1 . 疫苗接种是当前新冠肺炎疫情防控工作的一项重要举措，我国科学家研发了多种新冠疫苗，其中重组腺病毒疫苗研发策略是：将新冠病毒的S蛋白基因整合到腺病毒DNA中，形成表达S蛋白的重组腺病毒，注射到健康人体内，腺病毒可侵染人体细胞，达到预防新冠病毒感染的效果。
(1)获得S蛋白用作蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S，基因工程的基本操作流程是：_____。与直接将S蛋白注射到体内作为疫苗相比，重组腺病毒疫苗的优点是可以引起人体产生_____免疫，更有效清除病毒。
(2)为了构建重组腺病毒DNA，需要将S蛋白基因插入腺病毒DNA中，由于腺病毒DNA分子较大，传统的限制性核酸内切酶和DNA连接酶处理效率较低，所以采取如图1所示方法获得重组腺病毒DNA。

将质粒1和质粒2共同导入受体细胞中，据图推测，最终重组线性DNA分子上，X所示的原件应该为_____，其功能是_____。以病毒做为基因工程的载体，其优点之一是可以利用病毒_____的特点，将目的基因导入受体细胞。
(3)生产疫苗的过程是将上述重组线性DNA分子（不编码病毒复制必需的E1蛋白）导入到293细胞系（该细胞系可表达人体细胞没有的E1蛋白），最终包装成完整的腺病毒。这种方式生产的疫苗由于重组腺病毒_____，从而提高了疫苗的安全性。
(4)为了检测疫苗的效果，科学家用不同方式给雪貂接种重组腺病毒疫苗后，感染新冠病毒，一段时间后检测新冠病毒含量，结果如图2，说明重组腺病毒疫苗_____。

3 . 2021年12月8日，中国国家药监局应急批准腾盛华创医药技术（北京）有限公司新冠病毒中和抗体联合治疗药物安巴韦单抗注射液（BRII-196）及罗米司韦单抗注射液（BRII-198）注册申请，是中国全自主研发的单抗，联合用于治疗新型冠状病毒感染患者，效果显著。结合所学生物知识，回答下列问题：
(1)制备新冠单克隆抗体时，可以将新冠抗原注入不同人体内，下表表示免疫次数和抗体效价（每分子抗体能结合抗原的数量）之间的关系，若血清抗体效价需达到1:4000以上，则人体要至少要经过_______次免疫才能符合要求，第一次免疫和第二次免疫时，人体内能产生新冠抗体的细胞分别是由_______________________增殖分化形成的。

	A	B	C	D	E
第一次	1：1000	1：1000	1：1000	1：1000	1：1000
第二次	1：2000	1：2500	1：3600	1：2200	1：3000
第三次	1：4000	1：4600	1：8000	1：5000	1：4500

(2)制备新冠单克隆抗体过程中，涉及的技术原理是____________________________，专一抗体检测阳性和克隆化培养的目的是_______________________________，培养动物细胞的四个基本条件有适宜的温度和pH、营养、____________________________________。
(3)新冠单克隆抗体能准确的结合新冠病毒，这主要是因为单克隆抗体具有______________（答两点）的优点。
(4)骨髓瘤细胞和浆细胞融合一般可用灭活（灭活是指________________________________）的病毒或PEG作为诱导剂，融合效果受pH的影响，某实验小组为了探究PEG诱导细胞融合的最适pH，在pH为1〜8之内设置了系列等梯度的pH，发现随着pH的上升，细胞融合的效果越来越好，请你做补充实验，以达到该实验小组的实验目的。____________________________________。

4 . 新型冠状病毒（SARS-CoV-2）是+RNA病毒，引起的新冠肺炎严重威胁人类的健康。下图为新型冠状病毒侵入宿主细胞后增殖过程的示意图。有关叙述正确的是（　　）

A．+RNA、-RNA上均具有RNA复制酶基因

B．能与核糖体结合并完成翻译过程的只有mRNA

C．酶1、酶2和酶3是在病毒的核糖体上合成的RNA复制酶

D．亲代+RNA→-RNA→子代+RNA的过程经过了两次信息传递

5 . 新冠病毒肆虐全球，给人们的日常生产、生活带来很大的影响，因此研发新冠病毒疫苗受到广泛关注。疫苗研制时常需要构建重组病毒载体，部分过程如下图所示，其中A~C表示结构或物质，NcoI、SphI、NheI、BamHI四种酶的识别序列和酶切位点详见下表。

限制酶	Nco I	Sph I	NheI．	BamH I
识别序列和切割位点	C↓CATGG	GCATG↓C	G↓CTAGC	G↓GATCC

（1）分析图中C的黏性末端可确定，需要用_______（填限制酶名称）切割质粒B。
（2）重组质粒1用_______（填限制酶名称）处理获得线性化片段，在缓冲液中将其与某克隆片段混合，适宜条件下成功连接。由图可知线性分子可以与克隆片段连接成环的原因可能是_______。连接后可得到的环状DNA分子最多有_______ 种（上述片段均足量且不考虑3个及以上DNA片段的连接）。
（3）获得的重组病毒载体可以导入工程菌，高效表达出_______用于制备疫苗。与减毒活疫苗比较，该类疫苗安全性更高，其原因是_______。
（4）新型冠状病毒感染人体后，其S蛋白识别人体细胞膜蛋白ACE2并与之结合，使病毒侵入细胞，同时会引起人体相应的免疫反应。重组人源蛋白ACE2可用于治疗新冠病毒肺炎，请推测该药物的作用机理：_______。

6 . 阅读以下资料，回答（1）-（5）题。
资料一：S蛋白是新冠病毒（SARS-CoV-2） 感染机体的关键组分，也是研制新冠疫苗的关键起点。2021年2月25日，由中国工程院院士陈薇领衔研发的以腺病毒为载体的疫苗获准上市注册申请，为我国乃至世界预防新冠疫情又增加了一件利器。下图为陈薇团队以缺失E₁等基因的人复制缺陷腺病毒（E₁基因是腺病毒基因组复制的关键基因）为载体的新冠疫苗研制流程示意图。

（1） HEK细胞是一种特殊的人胚胎肾源细胞，在该细胞中，质粒I和质粒II可在相关酶的作用下进行同源重组，形成含S蛋白基因的复制缺陷重组腺病毒。为保证上述重组腺病毒能够大量复制，HEK细胞应含有______基因及其表达产物。对获得的重组腺病毒除用PCR检测s蛋白基因外，还需用__________的方法检测S蛋白。
（2）与复制型腺病毒相比，利用复制缺陷腺病毒为载体制备成的疫苗的优点是___________。
资料二：疫苗从研制走向临床使用，需经动物实验和临床实验等多重检测，以保证其安全性和有效性。陈薇团队对上述复制缺陷重组腺病毒疫苗的特异性免疫反应及其保护效果进行评价。图1、2表示不同的接种剂量和接种方式对小鼠免疫的影响，图3表示接种不同剂量疫苗，14天后接种新冠病毒，72小时后检测小鼠肺组织的病毒含量。

（3） IFNy是一种能增强效应T细胞活力的淋巴因子，在免疫系统组成中，它与抗体均属于 _____。 由图1、图2结果可知，该疫苗可诱导小鼠产生明显的___________免疫。
（4）图3实验中对照组的处理为_________，结果显示疫苗对感染小鼠有明显的保护作用。为了达到最大的保护效果，该疫苗最适合的接种方式和剂量为_________________。
（5）有人认为，最近出现的变异新冠病毒有可能使该疫苗失去保护作用。你是否赞同他的观点？请说明理由。 __________________________________

7 . COVID-19病毒的基因组为单股正链RNA（与mRNA序列相同），含m个碱基。该病毒在感染的细胞胞质中复制、装配，以出芽方式释放，其增殖过程如下图所示。关于该病毒的叙述，不正确的是（       ）

A．COVID-19几乎只感染肺部细胞是因为侵入细胞必需要与特定的受体结合

B．一个COVID-19的RNA分子复制出一个新COVID-19的RNA约需要2m个核苷酸

C．该病毒基因所控制合成最长多肽链的氨基酸数不超过m/3

D．已被治愈的患者体内会永远存在该病毒的抗体和记忆细胞