1 . 下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述错误的是（       ）

   

A．过程①细胞培养液中通常需要添加血清等物质

B．过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理

C．过程③后，胚胎分割获得同卵双胎属于无性繁殖

D．过程④胚胎移植前，需对代孕牛进行选择和处理

2 . 我国科学家培养克隆猴过程中，为了调节相关基因的表达，提高胚胎的发育率和妊娠率，将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理了它。培育克隆猴的流程如下图所示，下列相关叙述错误的是（       ）

A．为了获得更多的卵母细胞，需用促性腺激素对母猴进行处理

B．细胞融合前用灭活的病毒进行了短暂处理，诱导细胞融合

C．Kdm4d降低组蛋白甲基化水平，TSA降低组蛋白乙酰化水平

D．刺激重构胚发育到囊胚阶段可以胚胎移植入代孕母猴体内

3 . 2017年11月27日，世界上首个体细胞克隆猴“中中”在中国科学院神经科学研究所（上海）、脑科学与智能技术卓越创新中心的非人灵长类平台诞生。下列关于该技术的叙述，错误的是（       ）

A．供体细胞在移植前需要经过动物细胞培养

B．MII期的卵母细胞可以从输卵管中冲取

C．重组细胞与受精卵相似，形成后立即开始有丝分裂

D．应将重构胚移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内

4 . 我国科学家经过努力，攻克了用核移植方法克隆猴的各项难关，比如在10s内完成对次级卵母细胞的去核操作，利用组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA和组蛋白去乙酰化酶抑制剂（TSA）来促进重构胚的相关基因表达，提高胚胎的发育率等。核心步骤如图所示，下列相关叙述正确的是（       ）

A．次级卵母细胞去核操作过程中保持核膜的完整性是实现快速去核的保证

B．染色体中组蛋白发生甲基化和去乙酰化分子修饰后将有利于核基因的表达

C．重构胚一般需要在无菌、无毒的环境条件下培养至原肠胚阶段进行胚胎移植

D．利用胚胎分割技术获得胚胎和利用核移植技术获得重构胚，都属于无性繁殖

5 . 人溶菌酶能分解细菌的细胞壁，是抗生素的替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，期望从其乳汁中提取人溶菌酶，过程如图所示，其中①～⑨表示过程。质粒S上的基因Leu能控制合成亮氨酸（山羊的必需氨基酸），基因GFP能控制合成绿色荧光蛋白。四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。回答下列问题：

限制酶	BamHI	BglⅡ	HindⅢ	XbaI
识别序列和切割位点	G↓GATCC	A↓GATCT	A↓AGCTT	T↓CTAGA

(1)过程①利用PCR技术扩增人溶菌酶基因时，对引物序列的要求是__________（答出两点）。过程②使用的限制酶是__________。
(2)转基因羊的饮食中没有亮氨酸也不影响体内相关蛋白质的合成，原因是__________。
(3)过程⑥所用的卵母细胞一般处于__________期。过程⑦将细胞核植入去核卵母细胞后，用物理或化学方法激活受体细胞的目的是__________。过程⑨中，可通过对图中早期胚胎进行__________来增加转基因羊数量。
(4)图中获得转基因羊的繁殖方式是__________（“有性繁殖”或“无性繁殖”），判断的理由是__________。

6 . 为拯救濒危野化单峰骆驼，科研人员利用现代生物技术尝试进行人工培育，流程如下图。相关叙述正确的是（       ）

A．过程①中常用促性腺激素处理B．以便获得更多的卵母细胞

B．过程②中卵细胞膜和透明带先后发生生理反应阻止多精入卵

C．过程③应选用MI期的卵母细胞，过程④移植的应为原肠胚

D．与F后代相比，E常表现出发育困难和免疫失调等生理缺陷

7 . 为加速转基因奶牛的繁育，科学家通过转基因技术将人的生长激素基因导入奶牛体细胞，通过核移植技术和早期胚胎培养技术对此转基因奶牛进行克隆生产，过程如图所示。回答下列问题：

   

(1)现在，常用PCR特异性地快速扩增目的基因， PCR 反应需要提供DNA模板， 2种引物，4种脱氧核苷酸和________酶，该酶活性需要________激活。扩增的过程是：变性→复性→延伸， 即将4种脱氧核苷酸依次加到引物的________端， 如此重复循环多次。
(2)在基因表达载体构建过程中需将目的基因插入到载体的________之间，标记基因的作用是________。
(3)在对含有人生长激素基因的奶牛体细胞进行培养时，细胞增殖的方式是________。奶牛体细胞增殖表现出细胞贴壁的特点，传代培养时需要多次用________酶处理。
(4)形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞。将重组细胞培养成的重构胚移入受体母牛后，该母牛生出的犊牛并不是100%对供体的复制，原因是___________。对该奶牛进行克隆的原理是___________。

8 . 2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请，其培育过程可选用如下技术路线。据图分析下列叙述错误的是（       ）

   

A．捐献者在提取卵母细胞前通常需要进行超数排卵处理

B．该技术有效避免了母亲的线粒体遗传病基因传递给后代

C．重组卵母细胞需培养至MⅡ期的原因是该时期才具备受精能力

D．“三亲婴儿”同时拥有父母的全部核基因和捐献者的细胞质基因

9 . 英国首批体内含有三人DNA信息的三亲婴儿已经诞生。三亲婴儿的培育技术过程如图所示。下列叙述错误的是（       ）

A．给捐献者卵母细胞去除细胞核可以采用显微操作去核技术

B．培育三亲婴儿是为了避免母亲的线粒体遗传病遗传给孩子

C．父亲携带的白化病基因的遗传不受三亲婴儿培养技术的影响

D．三亲婴儿的培育利用了核移植技术，属于无性生殖

10 . 我国首次利用体细胞核移植技术成功克隆了非人灵长类动物“中中”和“华华”，在世界范围内引起关注。下列关于动物细胞核移植技术的叙述正确的是（       ）

A．动物细胞核移植包括体细胞核移植技术和胚胎细胞核移植技术，且前者难度小于后者

B．接受体细胞核前，卵母细胞需先通过显微操作去除细胞核，再培养至减数分裂Ⅱ中期

C．克隆猴的培育是动物细胞工程和胚胎工程多项技术的结合，全程是在细胞水平上操作

D．克隆猴培育成功，说明卵母细胞细胞质中某些物质可促使体细胞细胞核表现出全能性