下表列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有____ 个游离的磷酸基团。
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越____ 。
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是______________________________________
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ2种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________ 。
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入____ 酶。
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有
(2)若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越
(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是
(4)与只使用EcoRⅠ相比较,使用BamHⅠ和HindⅢ2种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止
(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入
更新时间:2019-04-22 07:10:10
|
相似题推荐
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。成熟的番茄果实中,PG合成显著增加,能使果实变红变软,但不利于保鲜。利用基因工程减少PG基因的表达,可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上,导入番茄细胞中,得到转基因番茄,具体操作流程如下图。据图分析并回答下列问题:
(1)形成的PG反义质粒叫做_______________ ,它的构建过程是基因工程的核心,需要用到的工具酶有_____________ 。若已获取PG的mRNA,可通过________ 获取PG基因。
(2)重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是_________________________ ,要实现此目的,还可以用_________ 法。
(3)要获取番茄的原生质体,通常要用到_________________ 酶。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后,可用含有___________ 的培养基进行筛选。将其置于质量分数约为0.3g/ml的蔗糖溶液中,观察细胞的___________ 现象来鉴别细胞壁是否再生。
(4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与______ (“①天然的PG基因/②天然的PG基因转录的mRNA”填序号)互补结合,因此可抑制PG基因的正常表达。若观察到番茄果实的保质期__________ ,则可确定转基因番茄培育成功。
(5)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株,还需要用_____________ 技术;其中,愈伤组织经__________ 形成完整植株。
(1)形成的PG反义质粒叫做
(2)重组质粒转移到大肠杆菌中的目的是
(3)要获取番茄的原生质体,通常要用到
(4)由于导入的目的基因能转录出反义RNA,且能与
(5)将转入反向链接PG基因的番茄细胞培育成完整的植株,还需要用
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐2】随着科学技术的发展,人们可以根据需求来改造生物的性状。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,据图回答下列问题。
(1)对①需要剪碎并使用___________ 使其彼此分散,用于传代培养的细胞应不超过10代以保证细胞的__________________ 不发生变化。
(2)在胚胎的早期培养过程中把⑤送入⑥的最佳时期是_______________ 。
(3)在此过程中涉及的细胞工程技术手段有____________ (答两种)。
(4)过程②中,重组质粒中调控目的基因表达的组件是________ , ________ 的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞。
(5)要实现⑦批量生产血清白蛋白,要求③的性染色体组成是____ 。⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物,这类转基因动物被称为_____________ 。
(1)对①需要剪碎并使用
(2)在胚胎的早期培养过程中把⑤送入⑥的最佳时期是
(3)在此过程中涉及的细胞工程技术手段有
(4)过程②中,重组质粒中调控目的基因表达的组件是
(5)要实现⑦批量生产血清白蛋白,要求③的性染色体组成是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
真题
名校
【推荐3】GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:
(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是_____ .
(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的_____ 限制酶进行酶切.
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示.图中第_____ 泳道显示所鉴定的载体是正向连接的.
(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的_____ 与提取的蛋白质杂交.当培养的神经干细胞达到一定的密度时,需进行_____ 培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验.
(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是
(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的
(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示.图中第
(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐1】根据下图回答问题。请回答:
(1)天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体,经改造后的质粒同时具备的条件有_____ (填序号)。
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④能自我复制 ⑤起始密码子
(2)若对天然质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性将会__________ 。
(3)在下图上写出目的基因左右两侧分别被SmaⅠ和EcoRⅠ切割后的末端(答案写在答题纸的图上)哪—种基因工程的基本工具可以连接平末端______________ 。
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SamⅠ | MspⅠ |
识别序列及 切割位点 | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ | ↓ AAGCTT TTCGAA ↑ | ↓ GAATTC CTTAAG ↑ | ↓ CCCGGG GGGCCC ↑ | ↓ CCGG GGCC ↑ |
(1)天然质粒往往需经过改造才能作为基因工程中的运载体,经改造后的质粒同时具备的条件有
①标记基因 ②多个限制酶切割位点 ③对受体细胞无害 ④能自我复制 ⑤起始密码子
(2)若对天然质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性将会
(3)在下图上写出目的基因左右两侧分别被SmaⅠ和EcoRⅠ切割后的末端(答案写在答题纸的图上)哪—种基因工程的基本工具可以连接平末端
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
解题方法
【推荐2】 图为“乙肝基因工程疫苗”生产过程图解,质粒上箭头所指部位为相应的限制酶的切割位点。质粒中lacZ 基因编码产生的酶可以分解培养基中的X-gal,产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。请回答下列问题:
(1)限制酶切割后,需要用DNA连接酶连接形成重组DNA分子,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是________________ ;若用病毒作为载体将目的基因送入上图受体细胞,应选择___________________ (填“动物病毒”“植物病毒”或“噬菌体”)。
(2)为了防止目的基因和质粒的自身环化,选用限制酶的最佳方案是_______________________ 。
(3)为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌,可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入____________ ,培养一段时间后挑选出_____________ (填“蓝色”或“白色”)的菌落进 步培养,从而获得大量目的菌。
(4)目的基因导入受体细胞后,常用___________________ 技术检测目的基因是否翻译出乙肝病毒外壳。
(1)限制酶切割后,需要用DNA连接酶连接形成重组DNA分子,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
(2)为了防止目的基因和质粒的自身环化,选用限制酶的最佳方案是
(3)为了筛选含目的基因表达载体的大肠杆菌,可在培养大肠杆菌的通用培养基中额外加入
(4)目的基因导入受体细胞后,常用
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐3】用DNA重组技术可以赋于生物以新的遗传特性,创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶,其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。回答下列问题:
(1)常用的DNA连接酶有E.coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中______ 酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接。上图中______ 酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。
(2)DMA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是__________________ 。
(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能____________ ;质粒DNA分子上有____________ ,便于外源DNA插入;质粒DNA分子上有标记基因(如某种抗生素抗性基因),标记基因的作用是__________________ 。
(4)表达载体含有启动子,启动子的作用是________________________ 。
(5)将目的基因导入植物细胞最常用的方法是________________________ 。
(1)常用的DNA连接酶有E.coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。上图中
(2)DMA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是
(3)DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征,如质粒DNA分子上有复制原点,可以保证质粒在受体细胞中能
(4)表达载体含有启动子,启动子的作用是
(5)将目的基因导入植物细胞最常用的方法是
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐1】U-mir是家蚕体内的一种小分子非编码RNA,可与某些RNA尾端的一段非编码序列(3'-UTR)结合,进而影响基因的表达。为探究U-mir是否影响家蚕基因B(调控家蚕眼睛发育)的表达,科研人员将基因B中对应3'-UTR的DNA片段与荧光素酶基因(U-mir不影响荧光素酶基因的表达)重组后导入家蚕胚胎细胞观察其表达结果。请回答下列问题:
(1)利用PCR技术扩增基因B对应3'-UTR的DNA片段,应先依据该基因的一段核苷酸序列合成__________ 。
(2)利用__________ (填酶的种类)可将上述DNA片段插入荧光素酶基因表达载体(如图1)上的位点__________ ,构建重组载体。
(3)将重组载体与U-mir共同导入家蚕胚胎细胞,同时应设置两个对照组,即将__________ 、__________ 分别导入两组家蚕胚胎细胞。
(4)科研人员分别从实验组和对照组细胞中提取蛋白质,经处理检测后获得相对荧光值(在适宜条件下,荧光素酶可催化荧光素发生氧化反应并发出荧光),其结果如图2。
依据实验结果可推断:________________________________________ 。
分析可能原因:_______________________________________________ 。
(1)利用PCR技术扩增基因B对应3'-UTR的DNA片段,应先依据该基因的一段核苷酸序列合成
(2)利用
(3)将重组载体与U-mir共同导入家蚕胚胎细胞,同时应设置两个对照组,即将
(4)科研人员分别从实验组和对照组细胞中提取蛋白质,经处理检测后获得相对荧光值(在适宜条件下,荧光素酶可催化荧光素发生氧化反应并发出荧光),其结果如图2。
依据实验结果可推断:
分析可能原因:
您最近一年使用:0次
非选择题-实验题
|
适中
(0.65)
【推荐2】研究者运用基因工程手段将SLA-2基因进行改造并在猪肾上皮细胞(sT2细胞)中表达。实验的主要流程如图1,图1中SLA-2基因长度为1100bp,质粒B的总长度为4445bp,其限制酶切点后的数字表示距复制原点的距离。图1中的限制酶的识别序列及切割位点如图2所示。请回答:(1)对SLA-2基因进行PCR时下列4种引物中应选择的是___。
(2)控制表达载体大量扩增的组成元件是___ 。
(3)若用Sau3AI和XbaI完全酶切质粒C后,获得的DNA片段长度为___ (不考虑PCR时所用的引物长度对结果的影响)。
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选,一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是:既可以让没有抗性的细胞死亡又不会让具有抗性的细胞死亡。用没有抗性的细胞实验,实验结果如下图3,根据实验结果最佳的嘌呤霉素筛选浓度为___ 。(5)过程⑦研究人员用___ (填物质)检测肾上皮细胞生产的抗原肽。
A.5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGCCCCTCAAGCCATCCTC |
B.5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGA |
C.5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCT |
D.5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGGTCCTTGGTAAGGG |
(2)控制表达载体大量扩增的组成元件是
(3)若用Sau3AI和XbaI完全酶切质粒C后,获得的DNA片段长度为
(4)科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选,一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是:既可以让没有抗性的细胞死亡又不会让具有抗性的细胞死亡。用没有抗性的细胞实验,实验结果如下图3,根据实验结果最佳的嘌呤霉素筛选浓度为
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
【推荐3】dMAb技术是一种通过DNA编码产生单克隆抗体的技术,比传统的单克隆抗体制备方法有更多的发展潜力。图是dMAb技术在埃博拉病毒感染疾病的临床研究中的操作流程。
1.要保证所制备的抗体能精准识别埃博拉病毒抗原,在人工合成目的基因时,所需获取的信息是 。
2.图中重组质粒的构建所需的工具酶有____________ 、_____________ 。
3.dMAb也涉及转基因技术的应用,下列过程描述与图中序号相符的是 。
4.传统的利用杂交瘤细胞生产单克隆抗体的过程需要运用生物工程中的技术有 。
5.单克隆抗体的制备所基于的免疫学基本原理是 。
6.与传统利用杂交瘤细胞产生单克隆抗体的技术相比,dMAb技术在抗体的制备上有何优势?_______________ 。(请列举两点)
1.要保证所制备的抗体能精准识别埃博拉病毒抗原,在人工合成目的基因时,所需获取的信息是 。
A.抗体的核苷酸序列 | B.埃博拉病毒的核苷酸序列 |
C.抗体的氨基酸序列 | D.埃博拉病毒衣壳的氨基酸序列 |
3.dMAb也涉及转基因技术的应用,下列过程描述与图中序号相符的是 。
A.①—获取目的基因 | B.②—目的基因与运载体重组 |
C.③—重组DNA分子导入受体细胞 | D.④—筛选含有目的基因的受体细胞 |
A.细胞核移植技术 | B.组织培养 |
C.细胞融合 | D.动物细胞培养 |
A.骨髓瘤细胞生长分裂旺盛 |
B.每个杂交瘤细胞只具备产一种抗体的能力 |
C.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后只剩下产一种抗体的能力 |
D.单一抗原分子能刺激B淋巴细胞形成产单一抗体的能力 |
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐1】我国传统白酒酿造过程中糖化与发酵往往同时进行,随着发酵的进行发酵产物会使酒糟酸度不断降低,普通a-淀粉酶的活性也随之降低,导致淀粉水解不彻底。获得耐酸性α -淀粉酶成为生产的迫切需求,某科研团队欲对α -淀粉酶进行改造或获得高产耐酸性α -淀粉酶的酵母菌。回答下列问题:
(1)某研究人员从芽孢杆菌中获得耐酸性α -淀粉酶基因通过基因工程技术获得产耐酸性α -淀粉酶的酵母菌,其流程如图所示:
①为让目的基因插入质粒,质粒DNA分子上应有______ 。基因工程的核心步骤是______ (填图中字母)。
②过程c中欲检测耐酸性α -淀粉酶基因是否插入酵母菌的DNA上,可采用______ 等技术。
(2)研究人员通过蛋白质工程也获得了耐酸性α -淀粉酶:
①基本操作流程是从耐酸性α -淀粉酶功能出发→______ (从下列操作或思路中选择正确的序号并排序)。
A.人工合成α -淀粉酶基因;
B.人工合成耐酸性α -淀粉酶基因;
C.推测耐酸性α -淀粉酶的氨基酸序列;
D.设计耐酸性α -淀粉酶的三维结构;
E.将获得的基因导入受体细胞生产耐酸性α -淀粉酶;
F.将获得的基因导入受体细胞生产α -淀粉酶;
②不同团队对α -淀粉酶进行了不同改造,实验后获得其中两种耐酸性α -淀粉酶,分别标号1、2;在一定条件下测定酶活性,结果如图所示。研究人员认为______ 适宜工厂化生产,理由是______ 。
(3)根据以上信息,总结基因工程与蛋白质工程的区别与联系:______ 。
(1)某研究人员从芽孢杆菌中获得耐酸性α -淀粉酶基因通过基因工程技术获得产耐酸性α -淀粉酶的酵母菌,其流程如图所示:
①为让目的基因插入质粒,质粒DNA分子上应有
②过程c中欲检测耐酸性α -淀粉酶基因是否插入酵母菌的DNA上,可采用
(2)研究人员通过蛋白质工程也获得了耐酸性α -淀粉酶:
①基本操作流程是从耐酸性α -淀粉酶功能出发→
A.人工合成α -淀粉酶基因;
B.人工合成耐酸性α -淀粉酶基因;
C.推测耐酸性α -淀粉酶的氨基酸序列;
D.设计耐酸性α -淀粉酶的三维结构;
E.将获得的基因导入受体细胞生产耐酸性α -淀粉酶;
F.将获得的基因导入受体细胞生产α -淀粉酶;
②不同团队对α -淀粉酶进行了不同改造,实验后获得其中两种耐酸性α -淀粉酶,分别标号1、2;在一定条件下测定酶活性,结果如图所示。研究人员认为
(3)根据以上信息,总结基因工程与蛋白质工程的区别与联系:
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐2】水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉,直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的DNA序列转入水稻,实现了对直链淀粉合成酶基因(Wx基因)启动子序列的定点编辑,从而获得了3个突变品系。
(1)将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,所需的酶是______ , 重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为_____________ 。
(2)根据启动子的作用推测,Wx基因启动子序列的改变影响了______ ,从而改变了Wx基因的转录水平。与野生型水稻相比,3个突变品系中Wx基因控制合成的直链淀粉合成酶的氨基酸序列___ (填:发生或不发生)改变。
(3)为检测启动子变化对Wx基因表达的影响,科研人员需要检测Wx基因转录产生的mRNA (Wx mRNA)的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA,经_____ 过程获得总 cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出 Wx基因的cDNA,原因是_____________ 。
(4)各品系Wx mRNA量的检测结果如图所示,据图推测糯性最强的品系为_____ ,原因是_____________ 。
(1)将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,所需的酶是
(2)根据启动子的作用推测,Wx基因启动子序列的改变影响了
(3)为检测启动子变化对Wx基因表达的影响,科研人员需要检测Wx基因转录产生的mRNA (Wx mRNA)的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA,经
(4)各品系Wx mRNA量的检测结果如图所示,据图推测糯性最强的品系为
您最近一年使用:0次
非选择题-解答题
|
适中
(0.65)
名校
【推荐3】β-1,3葡聚糖酶可以水解许多病原真药细胞壁外层的β-1,3葡聚糖和几丁质,降解真菌细胞壁,从而抑制真菌的生长与繁殖。研究人员在植物中克隆到β-1,3葡聚糖酪基因(BG2)并转入苹果主栽品种,以减少苹果真菌病害、实现无公害生产。(1)BG2的克隆可利用PCR技术,这需要一小段能与该基因碱基序列互补配对的_______________ 作为引物,在体外对目的基因进行扩增,常采用_______________ 方法来鉴定扩增产物。
(2)下图为利用PATC940(经农杆菌Ti质粒改造获得)构建BG2抗病质粒的过程。图中右下处的酶为_______________ ,人工设计的复合启动子的作用是_______________ (答出1点)。XbaⅠ酶切后的末端与SpeⅠ酶切后的末端能连接是因为_______________ 。
(3)研究人员将转入BG2抗病质粒的农杆菌与苹果外植体共培养,以进行遗传转化。目的基因BG2将随着T-DNA转移到被侵染的细胞,并随其整合到该细胞的_______________ 上。
(4)在完成遗传转化后,选择培养基中至少要加入两种抗生素,请推测其作用分别是:一种用于_______________ ,另一种用于_______________ 。
(5)需要不断观察和检测转基因苹果植株在田间的生长状态,以确定目的基因是否赋予了苹果植株_______________ 。
(2)下图为利用PATC940(经农杆菌Ti质粒改造获得)构建BG2抗病质粒的过程。图中右下处的酶为
(3)研究人员将转入BG2抗病质粒的农杆菌与苹果外植体共培养,以进行遗传转化。目的基因BG2将随着T-DNA转移到被侵染的细胞,并随其整合到该细胞的
(4)在完成遗传转化后,选择培养基中至少要加入两种抗生素,请推测其作用分别是:一种用于
(5)需要不断观察和检测转基因苹果植株在田间的生长状态,以确定目的基因是否赋予了苹果植株
您最近一年使用:0次