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1 . 引起新冠肺炎的新冠病毒是一种带包膜的RNA病毒,包膜表面有与人体细胞膜表面的ACE2受体结合的S蛋白。疫苗接种和病毒检测是当前新冠肺炎疫情防控工作的重要举措。请回答下列问题:
Ⅰ、疫苗的研发和接种
(1)灭活疫苗。工业生产上利用Vero细胞能无限增殖特性培养新冠病毒,可实现_____的目的。
(2)腺病毒载体疫苗。该疫苗主要成分是活的、有复制缺陷、能表达S蛋白的重组人5型腺病毒。这种方式生产的疫苗由于重组腺病毒_____,从而提高了疫苗的安全性。
(3)重组亚单位疫苗。其技术线路是:提取新冠病毒RNA→通过RT酶PCR(反转录酶聚合酶链式反应)技术扩增筛选RBD蛋白(S蛋白中真正与ACE2结合的关键部分)基因→构建基因表达载体→导入CHO细胞并培养→提取并纯化RBD蛋白→制成疫苗。利用RT酶PCR技术,获取S蛋白基因时,需加入_____酶;扩增RBD蛋白基因时,应选择的引物为_____。PCR的产物可通过电泳鉴定,设置如下:1号泳道为标准(Marker),2号泳道是以_____为材料做的阳性对照组,3号泳道为实验组。图3中3号泳道出现杂带,原因一般有_____(至少答出两点)。基因表达载体构建中为提高目的基因和运载体的正确连接效率,研究人员应在图1中选择的限制酶是_____

Ⅱ、新冠病毒的检测
(4)核酸检测
图4是我国自主设计的新冠病毒核酸检测平台示意图,图5为RT-PCR(实时荧光逆转录聚合酶链式反应)示意图。当探针完整时,荧光基团(R)发出的荧光信号被淬灭基团(Q)吸收而不发荧光;当Taq酶遇到探针时会使探针水解而释放出游离的R和Q,R发出的荧光信号被相应仪器检测到,荧光信号的累积与PCR产物数量完全同步。

①加入自动化PCR体系配置中的引物和探针的设计依据是_____。引物和探针与模板结合发生在PCR循环中的_____阶段。
②利用荧光定量PCR仪可监测待测样液中病毒的核酸数量。若每断裂一个TaqMan探针,设置R发出的荧光信号的值为1.若经n次的PCR扩增,实时荧光信号强度_____(填“增强”“减弱”或“不变”),说明样液中病毒的核酸数量为0;若荧光信号强度值为a(2n-1),推测样液中病毒的核酸数量为_____
(5)抗原和抗体检测
为了及早发现新冠病毒的感染者,新冠病毒抗原检测试剂盒及抗体检测试剂盒作为核酸检测的有效补充措施。这两种试剂盒的检测原理为_____。对于已注射过灭活疫苗的人员,应选择_____(填字母)检测。
a、核酸检测       b、抗原检测       c、抗体检测
共计 平均难度:一般