1 . 紫杉醇是红豆杉产生的一种重要抗癌物质，利用植物组织培养技术获得紫杉醇的基本过程如图所示。回答下列问题：

(1)外植体经______________过程形成愈伤组织。用纤维素酶和果胶酶对愈伤组织进行处理的目的是______________。该植物组织培养过程属于______________（A．器官发生途径　B．体细胞胚发生途径　C．都不是）。
(2)将诱导出的愈伤组织接种至装有液体培养基的三角瓶中振荡培养，影响细胞的生长速度和紫杉醇含量的因素除了温度、pH、光照、氧气等条件、培养基的营养物质外，还有______________等（答出两点）。
(3)如要将外源基因导入红豆杉细胞进行遗传改造，图1表示构建重组DNA的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tet^r）和氨苄青霉素抗性基因（amp^r），回答下列问题：

①图中酶1和酶3分别是______________；②为筛选出含重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到甲、乙、丙三类菌落，三类菌落形态相同，生长情况如图2所示，应选择的菌落类型是______________类，未转入质粒的菌落类型是______________类；（填字母类型）

③为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。甲、乙、丙3条引物（图中→表示复制方向）在正确重组质粒中的相应位置如图3所示，PCR鉴定时应选择的一对引物是______________，某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段，原因是______________。

2 . 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图：下列表述正确的是（       ）

A．③和④过程涉及的激素主要是生长素和赤霉素

B．用①处理细胞时需要在较高渗透压溶液中进行

C．灭活是指利用物理或化学手段破坏病毒或细菌的抗原结构进而使其失去感染能力，但是灭活的仙台病毒不可促进②过程

D．显微镜下供体染色体的存在可作为初步筛选杂种细胞的标志

3 . 紫杉醇是从红豆杉中提取的一种高效抗癌的药物，虽然能造福人类，但却为濒危的红豆杉带来灭顶之灾。为取代从天然植株中提取紫杉醇的方式，可进行细胞产物工程化生产，其过程为：获取红豆杉外植体→消毒→诱导愈伤组织→细胞培养→提取紫杉醇。请回答下列问题：
(1)紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种________代谢物，可利用________技术实现其工业化生产。
(2)获得愈伤组织这一过程对光照的要求是___________。研究发现用幼嫩茎段比成年老枝更易产生愈伤组织，且时间早，诱导率高，原因是_____________。
(3)用少量果胶酶处理愈伤组织获取单细胞，在___________（固体、液体或半固体）培养基中进行培养，可有效提高紫杉醇的产量。据下图分析，为获得最大紫杉醇总产量，最适合的2，4－D浓度应为____________（填“0.5”、“1.0”或“2.0”）mg/L。


注：生长速率＝每天每升培养基中增加的细胞干重克数
(4)多倍体愈伤组织细胞产生的次生代谢产物量常高于二倍体。 若愈伤组织细胞（2n）经诱导处理后，观察到染色体数为8n的细胞，最合理的解释是___________________。
(5)与从天然植株中提取相比，利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是______________________（答出两点）。

5 . 细胞工程在药物生产和育种等领域应用十分广泛。阅读下列材料，回答下列问题。
材料一：人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白。如图是制备抗HCG单克隆抗体流程示意图。

材料二：西湖龙井含有的茶碱是植物细胞的代谢产物，具有提神、抗衰老功效，可利用植物组织培养技术来实现茶碱的工业化生产。
(1)免疫处理的小鼠产生相应的B淋巴细胞群能合成并分泌___________（填“一种”或“多种”）抗体。步骤③需对选择培养的杂交瘤细胞进行___________及抗体检测，该过程一般在多孔细胞培养板上进行：先将细胞悬浮液稀释到7～10个细胞/mL，再在每个培养孔中滴入0．1 mL细胞稀释液，其目的是___________。
(2)单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，如科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体，制作出了早孕试纸，该试纸可以利用尿液诊断早孕的理由是_______________。鼠源性单克隆抗体可应用于肿瘤的临床免疫治疗，在注射前需要进行人源化改造，除抗原结合区域外，其他部分都替换为人抗体区段，目的是降低___________。
(3)若利用植物组织培养技术，可将龙井茶叶细胞培养到___________阶段，然后从___________（填细胞器）中提取茶碱；若要获得神奇的人工种子，可将龙井茶叶细胞培养到___________，再和具有养分的人工胚乳一起包埋在具有保护功能的人工种皮中；由其培育成的植株生殖方式为___________。
(4)与常规育种相比，植物组织培养技术产生的植株特点有___________。

6 . 现有甲、乙两种植物（均为二倍体纯合子），其中甲种植物的光合作用能力高于乙种植物，但乙种植物很适宜在盐碱地种植，相关性状均由核基因控制。若要利用甲、乙两种植物培育出高产、耐盐碱的植株，最佳的方案是

A．利用植物体细胞杂交技术获得目的植株

B．将乙种植物的耐盐碱基因导入甲种植物的卵细胞中，然后进行离体培养

C．使两种植物有性杂交获得F1，再利用单倍体育种技术获得目的植株

D．诱导两种植物的花粉融合，并直接培育成幼苗

7 . 人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程：

(1)过程④优化悬浮细胞培养体系，最重要的条件是蔗糖浓度的筛选，蔗糖浓度过低和过高均不利于悬浮细胞的培养，原因是____。
(2)科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择____的愈伤组织。

(3)科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的抑制效果：
①首先培养胃癌细胞，培养液中加入胎牛血清的目的是____。培养条件中5%CO₂的作用是____，温度为37℃。将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。
②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。请根据图3写出计算肿瘤体积变化的公式：____。根据实验结果可以得出的结论有____。

8 . 回答下列问题：
I、我国绒山羊所产的羊绒因品质优秀被誉为“软黄金”而畅销全球。胸腺素β4（Tβ4）是动物体内一种分布广泛的多肽，可促进动物毛发生长。研究者利用 基因编辑技术将Tβ4基因定点整合到绒山羊基因组中，获得新型绒山羊，部分操作过程如图所示。

(1)若要通过PCR技术对Tβ4基因进行扩增，关键是设计Tβ4基因对应的_____。高质量的DNA模板是成功扩增出目的基因的前提条件之一 ，在制备高质量DNA模板时，必须除去蛋白质，方法有_____（写出两种方法）
(2)扩增后的Tβ4基因与质粒结合构建基因表达载体的目的一是使目的基因_____， 二是使目的基因_____。
(3)图 中 X 为_____细胞，获得的重构胚（重组细胞）需要继续培养至囊胚或桑椹胚阶段，再将其移植到受体母羊体内，从而获得T4基因定点整合的羔羊。在胚胎移植前需要对受体母羊用激素进行_____处理，其目的是_____。
Ⅱ、在草莓生产上，传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降 低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过
程如下图所示。请回答下列问题：

(4)微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取根尖或茎尖作为外植体，其依据是_____ 。
(5)过程①到过程②需要更换新的培养基，其原因是_____。
(6)过程②要进行照光培养，其作用是_____。
(7)通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮包装得到人 工种子，这种人工种子的种皮应具有透气性，有利于_____。
(8)与常规的种子繁殖方法相比，植物微型繁殖技术的特点有_____ （答出2点即可）。

9 . 下图是培养耐盐植株的实验流程，回答下列问题。

(1)用Ƴ射线处理时，选择愈伤组织作为实验材料的原因是________，处理2中添加的物质X为______。
(2)经植物组织培养得到的植株，一般可保持原品种的______，这种繁殖方式属于______繁殖。
(3)愈伤组织经______过程可获得耐盐植株，研究发现，愈伤组织的中层细胞是根或芽再生的源头干细胞，其在不同条件下，通过基因的特异性表达调控生长素、细胞分裂素的作用，表现出不同的效应（见下表）。

基因表达产物和相互作用	效应
WOX5	维持未分化状态
WOX5+PLT	诱导出根
WOX5+ARR2，抑制ARR5	诱导出芽

分析表格推测WOX5的作用是__________，WOX5+PLT可能有利于愈伤组织中______（填激素名称）的积累。ARR5的作用可能是______（增强/抑制）细胞对细胞分裂素的敏感性。

10 . 花生是我国重要的经济作物之一，根系在生长过程中，会分泌苯甲酸、苯乙酮、丙三醇、苯甲醛等物质，这些物质会抑制青枯病原菌和其他植物的生长。由于土地限制等原因，同一土地多年连续种植现象十分普遍，这些物质产生的自毒作用越来越明显，造成花生产量下降。扬州大学已采用“采集根际土壤→选择培养→分离、纯化培养→菌种鉴定”途径筛选出将苯甲酸降解为无毒小分子（CO₂和H₂O等）的根际菌。回答下列相关问题：
(1)花生根系分泌的苯甲酸等物质属于其____________（填“初生”或“次生”）代谢物，合成该类物质的代谢的进行特点是___________________。
(2)为什么要从连作花生的土壤中寻找降解苯甲酸的根际菌？______________
(3)为确保能够分离得到苯甲酸分解微生物，常将土壤稀释液先进行选择培养，该培养基的碳源要求为________________，进行该步操作的目的是________________。
(4)分离、纯化培养时，可采用____________________方法接种，从物理形态角度考虑，该培养基属于___________培养基。
(5)获得的菌种可通过___________工程大量增殖，并作为微生物肥料施用于土壤。采用微生物降解、修复土壤技术的优点有____________________
(6)筛选得到的降解苯甲酸的根际菌并不能直接推广应用，还需考虑的原因有哪些？（答出1点即可）____________