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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:75 题号:7923364
下表列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:

(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有____个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越____
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是______________________________________
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ2种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入____酶。

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非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐1】多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如下图。据图分析并回答下列问题:

(1)形成的PG反义质粒叫做_______________,它的构建过程是基因工程的核心,需要用到的工具酶有_____________。若已获取PG的mRNA,可通过________ 获取PG基因。
(2)重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是_________________________,要实现此目的,还可以用_________法。
(3)要获取番茄的原生质体,通常要用到_________________酶。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有___________的培养基进行筛选。将其置于质量分数约为0.3g/ml的蔗糖溶液中,观察细胞的___________现象来鉴别细胞壁是否再生。
(4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与______(“①天然的PG基因/②天然的PG基因转录的mRNA”填序号)互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达。若观察到番茄果实的保质期__________,则可确定转基因番茄培育成功。
(5)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株,还需要用_____________技术;其中,愈伤组织经__________形成完整植株。
2016-06-02更新 | 228次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
【推荐2】随着科学技术的发展,人们可以根据需求来改造生物的性状。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,据图回答下列问题。

(1)对①需要剪碎并使用___________使其彼此分散,用于传代培养的细胞应不超过10代以保证细胞的__________________不发生变化。 
(2)在胚胎的早期培养过程中把⑤送入⑥的最佳时期是_______________。 
(3)在此过程中涉及的细胞工程技术手段有____________(答两种)。 
(4)过程②中,重组质粒中调控目的基因表达的组件是________ ,   ________的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞。 
(5)要实现⑦批量生产血清白蛋白,要求③的性染色体组成是____。⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物,这类转基因动物被称为_____________
2017-10-04更新 | 354次组卷
非选择题-解答题 | 适中 (0.65)
真题 名校
【推荐3】GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:

(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是_____
(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的_____限制酶进行酶切.
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示.图中第_____泳道显示所鉴定的载体是正向连接的.
(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的_____与提取的蛋白质杂交.当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行_____培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验.
2016-11-26更新 | 1451次组卷
共计 平均难度:一般