组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 发酵工程 > 微生物的培养与应用 > 分离特定微生物并测定其数量
题型:非选择题-实验题 难度:0.4 引用次数:157 题号:5208391
研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了相关实验。回答下列问题:
(1)获取菌种:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要___________。为了获得目的菌种,应该将采集的土样进行___________处理后,然后接种到培养基上进行培养,培养基中的营养物质一般包括___________、水和无机盐。
(2)分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入S02气体,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通S02的时间,与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有较强的______________________的能力。
(3)活菌计数:为获得大量的目的菌用于生产,在培养过程中技术人员需连续取样进行计数。稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数目,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的___________,因此,统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下,用此计数方法统计的菌落数往往 比活菌的实际数目___________(高/低),这是因为__________________
(4)检测脱硫细菌对抗生素的敏感性:取该单菌落适当 稀释后的液体2滴,接种于固体培养基表面,并用___________使菌液均匀分布。在37℃培养箱中培养24小时后,将大小相同且分别含有三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置,再培养一段时间后,结果如下图(滤纸片周围的白色区域表示没有菌落分布),据此实验结果推测,三种抗生素中对该菌抑制作用最强的是___________

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名校
【推荐1】大肠杆菌是水体中常见的微生物,经改造的大肠杆菌可用来检测制药厂排出的污水中某化合物X(一种遗传毒性杂质,可损伤细胞DNA,具有致癌可能)的含量。回答下列问题:
(1)大肠杆菌在含有伊红—亚甲蓝的牛肉膏蛋白胨培养基中生长,菌落呈深紫色并有金属光泽;据此可用于检测污染水体中大肠杆菌的数量。上述培养基是否属于选择培养基?_____________
说明理由______________________________________
(2)图1中甲、乙、丙、丁是从微生物中分离到的可被化合物X激活的4种毒性响应基因启动子(箭头表示转录方向);图2质粒中SRR基因的表达产物可使大肠杆菌等细菌裂解。将4种启动子分别插入质粒的P区,以构建表达载体,导入大肠杆菌可获得对化合物X敏感的工程菌。
   
①经PCR反应体系扩增启动子片段,然后对扩增产物进行检测。
   
要大量获得增启动子片段,PCR扩增时需要加入两种引物:______(选填“引物I”、“引物II”、“引物III”、“引物IV”),原因是DNA聚合酶只能从核苷酸链的______(选填“5’端”或“3’端”)开始延伸DNA链。除引物外,PCR反应体系中还包含缓冲液、模板DNA、____________等成分。
②为使4种启动子正确插入到质粒上,利用PCR技术扩增启动子时,需分别在4种启动子A端和B端添加限制酶______________的酶切位点。
③为初步检测表达载体是否构建成功,可用上述两种限制酶对质粒和4种表达载体进行切割,然后对酶切产物进行凝胶电泳,检测结果如图3所示。由此可初步判定表达载体的构建_____(填“成功”或“不成功”)
④作为受体细胞的大肠杆菌需要_____________
A.DNA具有限制酶的酶切位点
B.能抗氨苄青霉素     
C.能在含化合物X的培养液中生长
(3)将获得的工程菌甲、乙、丙、丁和对照菌分别培养在细菌培养液中,2小时后在培养液中加入化合物X继续培养,检测细菌的密度,结果如图4所示。
   
①实验中的对照菌是_______________________   
②实验中对细菌密度的统计方法应为_________
A.稀释涂布平板法        
B.利用细菌计数板在显微镜下直接计数       
C.A或B均可
③据图可知,4种工程菌均启动了对化合物X的响应,判断的依据是_________________
2023-06-01更新 | 176次组卷
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名校
【推荐2】苯酚是工业生产排放废水中的一种有毒污染物质,自然界中存在着降解苯酚的微生物。研究人员欲从土壤中筛选获得能降解苯酚的细菌菌株,请回答下列问题:
(1)在培养基中应加入苯酚作为唯一___________,该培养基可使能降解苯酚的细菌生长,而阻止其他微生物生长,这种培养基称做_______________培养基。
(2)为获得单菌落进行继续筛选,可采用平板划线法利用____________(接种工具)把目的菌株接种到培养皿中,操作时采用_________灭菌的方法,接种后应将培养皿______________,并放入培养箱中培养。
(3)培养一段时间后,在培养基表面形成多个单菌落,不同菌株降解苯酚能力有差异,为选出降解能力强的菌株,具体思路是______________________________________
(4)为保证所得菌种的纯净,需要进行菌种的保存,我们可以采取临时保藏的方法。先将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养。当菌落长成后,将试管放入4℃冰箱中保藏,这种保存方法的缺点是_____________________________________
2017-05-17更新 | 197次组卷
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【推荐3】为探究两种药物紫杉醇和顺铂对食道癌细胞增殖和凋亡的影响,研究者进行了如下实验:
(1)首先将食道癌细胞接种于动物细胞培养液中进行培养,培养液中除具有必需营养物质外,还需添加适量抗生素,目的是__
(2)实验步骤:
①向多孔培养板每孔接种__,培养12h。
②实验组:向每孔分别加入100μL含紫杉醇或顺铂的培养液,培养48h;
对照组:__
③重复步骤②两次,以减少实验误差。
(3)实验结果:
培养48h后,统计并计算实验组和对照组的__,进一步计算各组细胞生长抑制率。计算公式:细胞生长抑制率(%)=(1﹣实验组细胞数/对照组细胞数)×100%,结果如下图:

综合上图分析,紫杉醇和顺铂两种药物对食道癌细胞的作用效果包括__
(4)食道癌发生的重要原因是细胞增殖与凋亡失衡,为探究紫杉醇和顺铂对与细胞凋亡相关的基因(抑制凋亡基因Bcl﹣2、促进凋亡基因Bax)表达的影响,研究者在实验数据基础上进行了相关分析:

据图分析,紫杉醇和顺铂两种药物通过__,阻止食道癌进一步发展,且二者具有__作用。
2019-10-03更新 | 298次组卷
共计 平均难度:一般