1 . 絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。其流程图如下。

据图回答：
(1)溶菌酶的作用是________。
(2)PEG的作用是________。
(3)经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是____________________________________。
(4)目的菌株的筛选：筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有________的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的作为目的菌株。
(5)为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中；同时设置______________为对照组。经搅拌、静置各3 min后，分别测定上层水样的石油浓度和COD值(COD值越高表示有机物污染程度越高)，计算石油去除率和COD去除率。

2 . 在20世纪初，科学家用植物细胞杂交方法，将白菜的原生质体和甘蓝的原生质体融合，成功地培育出了 “白菜——甘蓝”杂种植株，据图回答下列问题：

（1）过程a所用的化学诱导剂一般是____________，过程b完成的标志是____________。
（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是____________，过程c涉及的分裂方式为____________。
（3）在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家研究了植物生长调节剂对某药用植物愈伤组织诱导的影响，实验结果如下表:

培养基编号	2，4-D/mg·L-1	6—BA/mg•L-1	愈伤组织诱导
L1	1.0	0	65.41
L2	2.0	0	68.76
L3	3.0	0	91.01
L4	3.0	0.2	54.48
L5	3.0	0.5	57.35
L6	3.0	1.0	51.71

注:愈伤组织诱导率（%）=产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×lOO%。
①从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的__________有利于形成愈伤组织，而添加________则不利于愈伤组织的形成。
②在上述研究的基础上，为了探究光照对愈伤组织形成的影响:应将已经消毒过的外植体平均分为甲、乙两组，分别接种到__________（填培养基编号）培养基上；甲组置于__________环境，乙组置于________环境，其它条件相同且适宜;培养一段时间后，分别计算甲、乙两组中__________。

3 . 下图1是将动物致病菌的抗原基因导入香蕉制成植物疫苗的过程，下表1是三种限制酶的识别序列及切割位点，请回答下列问题：

限制酶	EcoRⅠ	PstⅠ	SmaⅠ
切割位点	G↓AATTC CTTAA↑G	CTGCA↓G G↑ACGTC	CCC↓GGG GGG↑CCC

（1）将图1中的含抗原基因的DNA片段用如图所示的EcoRⅠ、PstⅠ和SmaⅠ完全酶切后，可以得到____种DNA片段。
（2）用图1中的质粒和抗原基因构成重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是______；与只使用EcoRⅠ相比较，使用EcoRⅠ和PstⅠ两种限制酶同时处理质粒和含抗原基因的DNA的优点是_______。
（3）步骤①所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？____________。
（4）选用农杆菌是由于农杆菌的Ti质粒上的T一DNA具有什么特点？_________。
（5）步骤④是_________过程，培养愈伤组织的培养基中需要添加蔗糖的目的是________________。
（6）为了促进胚状体的生长发育，可以向人工种子内添加___________。

4 . 红叶椿具有极高的观赏价值和广泛的园林用途，近年来需求量激增，组培快繁是保持其优良性状和加快其推广的主要手段。下表是表示BA（细胞分裂素类）与NAA（生长素类）的配比对腋芽增殖的影响，请回答下列问题：

     BA与NAA配比对红叶椿芽苗增殖的影响

BA（mg/L）	NAA（mg/L）	接种数/个	芽分化数/个	增殖系数	有效苗率	平均苗高	组培苗生长情况
0.5	0.001	22	64	2.91	98	2.80	生长旺盛
	0.010	18	42	2.33	95	2.50	芽苗较壮
	0.100	24	48	2.00	90	1.96	腋芽生长减慢愈伤增多
1.0	0.010	22	63	2.86	100	2.90	生长健壮
	0.100	24	52	2.17	80	2.00	腋芽生长减慢愈伤增多
2.0	0.010	22	66	3.00	78	1.65	腋芽增殖快出现玻璃化
	0.100	22	62	2.82	50	1.50	腋芽生长慢出现畸形苗

（1）实验采用红叶椿茎段水培发出的嫩梢，接种前要对该外植体进行__________________。切取一定大小的___________进行组织培养，再生的植株就有 可能不带病毒，从而获得脱毒苗。
（2）植物激素中生长素和细胞分裂素是启动红叶椿细胞分裂、_________________和再分化的关键性激素。NAA___________（填“属于”或“不属于”）植物激素。在愈伤组织中加入聚乙二醇，________（填“能”或“不能”）获得四倍体的红叶椿。
（3）由表可知：当BA为0.5mg/L时，NAA浓度由0.001mg/L升高为0.01mg/L时，增殖系数和苗高均___________，芽苗长势也略有___________；当BA浓度上升到2.0mg/L时，NAA取0.01mg/L和0.1mg/L时，增殖系数和芽苗高差异___________（填“显著”或“不显著”） 。

5 . 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同）

(1)常用酶解法获得紫花苜蓿与百脉根原生质体，优点是___；步骤①诱导二者原生质体融合时除可用PEG处理外，还有___（答两种）等方法。
(2)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是___。融合后的原生质体经过细胞壁再生形成杂种细胞，进而经过___形成愈伤组织。
(3)步骤③先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，其中起主要作用的是___。长出芽后，再将其转接到诱导生根培养基上，最终得到杂种植株。据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是___。此种育种方式的优点是___。
(4)上述过程中需要提供光照的是___（填序号），光照的作用是___。得到的杂种植株是___倍体，理论上是否可育?请回答并阐述理由：___。
(5)在实验前需要通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是___。

7 . 请回答黄花蒿植物组织培养的有关问题：
(1)黄花蒿的植物组织培养研究在我国已有数年历史。选取黄花蒿的茎段后，通常用体积分数为70%的酒精等药品对茎段进行_________，然后再放入_________溶液中浸泡，最后用无菌水冲洗。若外植体不慎被细菌感染，采用划线分离法纯化细菌，在4个区域内划线需要将接种环灼烧灭菌_________次。
(2)植物组织培养的培养基可采用________灭菌。形成愈伤组织的过程中，除需无菌、营养和激素外，________等外界条件也很重要。
(3)2—3周后将生长健壮的丛壮苗在_______(A.LB培养基+适宜浓度BA          B.LB培养基+适宜浓度NAA       C.MS培养基+适宜浓度BA          D.MS培养基+适宜浓度NAA)上继续生根，形成完整植株。定植前，还需逐渐__________进行炼苗。

8 . 下图中的①②③代表通过植物组织培养技术培育新植株的三条途径，请回答：

（1）外植体a、b、c来自同种植株，植株A、B、C中的细胞，全能性表达程度_________(填“相同”、“可能不同”)。
（2）途径②和③需要用到__________和_________（填培养基的物理性质）两种培养基。将含B1的试管放在摇床上，通过_________培养可以分散成单细胞。
（3）外植体C脱去细胞壁过程中需要加入适宜浓度的__________(A.甘露醇B.盐酸C.蒸馏水D.氯化钠）以保持一定的渗透压。原生质体培养成功标志着_________技术又向前迈进了一步。
（4）通过大量培养特定细胞系，可以实现能产生重要__________(如某些中药）的细胞的大量克隆和产物的工业化生产。

9 . 下图是植物体细胞杂交示意图，请据此回答：

（1）在②过程中，可用的化学诱导剂是_____________，若在容器中放置若干a、b结构，诱导c完成所依据的原理是___________________，然后经②过程的处理，形成所有细胞的类型有______种（包含不融合和2个原生质体间的融合）。
（2）由d培育成f过程说明_________________。植物体细胞杂交育种方法的优点是______________。
（3）⑤过程的实质是______________________________。
（4）若要制成人工种子，则要经过图中的________过程得到的结构，包裹上人造种皮制得。
（5）上图中____（填字母）细胞全能性最高。
（6）微型繁殖培育无病毒幼苗时，一般选取______作为外植体，依据是_______________。

10 . 甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：
（1）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到_____________。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是__________________（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”）。
（2）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是_____________。A中的愈伤组织是叶肉细胞经__________形成的。

（3）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，_____（“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体。