因工程大量表达目的基因M的产物。

（1）组成目的基因M的基本单体有哪几种_____。切割目的基因的酶b称为_____酶。
（2）作为基因工程的运载体，必须具备的条件是_____。
A．具有一个或多个限制酶切位点，以供外源基因插入其中
B．具有标记基因，以检测重组DNA分子是否导入受体细胞
C．能在宿主细胞中复制并稳定保存
D．必须是细菌的质粒或噬菌体
E．对宿主细胞无害
（3）目的基因与运载体通过_____酶连接形成重组DNA分子。
（4）如果选择质粒A作为目的基因M的运载体，其缺陷是_____；如果选择质粒B作为目的基因M的运载体，其缺陷是_____。为解决上述野生型质粒作为运载体的缺陷，进行人工构建新质粒。
（5）如果用酶a分别切割质粒A、B，形成人工构建的新质粒（X），X是否是较理想的目的基因运载体，为什么？_____如果用酶a分别切割质粒A、D，形成人工构建的新质粒（Y），Y是否是较理想的目的基因运载体，为什么？_____。

【推荐2】根据所学知识，完成下列题目：
(1)1型糖尿病是因免疫系统将自身胰岛素作为抗原识别而引起的自身免疫病。小肠黏膜长期少量吸收胰岛素抗原，能诱导免疫系统识别该抗原后应答减弱，从而缓解症状。科研人员利用1型糖尿病模型小鼠进行动物实验，使乳酸菌在小鼠肠道内持续产生人胰岛素抗原，为此构建重组表达载体技术路线如下。据图回答：

①为使人胰岛素在乳酸菌中高效表达，需改造其编码序列。下图是改造前后人胰岛素B链编码序列的起始30个核苷酸序列。据图分析，转录形成的mRNA中，该段序列所对应的片段内存在碱基替换的密码子数有________个。

②在人胰岛素A、B肽链编码序列间引入一段短肽编码序列，确保等比例表达A、B肽链。下列有关分析正确的是________。
A．引入短肽编码序列不能含终止子序列               B．引入短肽编码序列不能含终止密码子编码序列
C．引入短肽不能改变A链氨基酸序列                  D．引入短肽不能改变原人胰岛素抗原性
③在重组表达载体中，SacⅠ和XbaⅠ限制酶仅有图示的酶切位点。用这两种酶充分酶切重组表达载体，可形成________种DNA片段。
(2)乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞内合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1)，可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义基因表达载体的结构示意图。
   
①图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的________(填器官名称)中表达。
②从番茄成熟果实中提取________作为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，对它们进行拼接构成融合基因并扩增。
③合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和Xba Ⅰ的酶切位点，用限制酶________对上述两个基因进行切割后，再将它们拼接成融合基因，相应的Ti质粒和融合基因均使用限制酶______________________进行切割，以确保融合基因能够插入载体中。
④为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因________(填“正向”或“反向”)插入启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。
⑤在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，________(填“能”或“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段作探针进行检测，理由是___________________________________________。

【推荐3】嗜热土壤芽孢杆菌产生的P-葡萄糖苷酶（BglB)是一种耐热纤维素酶，为使其大量生产，科学家打算利用转基因技术使大肠杆菌表达BglB酶，开展了以下试验：

注：图中限制酶的识别序列及切割形成的黏性末端均不相同
(1) 根据所学细胞学有关知识，利用大肠杆菌____________(能、不能）生产人的糖蛋白，你作出判断的理由是___________________________________。
(2) 大肠杆菌经常作为基因工程的受体细胞，其优点是____________________________。
(3) PCR扩增时，可以从___________的基因组文库中获取bglB基因作为模板。
(4) 如图为所选质粒的酶切图谱，bglB基因两端不含图中限制酶的识别序列，为使bglB基因能重组进该质粒并构建表达载体，扩增的bglB基因两端应当加上 _______________酶或___________酶的识别序列。
(5) 若某种限制酶切割形成的DNA片段如下，则可以选择____________进行连接，连接后可形成的DNA片段为____________________________________(写出两种）。
…AC GC… …GC GT…
…TG CG… …CG CA…

【推荐1】动物细胞工程能够大量生产各种抗病疫苗和诊断治疗肿瘤的单克隆抗体，在现代生物技术中发挥主要作用。回答下面的问题∶
（1）利用杂交瘤细胞生产的单克隆抗体是通过由_______细胞在体外或体内培养获得的抗体，写出获得该细胞的主要步骤（用文字和箭头表示）∶____________。
（2）灭活病毒诱导细胞融合的原理是____________。用 96 孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量接种______。
（3）杂交瘤技术制备的单克隆抗体对人体有明显的副作用，通过单个 B 细胞抗体制备技术生产的单克隆抗体完全消除了这些副作用。该技术的一般步骤是∶鉴定和分离单个 B细胞→扩增和克隆抗体基因→表达、筛选和鉴定抗原特异性抗体。扩增和克隆的抗体基因是以 B细胞中分离的 mRNA 为模板，经______形成的，该过程需要______酶催化；表达、筛选和鉴定是通过表达载体转入受体细胞实现的，构建表达载体必需的工具酶有______，表达载体在组成上除必需有插入的抗体基因、标记基因和复制原点外，还必需有_______。

【推荐2】非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因克隆猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题：

(1)图中步骤①采用的技术手段是_________，进行步骤③时，受体C猪子宫对外来胚胎基本上_________，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(2)B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期更换培养液以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为_________。
(3)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建_________，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是_________。
(4)利用抗原—抗体杂交技术判断D猪是否产生ASFV抗体，使用的抗原物质最好是_________。该抗体也可以使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和_________细胞融合获得的。

【推荐3】干扰素是治疗癌症的重要药物，传统方法必须从血液中提取，每升人血液中只能提取0.5g,所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下图的方式生产干扰素。请据图回答：

（1）若要使获得的转基因牛乳汁中含有人干扰素，构建的基因表达载体必须包括：_____的 启动子、人干扰素基因、终止子、标记基因和复制原点等。将基因表达载体导入受精卵 最有效的方法是_______。
（2）通常情况下，对供体和受体母牛选择后，对供体母牛用_____处理可获得更多的卵母细胞，对受体母牛要进行同期发情处理是为了_____。
（3）为了实现干扰素的批量生产，早期胚胎进行移植之前要进行质量检测，并要求早期胚胎细胞中的性染色体组成为_______。通过_____技术获得二分胚①和②，可以在细胞水平 上通过对_____的分析进行性别鉴定。
（4）近年来，关于胚胎干细胞的研究越来越多。胚胎干细胞具有发育的全能性，如图所示的细胞A和细胞B分别是_____细胞、_____细胞，可以从这些细胞中获得胚胎干细胞。

【推荐2】烟草易受烟草花叶病毒（TMV）感染而大幅度减产。绞股蓝（一种植物）细胞中含有抗TMV基因，能抵抗TMV感染。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV烟草。
(1)下表是相关研究中的一些步骤，请结合所学基因工程知识完成以下表格。

实验步骤	方法要点
获取目的基因	从绞股蓝细胞中提取RNA，通过①_____过程获得DNA；再通过PCR技术扩增出大量目的基因片段
②_____	将目的基因插入Ti质检
转化细胞	常用③_____方法将重组质粒导入受体细胞
④_____	在含有卡那霉素的培养基上培养受体细胞
获得再生植株	运用⑤_____技术培育
转基因植株分析	从分子水平与⑥_____水平上对转基因植株进行检测与鉴定

(2)如图为经人工改造后的某种Ti质粒，该质粒中部分片段序列及部分限制酶识别序列已标出。据此图完成Ⅰ~Ⅲ题：

Ⅰ、步骤②是整个基因工程操作的核心，为了将目的基因插入Ti质粒，需要用限制酶和_____酶。为了避免_____，一般采用双酶切法，使切开的DNA片段具有两个不同的末端。
Ⅱ、在用PCR技术获取目的基因时，为了方便后续的剪切和连接，设计引物时会将限制酶识别序列加在目的基因序列的两端，应选用下列_____（填序号）作为PCR引物。

Ⅲ、穿梭载体是指同时可在两种不同生物中稳定存在的载体，因该载体含有两种生物不同的复制原点。Ti质粒即为一种穿梭载体，质粒上除启动子、终止子、多个限制酶酶切位点和标记基因外，还有_____的复制原点。

【推荐3】神经纤毛蛋白-1（NRP-1）能在肿瘤细胞内表达，是血管内皮生长因子家族成员的受体，通过参与多种信号转导来促进肿瘤血管的生成。研究人员从肿瘤细胞中扩增出NRP-1基因并用其导入大肠杆菌体内进行培养，分别提纯相应NRP-1，并用其免疫小鼠，以制备抗NRP-1的单克隆抗体（NRP-1MAb）。回答下列问题：
(1)利用PCR技术可以从肿瘤细胞的基因组中分离扩增得到完整的NRP-1基因，其原因是______。将扩增后的目的基因构建成表达载体后，导入用______处理的大肠杆菌体内完成转化，最后可从大肠杆菌中分离提纯相应NRP-1。
(2)研究人员用NRP-1对小鼠进行免疫的目的是______。将小鼠脾中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上不能存活的是______。
(3)为进一步确定NRP-1MAb靶向治疗时的用药方式，研究人员将直肠癌组织块制成单细胞悬液，等量注入4组裸鼠右前腋下，接种后3天开始施加NRP-1MAb，每隔10天给药1次，共4次。给药后测算一次肿瘤体积，结果如图所示：

分析上图可以得出的结论是______。根据实验结果，请给出使用NRP-1MAb进行靶向治疗癌症时的临床建议：______。