【推荐1】植物基因工程中常用到植物组织培养技术。为了获得纯合的转K基因植株，实验小组设计了一个实验流程，其主要内容如图所示。回答下列问题：
   
(1)用农杆菌转化法导入基因时，一般将目的基因嵌入到Ti质粒的_____________上。图中A代表的是_____________。
(2)由单核花粉粒培育出愈伤组织的过程称为_____________，其实质是_____________。
(3)B过程可用_____________处理愈伤组织的细胞，从而使染色体数目加倍。由含K基因的愈伤组织细胞（2n）培育出幼苗的过程中，_____________（填“需要”或“不需要”）光照处理，原因是_____________。
(4)经过培养、筛选最终得到的二倍体植株即为纯合的转K基因植株。K基因纯合的原因是_____________。

【推荐2】人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白，基本步骤如下：
Ⅰ。采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子，通过体外受精，形成受精卵；
Ⅱ。将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ。电脉冲刺激重组细胞，促使其形成早期胚胎；
Ⅳ。将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）步骤Ⅰ中，卵母细胞与精子结合过程中防止多精子入卵受精的生理反应包括_____。自然条件下，受精卵是在雌性动物的_____内完成的。
（2）步骤Ⅱ中，将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是_____。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤称为_____。
（3）步骤Ⅲ中，进行早期胚胎培养时，培养液的成分应包括：无机盐和有机盐、维生素、氨基酸、_____和核苷酸等营养成分，以及血清等物质。一般情况下，通常在合成培养基中加入一定量的抗生素，其目的是_____。
（4）步骤Ⅳ中，应选择性别为_____的奶牛胚胎进行移植。
（5）胚胎移植实际上是_____和_____共同繁殖后代的过程。进行胚胎移植的优势是_____。

【推荐3】接种疫苗是预防传染病的一项重要措施，乙肝疫苗的使用可有效阻止乙肝病毒的传播，降低乙型肝炎发病率。乙肝病毒是一种DNA病毒。重组乙肝疫苗的主要成分是利用基因工程技术获得的乙肝病毒表面抗原（一种病毒蛋白）。回答下列问题。
(1)接种上述重组乙肝疫苗不会在人体中产生乙肝病毒，原因是___。
(2)制备重组乙肝疫苗时，需要利用重组表达载体将乙肝病毒表面抗原基因（目的基因）导入酵母细胞中表达。重组表达载体中通常含有抗生素抗性基因，抗生素抗性基因的作用是___。能识别载体中的启动子并驱动目的基因转录的酶是___。
(3)目的基因导入酵母细胞后，若要检测目的基因是否插入染色体中，需要从酵母细胞中提取___进行DNA分子杂交，DNA分子杂交时应使用的探针是___。

【推荐1】新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。下图为筛选、制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。请据图回答下列问题：

（1）在制备抗S蛋白单克隆抗体的过程中，先用纯化的______对小鼠进行免疫，并从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞。请完善以小鼠的脾脏为材料制备细胞悬液的主要实验步骤：对新鲜脾脏进行处理，__________________。
（2）将提取的B淋巴细胞与小鼠的______细胞融合，用HAT培养基筛选获得的杂交瘤细胞还需要进行______和______，经多次筛选，获得分泌抗S蛋白单克隆抗体的细胞。
（3）将能分泌抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或______。在体外培养时，除需满足营养条件外，还需要满足的其他条件有__________________（答出两点即可）。
（4）与从动物血清中分离出的抗体相比，抗S蛋白单克隆抗体的优势体现在：________________________（答出两点即可）。

【推荐2】依据下面细胞融合的示意图，回答下列关于细胞工程的问题。

(1)若上图为获得番茄-马铃薯杂种植株的部分技术流程图，需要用________________和____________处理番茄和马铃薯细胞才能获得A和B，用于细胞融合。从融合成功的细胞中筛选出杂种细胞D，并通过____________技术培育出番茄-马铃薯杂种植株，但该成熟杂种植株的地上部分并未结番茄，地下部分也并未结土豆，从基因表达的角度分析，可能的原因是____________。
(2)若A是小鼠骨髓瘤细胞，B是能产生特定抗体的B淋巴细胞，诱导融合之后，需要用特定的选择培养基进行筛选。在该培养基上，____________细胞和____________的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能够生长。得到的杂交瘤细胞不止一种，原因是从小鼠脾脏中分离的______________细胞不止一种。
(3)动物细胞融合技术的一个重要应用是制备单克隆抗体，单克隆抗体的优点是____________。

【推荐3】2020年初新型冠状病毒肆虐全球，生物医学工作者进行了专业应对。请回答相关问题：
(1)采集、扩增：核酸检测样本多采集于_______ 、血清等，样本应低温保存，尽快检测。
(2)检测：近期某地区爆发新冠病毒，需进行全民多次检测。为加快检测进度，将多人的样本采集后放到同一根采样管中进行检测。如检测结果为阳性，说明：_______，为进一步确定感染者，医务工作者下一步要做的工作是：_______。
(3)新冠病毒发光检测试剂盒以单克隆抗体为主要“部件”，该试剂盒能快速准确地检测出病例是利用了单克隆抗体的______等优点。制备过程：先给小鼠注射病毒蛋白，一段时间后，抗体检测呈阳性后，从小鼠的脾脏中获取_______细胞，用PEG诱导该细胞与小鼠的_______细胞融合。细胞融合后需进行两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出_______，第二次筛选的目的是筛选出______。当杂交瘤细胞在体外做大规模培养时，为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是_______。该杂交瘤细胞_______（填“能”或“不能”）被培养成一个新个体。
(4)灭活疫苗：灭活疫苗的制备需要经过细胞培养、病毒培养、灭活、纯化等步骤，第一步细胞培养的目的是 _______。细胞培养需要在CO₂培养箱中进行，二氧化碳的作用是_______。
(5)腺病毒载体重组疫苗：腺病毒载体重组疫苗和mRNA疫苗产生抗原的场所都是在______（填“内环境”或“细胞内”）。与传统的减毒疫苗相比，腺病毒载体重组疫苗和mRNA疫苗等新型疫苗的安全性有所提高，是因为_______。
(6)突破性病例是指完成第二剂疫苗接种至少2周内，仍感染新冠病毒的病例。产生突破性病例可能的原因是：_______。

【推荐1】2018年11月基因编辑婴儿事件震惊了世界，舆论一片哗然，某副教授团队利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将受精卵中的艾滋病病毒受体基因CCR5（CCR5蛋白是HIV-Ⅰ感染的“入口”）进行修改，拟培育出具有艾滋病免疫能力的基因编辑婴儿。下图1、图2分别为相关的技术原理和实施过程。

(1)CRISPR/Cas9系统是由Cas9蛋白和向导RNA（SgRNA）组成的复合体。在基因编辑过程中、SgRNA引导Cas9到外源DNA的特定位点进行切割，Cas9蛋白可能是一种特殊的__________酶、Cas9/sgRNA复合体能够精准识别某核苷酸序列的原因可能是___________。
(2)将Cas9蛋白和向导RNA序列注入受精卵的方法称为___________。
(3)操作后的受精卵需要先在发育培养液中继续培养以检查___________。其培养液成分比较复杂，请列举除水和血清以外课本中出现的三类营养成分__________。
(4)利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除一个长度为1200bp的基因，在DNA水平上判断基因敲除是否成功所采用的方法是___________，该方法的操作步骤是__________。
(5)我们国家明令禁止的以___________为目的的人类胚胎基因编辑活动，随后我国科技部官网已提出全面暂停此项研究。

【推荐2】[生物——选修3:现代生物科技专题]
研究人员将人工丝蛋白基因导入到蚕卵内，对蚕卵的基因改造获得成功。含有人工丝蛋白的蚕茧发出绿色荧光，比正常的蚕茧更加轻薄。请回答下列问题：
（1）进行转基因操作前，需用_____________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。将人工丝蛋白基因导入到蚕卵体内，常用的方法是_____________。
（2）绿色荧光蛋白基因可以作为_____________，用于鉴别和筛选蚕卵中是否含有人工丝蛋白基因。
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR技术利用的原理是_____________，该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、_____________和
_____________。
（4）生物反应器培养家蚕细胞时会产生接触抑制，所以培养时通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以通过_____________来增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

【推荐3】人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，人工制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。回答下列问题：
（1）制备单克隆抗体过程中要用到______________技术。制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于_____________，使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
（2）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基蝶呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理，向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基蝶呤_____________（填“能”或“不能”）能筛选杂交瘤细胞，原因是____________。
（3）有人设想利用基因工程的方法生产抗HCG单克隆抗体，则需要从B细胞中提取出抗HCG抗体基因转录形成的mRNA，利用____________法合成cDNA，并得到双链DNA（目的基因）。利用上述方法人工合成的抗HCG抗体基因，在结构上与人体内的该基因的主要区别是____________。基因表达载体的构建是基因工程的核心，作为运载体应具备的特点有________________________（回答出两项即可）。

【推荐1】非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因克隆猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题：

(1)图中步骤①采用的技术手段是______________，结构乙处于胚胎发育过程的______________期，进行步骤③时，受体C猪子宫对外来胚胎基本上______________，从而为胚胎在受体内的存活提供了可能。
(2)B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外，还必须定期______________，以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。培养到定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为______________。
(3)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建______________，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是______________。
(4)利用抗原—抗体杂交技术判断D猪是否产生ASFV抗体，使用的抗原物质最好是______________。该抗体也可以使用杂交瘤技术来制备，通常情况下，杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和______________细胞融合获得的。

【推荐2】某基因研究院培育出了转基因克隆绵羊，该绵羊能合成深海鱼体内富含的不饱和脂肪酸 omega—3。
（1）目前，基因工程中使用的限制酶主要是从________生物中分离纯化获得的。构建“基因组文库”和“cDNA 文库”的过程中需要使用 DNA 连接酶的是____________(填基因组文库、cDNA 文库或基因组文库和 cDNA 文库）。                           
（2）在培育转基因克隆绵羊过程中，运用________方法除去卵母细胞的细胞核，通过化学试剂________使该细胞与供体细胞融合，进而构建重组胚胎。
（3）培育过程中，科研人员将 omega—3 合成酶的基因片段转移到了该羊基因组中使其发生进行转化，转化指的是_______________________。利用 PCR 技术进行扩增目的基因的前提是_______________________ 。
（4）建造海底人工鱼礁，其目的是改善海洋环境，是实现海洋渔业可持续发展的举措之一，这体现了生态工程所遵循的       __________ 原理。十九大提出“绿水青山就是金山银山”，要实现这一目标不仅需要对破坏的生态环境进行恢复，还要考虑当地人的经济发展和生活需要，这主要遵循了生态工程的____原理。

【推荐3】为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法。回答下列问题：

（1）试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有_________、_________。
（2）从B牛体内获得的卵子，需要培养到__________（填时期）才能和获能的精子结合完成受精。E牛的性别可能是___________。
（3）产生F牛的理论依据是___________________________，其生殖方式属于_________________________。
（4）方法1中，若要获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对囊胚阶段的胚胎进行分割，分割时应注意__________________________________。
（5）某农场对牛进行同期发情处理，统计结果如下表。

①进行同期发情处理的目的是为供体的胚胎移入受体提供了__________________。
②与方法1相比，方法2的优点是_____________________。