1 . PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作:①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题:
(1)若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是____________(用数字序号表示)。
(2)操作③中使用的酶是_____。PCR中的每次循环可分为变性、复性、__三步， 其中复性的结果是______________。
(3)为了做出正确的诊断，PCR所用的引物应该能与___________特异性结合。
(4)PCR是__________的缩写。它是一项根据________________的原理，在生物体外大量快速扩增特定DNA片段的技术。PCR的产物常用_________来鉴定。
(5)基因工程的操作的基本程序:_____；______；_______；_______。

2 . 利用PCR将某小段含目的基因的DNA分子扩增循环n次，则（　　）

A．需要已知目的基因的全部序列以便设计引物

B．共需2n＋1－2个引物参与子代DNA分子的合成

C．应向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶、缓冲液等

D．理论上第4轮循环产物中含两种引物的DNA片段占15/16

3 . PCR技术扩增DNA，需要的条件是（　　）
①目的基因   ②引物   ③四种脱氧核苷酸   ④mRNA ⑤耐高温的DNA聚合酶等

A．①②③④

B．②③④⑤

C．①③④⑤

D．①②③⑤

4 . 下列关于PCR技术的叙述，正确的是（　　）

A．PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上

B．该技术需要解旋酶和耐高温的DNA聚合酶

C．该技术需要一对特异性的引物，要求一对引物的序列是互补的

D．该技术利用DNA半保留复制原理，可在体外对目的基因进行大量复制

5 . 新冠病毒的遗传物质是单链RNA，其主要的抗原是S蛋白，可利用荧光PCR技术快速检测核酸。被检测者咽拭子取样后，用提取的总RNA合成相应的cDNA，再用PCR技术进行扩增。若样本扩增出了新冠病毒特定的核酸序列，则检测结果为阳性，检测过程如下图所示。回答下列问题：

(1)为扩增出S蛋白基因（核酸序列），过程①应以________________作为模板来合成相应的cDNA。过程②是通过PCR技术进行扩增，该技术包括_______________________三个步骤。
(2)过程②的反应体系中加入了种引物，Taq酶四种脱氧核苷酸等物质，同时控制温度才能进行，最后通过荧光标记的基因探针对扩增产物进行检测。Taq酶主要的特点是__________，加入四种脱氧核苷酸的作用是_____________________。
(3)通过荧光标记的基因探针对扩增产物进行检测，利用的原理是_________________。
(4)3月12日，国家药监局批准五款新冠抗原自测产品上市。抗原检测有利于对疑似人群的早期分流和快速管理，与核酸检测相比，抗原检测虽然不够灵敏，但是有__________的优点；实际使用中发现，若人体感染了其他病毒，不会造成抗原检测假阳性，原因是_____________。

6 . 干扰素是动物体内的一种蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症，但在体外保存相当困难，若使其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，则在-70 ℃的条件下可以保存半年。某科研小组欲用大肠杆菌生产干扰素，回答下列相关问题：
(1)从上述资料可知，要使干扰素在体外保存时间延长，需要对蛋白质的氨基酸进行改造，然后据其序列推测出相应基因的_____序列，从而合成基因，进而表达相应的蛋白质。这种以_____工程为基础延伸出来的第二代基因工程就是_____工程，与后者相比，前者原则上只能生产_____。
(2)对人工合成改造后的干扰素基因可以采用_____（简称PCR）技术进行扩增，每次循环一般需要依次经历_____三步。
(3)将改造好的干扰素基因导入到大肠杆菌的方法是_____ ，通常选用微生物作为受体细胞生产药物，最主要的原因是_____。

7 . 下图表示形成DNA并进行PCR扩增的过程。据图分析，下列叙述正确的是（       ）

A．①过程需要逆转录酶

B．②过程所需的原料是核糖核苷酸

C．③过程需要解旋酶破坏氢键

D．④过程的两种引物之间能互补配对

8 . PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。下列叙述正确的是（       ）

A．PCR第4个循环，消耗了15对引物

B．脱氧核苷酸作为扩增的原料会依次连接到5'端

C．耐高温的DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上

D．用图中引物扩增至少四个循环后才能获得两端均添加限制酶切点的目的产物

9 . 新型冠状病毒的检测方法目前主要有核酸检测和抗体检测。现在的病毒核酸检测试剂盒，多数采用荧光定量PCR方法。检测原理就是以病毒独特的基因序列为检测靶标，通过PCR扩增，使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加，每一个扩增出来的 DNA序列，都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中，由于没有靶基因扩增，因此就检测不到荧光信号增强。下列说法错误的是（　　）

A．核酸检测其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸

B．PCR需要的条件有模板、引物、4种游离的核糖核苷酸、热稳定DNA聚合酶、缓冲液等

C．可以通过鼻咽拭子来进行新型冠状病毒核酸的检测

D．核酸检测结果的准确与否不仅与试剂盒自身的检测准确性有关，也跟检测样本采集的时机和检测样本的类型密切相关

10 . 基因a在人体细胞中可表达出蛋白质a。有生物学家从人的DNA中分离出基因a， 并通过转基因技术将其转入了细菌。经过培养发现，该转基因细菌产生了一种新蛋白质X。进一步分析表明：蛋白质X是基因a仅在细菌中的表达产物。下列说法正确的是

A．基因a在体外扩增需要引物，在人体细胞中的复制不需要

B．细菌细胞和人体细胞中作为翻译模板的RNA碱基序列不同

C．基因a在体外扩增和在人体细胞中复制都是在解旋酶的作用下打开双链

D．将基因a在体外扩增时，必须要先测出基因a的所有脱氧核苷酸序列