1 . 某种除草剂（含P有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用污染土壤，甚至导致水体富营养化。为修复被该除草剂污染的土壤，可按如图所示程序选育能降解该除草剂的细菌。回答下列问题：

(1)若需要调节培养基pH，应该在灭菌______（填“前”或“后”）进行。对培养基进行灭菌，常采用的方法是______。
(2)若对分离出的细菌进行计数，可采用的接种方法是______。
(3)在进行分离降解该除草剂的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约80个菌落，而其他同学只筛选出大约30个菌落。甲同学的实验结果产生的原因可能有______（答出2点）。
(4)若要将可降解该除草剂的细菌固定化，需将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入目的菌进行充分搅拌，再转移至注射器中。注射进______溶液中，其作用是______。实验结束后，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉。

2 . 漆酶是一种胞外氧化酶（本质为蛋白质），具有很强的降解木质素的能力，可用于处理造纸厂排放的污水。研究人员从不同环境地表上采集土壤、腐烂的树枝等接种其中的微生物到MEA培养基上，经过一系列分离纯化，最终筛选出了高产漆酶的白腐真菌。请回答下列问题：
(1)为获得白腐真菌，将制备的土壤溶液接种到液体培养基中，进行振荡培养，由此判断白腐真菌的新陈代谢类型为______。
(2)将MEA培养基上疑似白腐真菌的菌株用平板划线法接种到新的培养基上，培养一段时间后会观察到菌落。菌落是指______。
(3)实际生产中，通过培养白腐真菌获取的漆酶蛋白往往与其他杂质蛋白混合在一起。因此，得到漆酶的粗提取物后，先要通过______法进行纯化，再通过______鉴定漆酶的纯度。用于生产实践前，还需要测定纯化后的漆酶的活性。漆酶的活性以______来表示。
(4)利用固定化技术将漆酶固定化后用于生产，其突出优点是______（至少答出两点），对漆酶进行固定化不宜采用包埋法，原因是______。

4 . 乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，在工业生产中具有重要价值。乳糖酶的制备及固定化步骤为：产乳糖酶微生物L的筛选→产乳糖酶微生物L的培养→乳糖酶的提取、分离、纯化→乳糖酶的固定化：回答下列问题：
(1)用于培养产乳糖酶的微生物L的培养基在接种前需要通过_______法进行灭菌。利用菌落特征能够鉴定微生物的原因是__________。
(2)采用液体培养基来培养产乳糖酶微生物L的目的是_______。将微生物L研磨破碎得到提取液后，可采用凝胶色谱法对乳糖酶进行分离纯化，其中，比乳糖酶相对分子质量大的蛋白质，会先被洗脱分离，原因是__________。
(3)在色谱柱中装填凝胶的时候要尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。在装填凝胶柱时不得有气泡存在，因为气泡会__________。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测乳糖酶纯度时，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是__________。
(4)工业生产中，若要将乳糖酶固定化，一般不适宜采用包埋法的原因是________。与使用游离酶相比，工业生产中使用固定化酶的优点是_______________。

5 . 苹果汁是人们喜欢的饮料，但未经处理的苹果汁在放置过程中会产生褐色物质，某果汁生产企业设计了如图所示的生产流程，所生产的苹果汁无色透明，回答下列问题。
苹果→破碎→灭菌→脱胶→过滤→吸附→浓缩→灭菌→灌装
(1)苹果汁生产过程中，在“脱胶”时加入了适量的果胶酶，果胶酶能够提高果汁的出汁率和澄清度，原因是___________________________。在果汁生产中，除了酶和苹果的用量，影响果汁产量的因素还有___________________(答出两点)。
(2)将完成脱胶、过滤后得到的果汁，输入“吸附树脂柱”中，以一定的流速通过树脂柱后，果汁颜色变浅甚至消失，据此推测，树脂柱的作用是_____________________________。
(3)民间常利用酵母菌发酵甘薯汁酿酒，从而提高其经济价值。为了提高酵母菌的利用率，研究人员对酵母菌进行了固定化，过程：酵母细胞活化→________→配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞。海藻酸钠溶化时，最好采用________的方法。上述固定化酵母细胞的方法称为________法。
(4)普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，现通过基因工程方法得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种。以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵一段时间后，接种________菌的发酵罐需要先排气。

6 . 乳糖在乳糖酶作用下被分解成葡萄糖和半乳糖。有些人体内缺乏乳糖酶，不能完全消化乳制品中的乳糖。乳糖酶在乳业生产中有重要的应用。通常乳糖酶的制备及固定化过程为：配制海藻酸钠溶液→海藻酸钠溶液与产乳糖酶细菌混合→固定化产乳糖酶细菌→产乳糖酶细菌发酵→提取并纯化乳糖酶。回答下列问题：
(1)在配制海藻酸钠溶液步骤中，加热溶化海藻酸钠时需要用小火或间断加热，边加热边搅拌，以防止______。
(2)固定化产乳糖酶细菌采用的方法是______，采用该方法固定产乳糖酶细菌的原因是______。
(3)将海藻酸钠与产乳糖酶细菌的混合液添加到______溶液中，并观察凝胶珠的情形，下图中图______制备的凝胶珠符合要求。   
(4)产乳糖酶细菌发酵过程中，将固定好的产乳糖酶细菌加入到质量分数为10%的______溶液中，置于：25℃下发酵。采用凝胶色谱法分离纯化发酵液中的乳糖酶，凝胶色谱法分离纯化的原理是______。

7 . 酶工程就是将酶或生物细胞在一定的生物反应装置中，利用酶的催化功能，借助工程手段将相应原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术。它包括酶制剂的制备、酶的固定化、生产应用等方面内容。回答下列问题：
(1)芽孢杆菌是一类能高效产生胞外蛋白酶的细菌。培养所用的培养基成分为：牛肉膏、蛋白胨、脱脂奶粉、NaCl、琼脂、水，其中提供氮源的除蛋白胨外还有___。现有芽孢杆菌产生的分子量约23800和约25000的两种碱性蛋白酶混合物，用凝胶色谱法对混合物进行分离，预测先洗脱出来的是分子量为___的蛋白酶。用电泳法对分离酶的纯度进行鉴定，为了消除酶分子带电的差异对迁移的影响，通常要向凝胶中加入___。
(2)加酶洗衣粉中的酶是用特殊的化学物质包裹的，遇水后包裹层很快溶解，释放出来的酶迅速发挥催化作用。这___（选填“是”或“否”）运用了固定化酶技术。酶适合采用化学结合和物理吸附法固定化，原因是___。固定化酶在生产实践中应用的优点是___（答出1点即可）。
(3)生产上用果胶酶获取果汁，为了使酶充分利用，需要控制好用量，随着果胶酶的用量增加，___不再改变时，说明酶的用量已经足够。大力推广使用加酶洗衣粉代替含磷洗衣粉，有利于生态环境保护，这是因为___。

8 . 图1为利用苹果生产果汁、果酒和果醋的大致工艺流程图，图2为某同学进行的澄清苹果汁生产实验图。请回答下列问题：   

   

(1)用苹果加工成果汁的过程中，需要加入果胶酶，果胶酶可以将果胶分解成___________，使浑浊的果汁变得澄清。
(2)为了进行果酒的发酵生产，通常先分离、纯化酵母菌，然后扩大培养、固定化酵母细胞，最后才接种、发酵。
①在分离纯化酵母菌时，需要进行无菌操作，其中对培养皿通常采用____________法灭菌。
②在使用液体培养基扩大培养的过程中，需要不断地振动或搅拌，目的是____________，有利于酵母菌的繁殖。
③制备固定化酵母细胞的过程中，如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，说明海藻酸钠___________，固定的酵母细胞数目___________。
(3)苹果酒经过进一步发酵可形成苹果醋，在此过程中，需要的培养条件是___________。
(4)如图2某同学进行的澄清苹果汁实验，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁的制作实验，说明固定化酶可被____________使用；在该装置中可以通过____________措施保证反应充分进行。

9 . 自然界一些微生物能产生脲酶，科研上很多研究和应用都与脲酶有关。回答相关问题：

(1)体检时，测试者口服含¹⁴C标记的尿素胶囊，通过测定呼出的气体是否含有¹⁴C来诊断是否感染幽门螺杆菌，这是因为该菌产生的脲酶能将尿素分解生成____________。
(2)筛选尿素分解菌时，培养基中应该以尿素为唯一氮源，从功能上分析，该培养基属于____________培养基。鉴别该菌时，如果培养基pH___________，会导致酚红指示剂变红。培养基中可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用有____________。
(3)脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有_____________________________（答出2种）。
(4)研究人员利用细菌M，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测____________（培养时间/pH）是决定细菌M高脲酶活力的关键因素。
(5)脲酶活力大小是指其催化尿素分解的速度大小，其表示方法是：_________________。

10 . 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产的主要流程如图所示。

(1)用__________（填植物激素）处理大麦种子，可以使步骤①中的大麦种子无须发芽就可产生淀粉酶。
(2)步骤④可采用___________法将优质酵母固定在不溶于水的多孔性载体中，以实现优质酵母的多次使用。若步骤③采用固定化酶技术固定淀粉酶需要用____________法。
(3)为统计发酵液中微生物的数量，采用了两套方案：
I．取适量发酵液稀释10⁵倍后，取0.1mL稀释液____________（填“涂布”或“多次划线”）在平板上，25℃培养7d后，各平板的菌落平均数为45个。由此方案可知发酵液中微生物密度约为________个/mL。
Ⅱ．取1mL发酵液与1mL红细胞溶液（含4×10⁷个红细胞）均匀混合，在显微镜下观察到如下视野。可推知发酵液中微生物密度约为________个/mL。

两种统计方法的操作均正确，但结果却相差很大，其主要原因是________。
(4)步骤⑤中的消毒常采用__________消毒法，以保证啤酒的风味。