1 . “中中”和“华华”克隆猴的成功培育标志着我国非人灵长类疾病动物模型研究处于国际领先水平。“中中”和“华华”的克隆流程如图1所示，回答下列问题：

   

(1)图1中从卵巢中采集的细胞a需在体外培养至__________期才能用于体细胞核移植等；目前使用的去核方法除了显微操作去核法，还有梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等，与前者比较，后面的这些方法所具有的特点是___________________。
(2)图中取胎猴期而非成年期的体细胞的原因是____________________________。当贴壁细胞在体外培养过程中发生接触抑制现象时，需要对细胞进行_______培养。
(3)完成①过程后，要对母猴b进行___________。克隆猴的干细胞存在于早期胚胎、__________（写出1点）等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和____________等。
(4)科研人员发现：对灵长类动物供体细胞核进行表观遗传修饰，激活重构胚分化潜能调控基因A的表达，是克隆成功的关键。研究表明染色体组蛋白H₃动态可逆地被修饰酶所改变，从而调控基因A的表达，如图2所示。为了激活基因A的表达，研究人员将组蛋白H₃去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酸酶抑制剂TSA处理重构胚。

   

据图2分析，TSA可以抑制__________的活性，__________（填“提高”或“降低”）组蛋白的乙酰化水平，进而促进基因A的表达；给重构胚注入Kdm4d的mRNA来促进基因A表达的机理是__________。

2 . 广西陆川猪肉质香味纯正、皮薄肉嫩、入口香脆、风味优良，备受消费者喜爱。然而，由于陆川猪生长速度慢，几临濒危，急需进行种质资源保护。体细胞核移植技术因具有继承亲本完整性状、实验周期短、保种效力强的优点而备受关注。如图表示培育克隆猪的流程。下列叙述错误的是（       ）

A．陆川猪卵母细胞去核前，需将其在体外培养至MⅡ期

B．过程①可用电刺激或Ca2＋载体法激活重构胚，重构胚具有发育成完整个体的潜力

C．幼仔猪细胞核遗传物质来自陆川猪，细胞质遗传物质来自甲猪

D．过程②需将重构胚培养至桑葚胚或囊胚期再植入同期发情处理的代孕乙猪子宫

3 . 2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（       ）

   

A．捐献者在提取卵母细胞前通常需要进行超数排卵处理

B．该技术有效避免了母亲的线粒体遗传病基因传递给后代

C．重组卵母细胞需培养至MⅡ期的原因是该时期才具备受精能力

D．“三亲婴儿”同时拥有父母的全部核基因和捐献者的细胞质基因

4 . 应用体细胞核移植，我国科学家已经成功克隆了高产荷斯坦奶牛，其技术过程是：将一个 供体细胞的细胞核移入一个去核的卵母细胞中，并使该重组细胞发育为新胚胎，进而发育 成动物个体。下列相关叙述，正确的是（       ）

A．供体细胞是二倍体，且应处于分裂间期

B．克隆得到的高产荷斯坦奶牛与供体动物完全相同

C．供体细胞必须处于分裂期，从而使重组细胞快速分裂

D．采集得的卵母细胞，须体外培养到减数分裂Ⅰ中期，才进行去核

5 . 体细胞克隆猴“中中”和“华华”的成功培育标志着我国非人灵长类疾病动物模型的研究处于国际领先水平。下图是该项技术的流程图，请据图回答问题：

   

注：①Kdm4d:组蛋白去甲基化酶②TSA:组蛋白脱乙酰酶抑制剂

(1)从母猴卵巢采集到的卵母细胞需在体外培养至____________期后，通常通过____________处理进行“去核”操作。
(2)胚胎移植前，还需对代孕母猴进行____________处理，以保证胚胎能够继续发育。胚胎移植的意义在于其可以大大缩短供体本身的繁殖周期，充分发挥____________。
(3)科学家曾成功培育出胚胎细胞克隆猴，但“中中”和“华华”的出生仍然轰动世界，这是因为体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，其原因是____________。
(4)体细胞克隆猴的技术难点之一是胚胎发育率低。研究人员用Kdm4d的mRNA和TSA激活重构胚。据图分析，这两种物质都是通过____________提高胚胎的发育率。

6 . “中中”和“华华”是两只在我国出生的克隆猕猴，它们也是国际上首例利用体细胞克隆技术获得的非人灵长类动物。如图表示培育“中中”和“华华”的流程，下列相关叙述错误的是（       ）

   

A．重构胚须用灭活的病毒诱导才能产生

B．C猴为“中中”和“华华”提供遗传物质

C．早期胚胎移植的时间越早越容易成活

D．该项技术可以用于拯救一些濒危动物

7 . “中中"和“华华”是我国科学家培育出的世界首例体细胞克隆猴，培育过程如下图所示。下列有关分析正确的是（　　）
   

A．“中中”和“华华”的特征与B猴几乎相同

B．体细胞克隆形成新个体说明细胞具有全能性

C．重组细胞中核的融合依赖于生物膜的流动性

D．克隆猴形成过程中存在细胞分裂、分化与衰老

8 . 抗凝血酶Ⅲ蛋白是一种人体血浆蛋白，临床上作为药物主要用于血液性疾病的治疗。下图为培育转基因绵羊生产抗凝血酶Ⅲ蛋白药物的流程图。请回答：

(1)在过程①构建的基因表达载体中，为实现抗凝血酶Ⅲ基因能在转基因绵羊的乳腺细胞中表达，应让该基因与___________的启动子等调控组件结合在一起，转基因绵羊进入泌乳期后，可以通过分泌的乳汁来生产抗凝血酶Ⅲ蛋白。过程④中采用的最为有效的技术是__________。
(2)过程⑤涉及到的动物细胞工程技术是___________，应选处于___________期的卵母细胞作为受体细胞。且对受体细胞作去核处理，目的是__________。
(3)过程⑥早期胚胎培养过程中，培养液成分除了无机盐和有机盐、微生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加____________。过程⑦移植后的胚胎在受体子宫存活的生理学基础是__________。

9 . 科学家使用年轻女性捐献的卵细胞以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞，成功克隆出了5个人体胚胎，进而可以开发出有研究价值的干细胞。回答下列问题：
(1)在对动物细胞进行培养时，所需的气体主要有O₂和CO₂，CO₂的作用是___________。
(2)胚胎干细胞是由___________中分离出来的一类细胞，其在形态上的特点是___________，在功能上具有___________。
(3)若要进行胚胎分割移植，应选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割，注意必须要对内细胞团做到___________，其原因是___________。
(4)细胞核移植技术是将患者体细胞的细胞核植入去核的卵细胞后再进行培养，而不是直接用体细胞进行细胞培养，原因是___________。

10 . 先天性免疫缺陷的Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟淋巴细胞，经常被用作干细胞移植的实验动物。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图所示（图中数字序号表示相关过程）。请据图回答：

(1)过程①：将培养后的上皮细胞注入去核的卵母细胞中，该卵母细胞应处于__________时期，去除卵母细胞细胞核的目的是__________。
(2)过程②：利用的技术是__________，当重组胚胎培养到囊胚期时，可从其___________分离出ES细胞。
(3)过程③：应获取目的基因___________，并利用__________（填写某种工具酶）与运载体结合形成重组基因，将重组基因导入ES细胞的方法通常是__________。
(4)Rag2基因可指导合成Rag2蛋白。为了检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用__________进行杂交实验。