【推荐1】应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

(1)在培育转人生长激素基因牛过程中，进行基因表达载体构建时，人生长激素基因的上游必须含有______。①过程需要的工具酶是_______，③过程培养到桑葚胚或囊胚阶段，可以采用_____技术，培育出多头相同的转基因犊牛。
(2)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，Ⅱ最可能是______细胞，Ⅲ代表的细胞具有_______的特点。
(3)在抗虫棉培育过程中，⑤过程采用的技术是______。

【推荐2】用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”，灵敏度很高，在妊娠第8天就可以做出诊断，下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图（HCG：人绒毛膜促性腺激素）。

（1）制备单克隆抗体过程中，给小鼠注射的HCG相当于___________，它能使小鼠产生___________细胞，此过程属于特异性免疫中的体液免疫。
（2）B细胞DNA合成途径有两条，途径①：由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，为DNA分子的合成提供原料（此途径可被氨基蝶呤阻断）；途径②：利用次黄嘌呤和鸟嘌呤磷酸核苷转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）催化次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷生成相应的核苷酸，为DNA分子合成提供原料。骨髓瘤细胞DNA合成只有途径①。HAT培养基是指在普通动物细胞培养液中加入次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷三种物质的液体培养基。
据此推测：若用A表示骨髓瘤细胞，B表示效应B细胞，加促融剂后，试管中的细胞类型有___________（用字母表示，不考虑三个及以上细胞融合类型）。在HAT培养液中，______________________类型细胞DNA 合成途径①被氨基蝶呤阻断，虽然途径②正常，但因缺乏在体外培养液中增殖的能力，一般10天左右会死亡。___________类型细胞本身缺少DNA合成途径②，其途径①被___________阻断，所以不能增殖很快死亡。只有AB杂交瘤细胞能在HAT培养基中存活下来，原因是______________________。

【推荐3】近日，我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题，成功培育出世界首个体细胞克隆猴。这标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代，请回答与培育克隆动物有关的问题。
（1）体细胞克隆猴是通过___________技术得到的，即将供体细胞注入______________________内，透过___________方法使两细胞融合，构建重组胚胎。
（2）通过上述技术获得的胚胎，移植到___________、___________的其他雌性猕猴体内，使之继续发育为体细胞克隆猴。
（3）供体体细胞来自猕猴胎儿，从胎儿体内取出的组织用______________________酶处理一段时间，就会分散成单个体细胞，之后进行的初次培养称为___________，用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是_________________________________。

【推荐1】普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶（简称PG）基因，控制细胞产生PG，该酶能破坏细胞壁，使番茄软化，不耐贮藏。科学家将抗PG基因导入番茄细胞，培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。请运用所学知识回答下列问题：
（1）该实验中的目的基因是__________。若实验操作中所用的目的基因既含有内含子也含有启动子，则该基因取自__________文库。基因工程操作的核心步骤是____________。
（2）将含有目的基因的番茄细胞培养为番茄植株需借助__________技术，由细胞产生愈伤组织的过程称为_______________。
（3）抗PG基因是PG基因的反义基因，推测转基因番茄抗软化、保鲜时间长的原因为：抗PG基因产生的mRNA与PG基因产生的____________互补，形成了____________，阻断了基因表达的__________过程，因此番茄细胞就不能产生_______________。
（4）运载体Ti质粒中含有__________序列，可以将目的基因整合到宿主细胞的染色体上。若将得到的二倍体转基因番茄植株自交，F₁中抗软化与不抗软化的植株数量比为3:1，则可推测目的基因整合到了_______________。
A．一对同源染色体的一条上       B．一对同源染色体的两条上
C．两条非同源染色体上       D．线粒体中的DNA上

【推荐2】下图1是获取用于构建基因表达载体的含人生长激素基因的DNA片段（DNA复制子链延伸方向是5′→3′，转录方向为左→右）示意图，图2是所用质粒示意图，其上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tett表示四环素抗性基因。有关限制酶的识别序列和酶切位点如下表。请据图回答：

限制酶识别序列和酶切位点表

限制酶	HindⅢ	BamHⅠ	PstⅠ	EcoRⅠ	SmaⅠ	BglⅡ
识别序列（5′→3′）	A↓AGCTT	G↓GATCC	C↓TGCAG	G↓AATTC	CCC↓GGG	A↓GATCT

(1)①过程催化形成磷酸二酯键的酶有____________________，合成的人生长激素基因中________（选填“有”或“无”）与终止密码子相应的碱基序列。
(2)引物1由5′→3′的碱基序列为________________________，引物2应含有限制酶________的识别序列；从图1的过程②开始进行PCR扩增，第六次循环结束时，图中用于构建基因表达载体的DNA片段所占比例是________。
(3)在构建表达载体的过程中对图中质粒、DNA片段进行合适的完全酶切后，向两者的混合物中加入DNA连接酶，若只考虑DNA切段两两连接，则混合物中将形成________种环状DNA。

【推荐3】病毒既能引起人类疾病，也能在基因工程和细胞工程中发挥重要作用。腺病毒是一类DNA病毒，通过修改后的腺病毒正应用于多种疾病的预防和治疗。回答下列问题。
(1)为研究某种蛋白在因高血糖引发的血管细胞衰老中的作用，需把该蛋白的基因A借助_______构建到腺病毒基因组中。研究人员将用_______处理后的基因A通过DNA连接酶连入质粒，然后导入到用________处理制备的感受态细菌中。从筛选后的菌落菌体中提取质粒，通过_______的方法可鉴定重组质粒是否插入了基因A。
(2)去除E1基因构建缺陷型腺病毒载体可用来携带病毒的抗原信息，经过改造后的病毒能进入宿主细胞，但不能在宿主细胞内增殖，推测其原因是_______。
(3)接种腺病毒载体疫苗的人若在接种前感染过腺病毒，可能会存在预存免疫而降低疫苗的免疫效果，其原因是_______。