1 . 微生物培养最基本的要求是无菌操作，下列对培养基、培养皿、接种环、双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法的正确顺序依次是（       ）
①化学药物消毒②高压蒸汽灭菌③干热灭菌④ 紫外线消毒⑤ 灼烧灭菌⑥ 巴氏消毒法

A．⑤③⑤①④⑥	B．③②⑤④①⑥
C．②③⑤①④⑥	D．②②⑤④①⑥

2 . 航天器组装、集成与测试厂房（AIT厂房）具有通风、干燥、营养物质匮乏等特性。为了保护航天器免受生物腐蚀和避免地球和其他天体之间出现交叉生物污染，研究者需将AIT厂房中的微生物进行分离鉴定，并进行抗生素抵抗力、抗紫外线试验，以便找到更加有效的监测和消杀方法。回答下列问题：
(1)对AIT厂房表面环境用含有无菌水的棉签擦拭取样，将采集到的样本加入到1mL无菌磷酸缓冲液中，然后可采用___法对微生物进行分离培养，以观察菌落的形态学特征；上述方法除可用于分离微生物外，也可用来___。用于分离微生物的培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为微生物提供___和维生素等。配制好的培养基通常采用___法来灭菌。挑选形态不同的单菌落进一步分离培养，得到单一菌株，再置于___培养基（根据物理性质划分）中，在摇床上进行扩大培养，用摇床振荡培养的目的是___。
(2)抗生素耐药性试验：采用纸片扩散法对分离得到的菌株进行药敏试验。每个平板上放置5个药敏纸片，纸片的药物扩散范围内菌株的生长会被抑制，形成透明的抑菌圈，可以通过测量___来反映细菌对测定抗生素的耐药程度，耐药程度越强的菌株观察到的现象是___。
(3)抗紫外线试验：将每株细菌分别接种到2个平板中，其中一个平板在超净工作台___环境下照射10min，照射时需要将培养皿的盖子___（选填“打开”或“闭合”）；照射完毕后，将两组平板置于32℃恒温培养箱倒置培养，观察菌落生长情况。

4 . 纤维素酶广泛存在于自然界的细菌、真菌等生物中。为纯化菌种，在鉴别培养基上接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，它至少包括_____________________三种组分，即若实验小组从不同微生物中分别获取了纤维素酶，同等条件下对纤维素进行水解得到的各产物含量不完全相同，原因可能是____
（2）对培养皿常用的灭菌方法及目的分别是_____________________据图判断该纯化培养能否达到纯化的目的，并写出判断依据_____________________
（3）图示中采用的接种微生物的方法是______________法，该方法把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面，为达到这一目的，应注意的操作有_______________（至少答2点）
（4）为弄清固体培养基中的非目的菌落来自菌种还是培养基，应设置对照组为___________

5 . “本草纲目”记载“橘皮，苦能泄。能燥”，柑橘的果皮不仅可以人药还可用于提取芳香油，果肉可以食用、榨汁。请回答下列问题。
（1）熬制中药至少经过15分钟以上沸水煎煮，该过程起到_____（填“消毒”或“灭菌”）作用。实验室常用的灭菌方法有_____（至少写出两种）。
（2）腐烂的橘皮表面呈现青绿色，是因为表面长出了青霉的菌落。若要对青霉进行分离纯化，可采用的方法是_____，培养基中除碳源外，还需要泰加的物质有_____（至少写出三种）。
（3）用柑橘果肉榨取果汁，加入果胶酶的作用是_____，为了使果胶酶得到充分利用，需要控制好果胶酶的用量。如果随着酶的用量增加，_____不再改 变时。说明酶的用量已经足够。
（4）为避免原料焦糊和有效成分水解。提取橘皮精油不宜采用_____方法，一般采用_____法提取。

6 . 由于塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，加拿大年仅16岁的高中生丹尼尔·伯德从当地一个垃圾场获取泥土样本，将泥土样本跟聚乙烯和一些促进细菌生长的溶液混合，探究培养液对塑料袋碎片的分解效果。结果，他发现绿脓杆菌和甲氰菊酯降解菌两种细菌分解聚乙烯最为有效，回答下列有关问题。
（1）他从垃圾场的泥土样本中获取分解聚乙烯的细菌，是因为在寻找目的菌株时，要根据__________。
（2）纯化菌株常采用平板划线法，此过程所用的接种工具是__________，此接种工具常采用________灭菌法进行灭菌。
（3）对统计样品中细菌的数目进行计数时，常采用__________法进行接种。但统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________，原因是____________________。
（4）实验结束后，为防止造成对环境污染，对使用过的培养基的处理是____________________。

7 . 青枯菌可从根部伤口侵入番茄植株，导致番茄患青枯病，进而引起植株萎蔫枯死。请回答下列问题：
（1）培养基的配制：取适量的马铃薯去皮切块，加水煮沸后，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和___________，采用_________方法灭菌，倒平板后得到固体培养基。培养基中的营养物质除碳源外还有_________________（答出两点即可）。
（2）制作细菌悬液：从病株样品中剪取侧根，经清水冲净后置于0．1%的升汞液中消毒片刻，目的是_______________，然后用_______________漂洗，除去多余升汞液，将其充分研磨后制成悬液。
（3）青枯菌的分离与鉴定：将少量悬液滴于培养基上，用_______（工具）将样液均匀涂布在培养基的表面，观察所得单菌落的特征。利用不同微生物在固体培养基上的________（答出两点即可）等菌落特征可以区分不同类型的微生物。
（4）用上述方法测定青枯菌密度，实际活菌数多于所测数值，因为____________________。

8 . 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。
(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了____和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和______。
(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。
(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。
(4)培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。
(5)如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐盐（或NaCl）细菌，这种培养基被称为 _________。
(6)橘子果实含有芳香油，通常可用_______________作为材料来提取芳香油，而且提取时往选用新鲜的材料，理由是_____________。得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的_____层，原因是__________________。加入氯化钠的作用是___________________。