1 . 某女性患有一种罕见的线粒体基因控制的遗传病，为让她能够生出一个健康的宝宝，医生采用了一种新的技术手段。他们将一位健康女性的卵细胞除去细胞核，与患病女性卵细胞的细胞核进行重组处理，得到重组细胞后，再运用试管婴儿技术培育出一个健康的婴儿。根据以上信息判断，下列相关叙述错误的是（　　）

A．患者所生的婴儿同时带有三个亲本的遗传物质

B．这种培育新生儿的操作，可以有效避免单基因遗传病的发生

C．试管婴儿培育过程中， 需要的核移植技术中去核方法，一般采用显微操作法

D．试管婴儿培育过程中，需要在体外培养到桑葚胚阶段，移入到母体子宫内继续发育

2 . 将蝌蚪肠细胞的细胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合子”能发育成正常的蝌蚪，而单独培养肠细胞却不能发育成蝌蚪。下列叙述错误的是（       ）

A．“合子”发育成正常的蝌蚪，说明肠细胞的细胞核具有全能性

B．由“合子”发育成的正常蝌蚪长大后必为雌性蛙

C．“合子”发育成正常蝌蚪的过程中伴随着基因的选择性表达

D．细胞核含有该物种的全套基因，但单独培养肠细胞其全能性会受到抑制

3 . 2018年1月25日，我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请分析回答：

(1)2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴，获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____，恢复其全能性较难。
(2)进行过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_____。在进行细胞原代培养时会出现_____和细胞接触抑制现象。
(3)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是_____。
(4)图中过程⑤用到胚胎移植技术，其实质是早期胚胎在_____条件下空间位置的转移。
(5)研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如下图所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是_____。

4 . 2017年中科院神经科学研究所攻克了克隆灵长类动物这一世界难题，首次成功以体细胞克隆出了两只猕猴——“中中”和“华华”，流程如下图。下列相关叙述错误的是（　　）

A．采集的卵母细胞应该培养到MⅡ期

B．过程①操作一般不晚于囊胚期

C．克隆猴的性状与核供体性状完全相同

D．克隆猴的成功说明动物体细胞的细胞核具有全能性

5 . Ca²⁺水平升高可直接或通过激活重构胚使处于MII期的卵母细胞恢复分裂周期。由于持续高水平的成熟促进因子（MPF，一种蛋白激酶）存在，MII期的卵母细胞不能进入末期。下列相关分析错误的是（       ）

A．自然受精过程中，精子入卵可能促进了卵母细胞细胞质基质中Ca2+水平升高

B．在核移植过程中，通过电融合法可使供体细胞与去核卵母细胞融合形成重构胚

C．Ca2+载体法可激活重构胚是因为载体促进了Ca2+从膜外向膜内转运

D．蛋白酶合成抑制剂可通过抑制MPF的合成使重构胚保持休眠

6 . 2019年1月，中国科学家首次利用技术，获得一只生物节律核心基因敲除的猕猴甲，并通过体细胞核移植技术，获得5只生物节律紊乱的克隆猕猴，用于研究生物节律机制，技术流程如图所示（①②表示操作过程）。下列说法正确的是（       ）
   

A．基因只存在于下丘脑细胞内并在下丘脑细胞中表达进而影响生物节律

B．采集到的卵母细胞需在体外培养至MⅡ期，再进行①显微操作去核后作为动物体细胞核移植的受体细胞

C．成纤维细胞体外培养时，需要提供的和的气体环境

D．②通过电融合法使两细胞融合形成的重构胚可直接移植至代孕雌猴子宫内

7 . 下列关于动物细胞工程的说法，不正确的有几项（       ）
①通过PEG融合法、电融合法等方法可以诱导两个动物细胞相互识别而融合为一个细胞
②动物细胞和癌细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象
③灭活的病毒可增加细胞膜的流动性，因而可用于诱导动物细胞融合
④现阶段，体细胞核移植技术成功率非常低，而且绝大多数动物存在健康问题
⑤小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40条，其B淋巴细胞的染色体数为40条，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80个
⑥聚乙二醇是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合
⑦动植物组织经胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理成为单个细胞后才能进行培养
⑧动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞具有更高的全能性

A．4项

B．5项

C．6项

D．7项

8 . 动物的某种退行性神经疾病由基因t突变为基因T导致。随着生物工程技术的发展和基因编辑（CRISPR/Cas9）技术的出现，为治疗该疾病提供了如下新思路。回答下列问题：

(1)利用CRISPR/Cas9编辑基因时，Cas9蛋白依据sgRNA片段（不同的sgRNA可以识别不同的DNA序列），能精准识别并切割动物纤维细胞中的致病基因T，并在DNA连接酶的作用下将正常基因t连接到染色体DNA的相应位置上，获得不含致病基因T的动物成纤维细胞。可见，sgRNA片段能够精准识别致病基因T的核苷酸序列的原因是_____________，CRISPR/Cas9还具有_______________________________的作用。
(2)过程①所利用的生物技术是_______________，过程②的培养条件十分苛刻，需要无菌、无毒环境，充足的营养物质、适宜的温度和pH；培养时，对气体环境的要求是_______________。过程④的培养基中需要添加__________，以促进ES细胞的增殖分化。
(3)利用上述思路治疗该退行性神经疾病，理论上不会产生免疫排斥反应，原因在于__________________。

9 . 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

   

(1)和受精有关的过程有：①第一次卵裂开始；②卵细胞膜反应；③透明带反应；④穿越透明带；⑤精子入卵。其正确的顺序为___________________（填序号）。
(2)超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射___________________。
(3)从A到E中，适宜于牛的胚胎移植时期有__________；图中标号3为__________细胞，它将来可发育为胎膜和胚盘。
(4)动物的早期胚胎移植到同种且___________________与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是细胞膜具有___________功能。
(5)图1中胚胎移植的犊牛的性别为___________（雌性、雄性、不能确定），克隆羊多利的性状和_____（黑面绵羊\白面绵羊）最接近。

10 . Ⅰ：美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题：

   

(1)步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射__________和_________。步骤②所用的SP2/0细胞的特点是____________。
(2)吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入________进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是___________________。
Ⅱ：科学家利用动物细胞培养和核移植技术获得克隆动物的流程如下图所示。请回答下列问题。

   

(3)从供体身上取下的器官或组织进行细胞培养时，首先要用_____________处理一段时间使细胞分散开来。细胞培养过程中需要定期更换培养液，目的是________________。
(4)采集的卵母细胞在体外培养成熟，通过显微操作除去细胞核，然后用_____________法与供体细胞构成重组胚。