1 . I.中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。

(1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其________（填填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用________（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。
(2)过程①通过酶解法去除________获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂________诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带________________的杂种原生质体。
(3)科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。
  
注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞
由图2可知促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为__________，高于此密度不利于形成双核异核融合体的原因是______________。此外，影响原生质体融合的因素还应包括____________等。
(4)通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。

组别	A组	B组	C组（空白对照组）
实验处理	三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物	三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物
	每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量

①在表格中将C组的实验处理补充完整______。
②若实验结果为________，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
II. 猕猴桃因貌似猕猴而得名，是一种品质鲜嫩、营养丰富的美味水果。我国研究人员利用“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”两个不同种培育出了更加优良的品种，其过程如图所示。请分析并回答下列问题：
  
(5)因“中华猕猴桃”和“美味猕猴桃”之间存在__________，所以用有性杂交方法很难得到可育后代，上述①～⑥培育优良品种H的过程所应用的技术是__________、_____________技术。
(6)图中B、D是__________；G是__________；②过程需使用__________酶进行处理。
(7)过程③使用的化学法包括：__________融合法和高Ca²⁺—高pH融合法等。
(8)⑤⑥过程分别称为__________，__________。该过程中，植物激素中__________是关键激素。
(9)过程③得到的两两融合的细胞有__________种，因此需要进行筛选。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长。为了能筛选到杂种细胞F，若在①过程对“中华猕猴桃”用X射线处理，需对“美味猕猴桃”用____________处理，以便最终能获得优良杂种植株H。

2 . 为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量，研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因（Bapt）的超表达载体，并将其导入红豆杉细胞，具体流程如下图。相关说法不正确的是（       ）

A．p1301载体上应含有增强Bapt基因表达的序列

B．超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因

C．可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功

D．工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织

3 . 我国现有的转基因抗虫棉对棉铃虫、红铃虫、卷叶虫等鳞翅目的害虫具有非常显著的抗性。苏云金芽孢杆菌的Bt基因能指导产生一种Bt杀虫蛋白，它对多种害虫具有毒杀作用。科学家将苏云金芽孢杆菌的Bt基因导入到棉花的叶肉细胞中，经过植物组织培养技术得到抗虫棉，抗虫棉的出现大大减少了农药的使用，保护了环境，抗虫培育过程如图所示。回答下列问题：

(1)获得的Bt基因常利用PCR技术在体外快速扩增，原理是________。从理论上推测，PCR扩增目的基因至第四轮循环产物中仅含有其中一种引物的DNA片段所占的比例为________。若退火温度过高，对扩增的影响是________（“无Bt基因”“Bt基因纯度低”或“Bt基因多”）。
(2)如果从限制酶A、B和C任选两种酶对Ti质粒进行切割产生不同末端，均会将Ti质粒切成两段，则形成的DNA片段有________种。重组质粒除了含有目的基因、复制原点、启动子和终止子外，还需要有________，作用是________________________________________________。
(3)Bt基因导入棉花叶肉细胞的方法是________。与诱变育种和杂交育种相比，利用基因工程技术培育的抗虫棉花植株，具有突出的优点是________________________________________________（答两点）。

4 . 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。下列表述正确的是（       ）

   

A．实现①过程的条件是外植体细胞发生基因突变

B．①过程受外源激素的调控，②过程受内源激素的调控

C．获得脱毒苗常用的外植体是根和芽，脱毒苗具有更强的抗病毒能力

D．通过细胞培养获得辣椒素的过程不需要体现细胞的全能性

5 . 植物细胞工程在农业、医药工业方面有着广泛的应用，下列有关叙述错误的是（　　）

A．采用茎尖组织培养技术得到脱毒苗的过程中需要多次更换培养基

B．细胞产物的工厂化生产提高了单个细胞中次生代谢物的含量

C．可以利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种

D．利用微型繁殖技术可以保持优良品种的遗传特性

6 . 下图是通过植物细胞工程技术培育耐盐杂种植株的过程。回答下列问题：

(1)过程①使用的酶是__________，过程②人工诱导原生质体融合的具体的物理方法有________、__________ ，从杂种细胞到幼芽的过程中运用的生物技术是__________，过程③指__________。
(2)过程④选择培养时需要的条件是_____________________。
(3)上述培育耐盐杂种植株的过程运用了植物体细胞杂交技术，此技术的优势是__________。若甲植物（2N=18），乙植物（4N=32），则目的植株细胞内含染色体数目为__________，该目的植株__________（填“可育”或“不可育”），原因是__________。
(4)甲植物能产生次生代谢物——紫草宁，具有重要的药用价值，但在植物细胞中含量低、难提取、难体外合成，可通过__________生产，以获得次生代谢物。

7 . 下列关于植物体细胞杂交技术的说法，正确的是（　　）

A．制备原生质体的过程仅使用果胶酶即可去除细胞壁

B．用高Ca2+-高渗融合法诱导原生质体融合体现了细胞膜的流动性

C．原生质体融合产生的杂种细胞需经过脱分化和再分化的过程获得杂种植株

D．通过植物体细胞杂交技术改良小麦时，必须选用分生区细胞以获得脱毒苗

8 . 通过植物组织培养技术，可把植物组织或细胞培养成胚状体（类似于正常种子结构中的胚），再通过人工种皮（人工薄膜）包装得到如图所示的人工种子，这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。下列相关说法正确的是（　　）

   

A．培育胚状体需经历脱分化和再分化的过程，生长素和细胞分裂素在其中具有重要作用

B．推测人工种皮是一种半透膜，人工种子可以通过人工种皮获得氧气进行呼吸作用

C．人工胚乳相当于单子叶植物种子的胚乳，能够为人工种子的早期生长补充营养

D．利用茎尖分生区作为外植体培育获得的人工种子具有抗病毒的特点

9 . 番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）是一类单链环状DNA病毒，能引发番茄黄化曲叶病。检测某番茄幼苗是否感染该病毒，实验人员进行以下操作：
①分析PCR扩增结果；②从番茄幼苗组织样本中提取DNA；③采集番茄幼苗叶片组织样本；④利用PCR扩增DNA片段。
完成下列问题：
(1)正确的操作顺序是________（用数字序号表示）。
(2)操作②在番茄研磨液中加入2mol/L的氯化钠，作用是______；研磨液中的乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的作用是_______
(3)操作④中使用的酶是_________。PCR反应中每次循环可分为______、退火、延伸三步。
(4)PCR扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳后的结果如下：

注：M：DNA marker；1-4：空白对照、阴性对照、阳性对照、样品
实验中，DNA marker是一组已知长度和含量的标准DNA片段的混合物，起_______作用。健康番茄幼苗的DNA是阴性对照组，_________是阳性对照组。若想利用该样品植株获得无病毒的番茄幼苗，方法是_____。

10 . 花椰菜具有由核基因控制的多种优良性状，但易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。实验过程如下图所示。下列叙述正确的是（       ）

A．①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压

B．②过程常使用灭活的病毒作为诱导剂诱导原生质体融合

C．杂种细胞的特点是有叶绿体但丧失了再生能力

D．杂种植株含有控制花椰菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递