【推荐1】类胡萝卜素具有抗癌、降血脂等多种生物学功能。P蛋白是催化类胡萝卜素形成的关键酶，研究者从裙带菜中克隆了P基因，按下图所示流程进行基因工程操作。

(1)研究者从裙带菜中提取了总RNA，利用逆转录方法获得_________（作为模板），设计特异性_________，利用PCR技术扩增得到P基因。将P基因与质粒载体重组时，需要使用的酶包括_________________________。流程图中①_______菌，②________________技术。
(2)随机选取9株转基因苗，利用PCR、电泳检测的结果如图2，分析结果说明没有成功转入P基因的植株是_________。检测P基因的mRNA相对含量，结果如图3，研究者选择转基因烟草植株2进行后续研究，请说明理由________________________________________。

【推荐2】人的血清白蛋白在临床上需求量很大。科学家培养出一种转基因山羊，其膀胱上皮细胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到尿液中。据此回答下列问题：
(1)若要体外获得大量的人血清白蛋白基因，可采用PCR技术。该技术的前提是要根据一段已知目的基因的_____________________设计引物，而后经过变性、复性和延伸三个步骤的循环对目的基因进行扩增。若该目的基因循环扩增4次，理论上需要消耗_________个引物。
(2)如果用山羊某个时期的____________反转录产生的多种双链cDNA片段与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群就叫做山羊的___________________。
(3)将重组质粒导入山羊的受体细胞时，常选用受精卵作为受体细胞的主要原因是________________。
(4)人的血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮细胞中表达的原因是__________。在转基因山羊体内人的血清白蛋白基因只在膀胱上皮细胞中表达的优点之一是__________________________________。

【推荐3】SARS冠状病毒（SARS-CoV）的N蛋白是一种重要的结构蛋白，位于病毒颗粒的核心部分，并与病毒RNA结合。在病毒的包装等过程中起重要作用。因此制备抗SARS-CoVN蛋白的单克隆抗体（mAb），对于诊断和治疗疾病具有重要意义。用SARS-CoV制备单克隆抗体的流程如下图：

（1）为了获得大量的SARS冠状病毒N蛋白目的基因，可以采用PCR技术在体外扩增，该技术还需要dNTP、_______酶以及引物等，扩增三轮需要的引物数量为___________个。
（2）若双链DNA几乎具有等量的净电荷，且在高于等电点的pH溶液中带负电荷。利用琼脂糖凝胶电泳进行分离和纯化DNA分子主要依据_______不同，采用外加电场使其分开。在电泳槽中还需要加入______作为参照物进行鉴定。
（3）小鼠被抗原蛋白兔疫后，可以从___________中获取细胞Ⅰ。细胞Ⅰ中可能包含多种能产生抗体的细胞，原因是______________________。
（4）为了分离出只能产生mAb的细胞Ⅱ，需要用___________技术对杂交瘤细胞进行筛选。目前可将图中的___________作为疫苗，预防SARS冠状病毒引发的疾病。

【推荐1】下图是利用现代生物技术改良草莓品系的过程，据图回答下列问题：

(1)将野生绿色草莓的叶片离体组织培养成四倍体试管苗的过程，体现了植物细胞的_____性，此过程中秋水仙素的作用机理是_______________。
(2)欲获得抗虫草莓可从蛋白酶抑制剂基因、生长素诱导基因中选择____________作为目的基因，要鉴定草莓的抗虫性，从个体水平上可采用_________实验。
(3)Ⅱ过程常规方法是采用杂交育种，从生殖方式上分析，Ⅱ过程属于_________生殖；从细胞分裂方式上分析，Ⅱ过程中进行了____分裂；Ⅱ过程还可先用花药离体培养分别获得抗虫草莓和凤梨草莓的________，再用_________技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性的六倍体草莓，该技术常用的酶有________。

【推荐2】毕氏酵母重组菌是将木聚糖酶基因（XynA）连接到含有自主复制序列（PARS）的游离表达载体上，然后转化至毕氏酵母中，筛选得到毕氏酵母重组菌（如图）。质粒中的Ori代表复制原点，Amp^R代表氨苄青霉素基因。回答下列问题：

   

(1)XynA的基本组成单位是______；过程②为PCR，对XynA进行PCR扩增时并不需要知道XynA全部的核苷酸序列，但是必须知道XynA______（填“一端”或“两端”）的核苷酸序列，以便______。若XynA中C—G碱基对所占比例较高，则PCR时的变性温度也高，原因是______。
(2)PCR产物中出现了部分非目标序列，可能的原因有______（答一点）。
(3)根据重组质粒分析，切割原质粒和XynA的限制酶最可能是______，若XynA两端具有Pst I的识别位点，但并不建议用限制酶PstⅠ构建重组质粒，理由是______（答两点）。

【推荐3】β-1，3葡聚糖酶可以水解许多病原真菌细胞壁外层的β-1，3葡聚糖和几丁质，降解真菌细胞壁，从而抑制真菌的生长与繁殖。研究人员在植物中克隆到β-1，3葡聚糖酶基因（BG2）并转入苹果主栽品种，以减少苹果真菌病害、实现无公害生产。
   
(1)BG2的克隆可利用______技术，这需要一小段能与该基因碱基序列互补配对的短单链核酸作为引物，在体外对目的基因进行大量复制，常采用______来鉴定产物。
(2)下图为利用PATC940（经农杆菌Ti质粒改造获得）构建BG2抗病质粒的过程。图中右下处的酶为______，人工设计的复合启动子的作用是__________________，XbaI酶切后的末端与SpeI酶切后的末端能连接是因为________________________。
(3)研究人员将转入BG2抗病质粒的农杆菌与苹果外植体共培养，以进行遗传转化。目的基因BG2将随着______转移到被侵染的细胞而进入细胞，并随其整合到该细胞的______上。
(4)在完成遗传转化后，选择培养基中至少要加入两种抗生素，请推测其作用分别是：一种用于____________，另一种用于____________。
(5)需要不断观察和检测转基因苹果植株在田间的生长状态，以确定目的基因是否赋予了苹果植株_____________。

【推荐1】为研究玉米Y基因在逆境胁迫应答中的重要作用，科研人员做了如下图研究。分析并回答下列问题：
   
(1)将获得的Y基因与绿色荧光蛋白基因（GPF基因）连接构建融合基因，在____酶的作用下插入质粒（见图1）的_____切点构建重组质粒，通过_____法将该重组质粒导入玉米细胞中，获得Y基因表达的转基因玉米植株。
(2)用显微镜观察转基因玉米叶片细胞，发现发出绿色荧光的区域与玉米的细胞核位置重叠，说明____。为研究Y基因的作用，科研人员测定了Y基因的表达特点（如图2和图3），推测后续实验中应选用的实验材料及其处理是_____。
(3)为验证Y基因能提高植物的抗盐能力，科研人员设计如下实验，6天后测定结果如下表。

玉米类型	处理	叶片情况
野生型	清水	叶绿素含量高，叶片嫩绿
野生型	0.15M NaCl溶液处理	叶绿素含量低，叶片枯黄
转Y基因玉米	0.15M NaCl溶液处理	叶绿素含量高，叶片嫩绿

为增加实验的可信度，应补充一组对照实验，该对照实验的处理及结果是_____。

【推荐2】图1表示新型冠状病毒的结构示意图，其中蛋白S(刺突糖蛋白)通过与人体黏膜细胞表面的ACE2受体结合而进入细胞，蛋白M能刺激机体产生免疫反应；图2表示科研人员研制新冠疫苗的一条技术路线。请据图回答下列问题。

(1)蛋白S和ACE2受体的化学本质__(填“相同”或“不同”)，蛋白M在免疫过程中属于_。
(2)图2中，过程①需要的一种特殊酶是____。过程②是基因工程的核心，形成的重组DNA中含有的组件包括____(答出2点即可)。
(3)过程③需要用_______处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种_______的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入其中。
(4)疫苗Ⅱ导入实验动物体内，____(填“一定”或“不一定”)能引起免疫反应，理由是___。

【推荐3】新疆长绒棉品质优良，供不应求，而普通棉花中β一甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）表达出的3—甘露糖苷酶能催化半纤维素降解，使棉纤维长度变短。为了培育长绒棉，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，获得了转基因长绒棉新品种，具体过程如图所示（Sma I、Not I、Hind Ⅲ和BamH I为不同限制酶，LB为T一DNA左边界，RB为T一DNA右边界）。回答下列问题。

   

(1)过程①中不用限制酶Not I的原因是___________。GhMnaA2的序列中包含内含子等序列，可增大重组质粒的分子量，使导入效率降低，请提出一个解决此问题的方案：___________。
(2)基因表达载体除图示组成外，至少还有___________。转基因长绒棉植株无图中的抗生素抗性，原因是___________。
(3)过程③中目的基因导入棉花细胞后，可采用___________等技术从分子水平上检测目的基因是否插入到棉花的染色体DNA上；个体水平上的鉴定方法是___________
(4)由图分析可知，转基因长绒棉棉纤维较普通棉棉纤维长的原因是___________。

【推荐1】cry1AcM 基因是一种改良后的抗虫基因，可在单子叶植物中高效表达；epsps基因和 GAT 基因能使进入植物体的草甘膦乙酰化而解除毒性，2个基因同时发挥作用，能有效提高玉米植株抗御草甘膦的能力；ZmPIS 基因高表达能显著提高玉米植株的抗旱性。科学家将 cry1AcM、epsps、GAT 和 ZmPIS 4个基因一同转入玉米自交系9801和Q319中，获得转基因植株。通过田间试验，选育出稳定遗传的抗玉米螟、抗草甘膦和抗旱的优良玉米新品种。请回答以下问题：

（1）构建4个基因的融合基因需用_____酶和_____酶，将该融合基因导入到玉米9801和Q319最常用的方法为_____，④~⑤过程中需加入_____（植物激素）以诱导细胞分化成长为转基因植株。
（2）对每代转基因植株进行筛选与鉴定，选择_____做为对照。
①抗虫鉴定：在室内测试时采用喂食苞叶的方法检测植株对玉米螟的抗性。喂食10天时，玉米螟进行称重，对照组体重为41g，转基因组体重为10~20g；在喂食12天后，转基因组死亡率达到80%，非转基因组死亡率约20%，由此说明cry1AcM 基因对玉米螟的生长具有_____作用。
②耐旱抗性实验：在正常条件下，转基因植株的形态和生长速率与对照组无显著差异，但连续干旱后，对照组开始出现萎蔫、叶片卷曲、叶片干枯发黄等现象，而转基因植株则受干旱胁迫较轻，说明含有_____基因的玉米植株具有较好的干旱耐受性。
（3）在转基因株系的抗性检测中发现，不同玉米品系的3株转基因植株在抗虫、抗除草剂、抗旱能力上出现明显差异，据各基因 mRNA 电泳图分析造成这种差异的主要原因是_____。

【推荐2】叶盘转化法是Horsch 等人于1985年发展起来的一种转化法，以培育转基因 耐盐毛白杨为例，操作程序是先将毛白杨叶子表面进行消毒，再用消毒过的打孔器从 叶子上取下圆形小片，即叶盘。然后进行下列操作，请回答：
(1)毛白杨叶盘与重组农杆菌共培养以进行遗传转化：农杆菌能够介导转化的原因是_________。
(2)脱分化和筛选培养：叶盘接种在含卡那霉素的培养基上，卡那霉素的作用是 _______， 作为运载体的Ti 质粒应含有 _____________基因，运载体上的__________是 RNA   聚 合酶识别和结合的位点。
(3)获得抗性植株：叶盘周围长出愈伤组织后分别转移到诱导“生芽”和“生根”的培养 基中，此过程培养基中加入的植物激素主要是________。
(4)耐盐基因的检测与鉴定：
①分子水平：可采用______ 的方法来检测转基因毛白杨提取液中有无相应的耐盐蛋白。
②个体水平：请设计个体水平检测方案 ______________________________ 。

【推荐3】苏云金芽孢杆菌的CryIAC基因编码一种蛋白质，该蛋白可杀死鳞翅目昆虫。研究者将CryIAC基因转入玉米中，并对玉米抗性进行鉴定和遗传分析。
(1)下图为苏云金芽孢杆菌内CryIAC基因所在DNA复制及控制多肽合成的过程，在玉米细胞内，核基因控制的该过程发生在同一场所的是_____（填序号）。过程①需要_____催化，完成③时，一般在一条mRNA上会结合多个核糖体，其意义是_____。

(2)将从苏云金芽孢杆菌细胞内获取的CryIAC基因与质粒结合构建_____，然后用_____法导入普通玉米中，获得T₀代植株。
(3)对不同株系植株进行PCR检测，结果如下图。1号为_____检测结果。将_____接种（施放）于不同株系植株，以_____占叶片总面积的百分率作为抗虫能力参数，筛选抗虫的阳性植株。

(4)T₀代4号植株表现为非抗虫，但PCR检测结果为_____，可能的原因是_____（选填选项前的符号）。
a、CryIAC基因突变                           b、CryIAC基因所在染色体片段缺失
c、CryIAC基因表达效率太低              d、CryIAC基因未导入
(5)将T₀代2号植株与普通玉米杂交获得T₁代，对T₁代进行抗虫鉴定，结果发现抗虫玉米与非抗虫玉米的比值约为3：1．推测导入的CryIAC基因位于_____上，其遗传遵循_____定律。T₀代2号玉米自交，子代的性状分离比为_____。