在传染病的治疗中,抗体发挥着越来越重要的作用,下图表示利用现代生物科技手段生产抗体的两种途径,据图回答下列问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2020/6/1/2475319409164288/2475325295869952/STEM/f3df5a4a-71f7-4d95-a16c-75bad2576818.png)
(1)图1和图2所示过程中,都必须用到的动物细胞工程技术是____________ 。用PCR技术扩增无限增殖基因除需要原料、能量、模板外还需要____________ 和____________ 。
(2)图1中②过程与植物原生质体融合的不同之处是还可用____________ 诱导,图2中B所示的细胞特点是____________ 。
(3)培养杂交瘤细胞时应保证被培养的细胞处于____________ 的环境。抗体在抵抗外来病原体入侵方面具有十分重要的作用,这体现了免疫系统的____________ 功能。
(4)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是____________ 。
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(1)图1和图2所示过程中,都必须用到的动物细胞工程技术是
(2)图1中②过程与植物原生质体融合的不同之处是还可用
(3)培养杂交瘤细胞时应保证被培养的细胞处于
(4)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,其最大的优越性是
更新时间:2020-06-01 16:05:07
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【推荐1】人乳头瘤病毒(HPV)是引发机体患宫颈癌的主要病原体之一,江苏已正式启动2023年度适龄女生HPV疫苗免费接种工作,年内将为全省24万名初一女生接种二价HPV疫苗。如图表示首次注射HPV疫苗引起机体发生免疫反应的过程示意图,请回答下列问题:
(1)HPV可感染宿主黏膜和皮肤上皮细胞并在其中增殖,皮肤和黏膜对多种病原体的防御作用属于______ 免疫,HPV疫苗在免疫学上被称作______ 。
(2)图中②是______ 细胞,物质A是______ ,可以促进③______ 细胞的分裂、分化过程,⑤是______ 细胞,其功能是______ ,可由______ 分化而来。
(3)HPV感染者因免疫系统的______ 功能下降,宫颈癌发病风险增大,所以鼓励适龄女生接种HPV疫苗。HPV疫苗一般需要在半年内接种三次,二次接种时总抗体量快速上升,这与______ (填名称)细胞的细胞周期缩短有关。
(4)人体免疫系统在某些特殊情况下,自身免疫反应对组织和器官造成损伤并出现症状,称为______ ;人体的免疫功能也会低下甚至丧失,如艾滋病,因为HIV病毒主要侵染图中细胞______ (填序号)。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2023/11/26/f05c8fbd-c634-4384-ad4e-f6134fc26a21.png?resizew=336)
(1)HPV可感染宿主黏膜和皮肤上皮细胞并在其中增殖,皮肤和黏膜对多种病原体的防御作用属于
(2)图中②是
(3)HPV感染者因免疫系统的
(4)人体免疫系统在某些特殊情况下,自身免疫反应对组织和器官造成损伤并出现症状,称为
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【推荐2】HIV属于逆转录病毒,是艾滋病的病原体。回答下列问题:
(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的_____ ,以其作为模板,在_____ 的作用下合成_____ 。获取该目的蛋白的基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。
(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是_____ 。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV,检测的原理是_____ 。
(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分_____ 细胞,降低了患者免疫系统的防卫功能。
(4)人的免疫系统有_____ 癌细胞的功能,艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。
(5)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染,破坏吞噬细胞等,使其不能暴露该病毒的_____ ,以致感染信息不能呈递给T细胞,从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程,导致机体对该病毒的_____ 免疫功能下降。因此,病毒在体内快速增殖、致病。
(6)对志愿者接种埃博拉试验疫苗后,机体免疫系统能产生相应抗体,还能产生的免疫细胞有_____ 。(需答两种)
(1)用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时,可先提取HIV中的
(2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是
(3)已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分
(4)人的免疫系统有
(5)研究表明,埃博拉病毒侵入机体后,通过靶向感染,破坏吞噬细胞等,使其不能暴露该病毒的
(6)对志愿者接种埃博拉试验疫苗后,机体免疫系统能产生相应抗体,还能产生的免疫细胞有
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【推荐3】图为人手指意外触到蜡烛火焰,引起屈肘反射的反射弧示意图,请据图回答问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/6/5/2219193357803520/2224160979746816/STEM/6eac9e3092bb4e53a76467ab62cad528.png?resizew=198)
(1)图中神经元a产生的兴奋在传入神经纤维上以_______ 的形式进行传导。当兴奋传到神经末梢时,引起突触前膜释放__________ ,该物质与神经元b细胞膜上________ 结合,使神经元b兴奋,进而引起神经元c兴奋,最终导致屈肌收缩。
(2)图中M点兴奋时,此处神经纤维膜外电位变化为_________ 。若N点受刺激产生兴奋,则在神经元b上无膜电位的变化,其原因是________________________ ,当伤害性刺激产生的信号传到__________ 会形成痛觉。
(3)手指意外触到火焰引起局部皮肤红肿,是因为皮肤毛细血管舒张和通透性增强,使血浆中的____________ 渗出,引起组织间隙液体积聚。若手指伤口感染,可引起体液中吞噬细胞和杀菌物质抵御病菌侵害,此过程属于___________ 免疫。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2019/6/5/2219193357803520/2224160979746816/STEM/6eac9e3092bb4e53a76467ab62cad528.png?resizew=198)
(1)图中神经元a产生的兴奋在传入神经纤维上以
(2)图中M点兴奋时,此处神经纤维膜外电位变化为
(3)手指意外触到火焰引起局部皮肤红肿,是因为皮肤毛细血管舒张和通透性增强,使血浆中的
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【推荐1】生活中常遇到这样的现象:切开的苹果、久存的荔枝等表面会变色,原因是植物细胞中的多酚氧化酶(PPO)催化多酚类底物(无色)生成了褐色物质,此过程称为褐变,不仅会影响外观,还会导致营养损失。请回答下列问题:
(1)自然状态下果蔬并没有发生褐变,是因为细胞内具有______ 系统,使多酚氧化酶与酚类底物分别储存在细胞的不同结构中而不能相遇。
(2)研究发现pH和温度都是影响PPO活性的重要因素,且具有叠加效应,荔枝果皮褐变作用机理如图一。一些商贩对荔枝用二氧化硫处理后冷藏,贮藏期可长达40-50天左右。推测其原理是:________________________ 。
(3)熏硫处理的水果存在食品安全隐患,科学家已利用基因工程技术得到了耐褐变转基因苹果,耐褐变机制如图二。要想获得该目的基因,可从苹果细胞中提取总RNA,以其中的mRNA为模板,经________________________ 合成DNA(即cDNA)。通过PCR技术可在cDNA分子中专一性扩增出目的基因,其原因是________________________ 。
(4)培养耐褐变转基因苹果过程中,下列导入目的基因的方法,可行的是______ 。
A.将耐褐变蛋白注射到苹果受精卵中
B.将苹果花序直接浸没在目的基因溶液中一段时间
C.将目的基因的DNA序列与质粒重组后导入农杆菌,并侵染苹果叶肉细胞
D.将含目的基因的DNA溶液直接注入苹果子房中
(5)研究人员利用了图二的RNA沉默技术。沉默机制是使目的基因的表达序列和多酚氧化酶基因的表达序列必须是______ 的,且要同时在同一细胞内表达,从而阻断苹果细胞内多酚氧化酶基因的______ 过程(数字),降低多酚氧化酶基因的表达水平。欲探究RNA沉默干扰是否成功,可检测苹果细胞中______ 或将苹果切开暴露在空气中观察是否褐变。
(1)自然状态下果蔬并没有发生褐变,是因为细胞内具有
(2)研究发现pH和温度都是影响PPO活性的重要因素,且具有叠加效应,荔枝果皮褐变作用机理如图一。一些商贩对荔枝用二氧化硫处理后冷藏,贮藏期可长达40-50天左右。推测其原理是:
(3)熏硫处理的水果存在食品安全隐患,科学家已利用基因工程技术得到了耐褐变转基因苹果,耐褐变机制如图二。要想获得该目的基因,可从苹果细胞中提取总RNA,以其中的mRNA为模板,经
图一
图二
(4)培养耐褐变转基因苹果过程中,下列导入目的基因的方法,可行的是
A.将耐褐变蛋白注射到苹果受精卵中
B.将苹果花序直接浸没在目的基因溶液中一段时间
C.将目的基因的DNA序列与质粒重组后导入农杆菌,并侵染苹果叶肉细胞
D.将含目的基因的DNA溶液直接注入苹果子房中
(5)研究人员利用了图二的RNA沉默技术。沉默机制是使目的基因的表达序列和多酚氧化酶基因的表达序列必须是
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【推荐2】红豆杉被称作“植物界的大熊猫”,紫杉醇具有高抗癌活性。生产紫杉醇的传统方法是从红豆杉的树皮和树叶中提取,但野生红豆杉是濒危植物,此方法不利于对它们的保护。根据材料回答下列问题:
(1)为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量,研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt基因)的超表达载体,并将其导入红豆杉细胞,其具体流程如下:_____ (从A、B、C、D四种引物中选择)。上述过程中,用1个图1所示片段至少要经过_____ 次循环,可获得与Bapt基因等长的DNA单链。
②构建Bapt基因的超表达载体并将其导入受体细胞;在超量表达Bapt基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点(注:图中所示限制酶切割后形成的黏性末端各不相同)如图2所示。为使DNA片段能定向插入T-DNA中,可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列,M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是_____ 。
③Bapt基因的检测和鉴定。将受体细胞经农杆菌液浸泡,Bapt基因会随T-DNA整合到受体细胞染色体上,继而进行植物细胞组织培养,培养基中加入_____ 进行筛选。
(2)PCR技术可用于目的基因的扩增,为确保准确性,在设计PCR引物时必须注意:用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸,过短会导致特异性差,过长则会使反应体系有关步骤温度提高,从而超过_____ 的最适温度;引物3'端的碱基最佳选择是_____ (填“G和C”或“A和T”),这样形成的碱基配对比较稳定,引物的“_____ ”端(用5或3'作答),可以被修饰,如附加限制酶位点等;连续扩增4次后需要引物至少_____ 个。扩增完成以后,常采用_____ 法来鉴定PCR的产物
(1)为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量,研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt基因)的超表达载体,并将其导入红豆杉细胞,其具体流程如下:
②构建Bapt基因的超表达载体并将其导入受体细胞;在超量表达Bapt基因载体的构建中,所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点(注:图中所示限制酶切割后形成的黏性末端各不相同)如图2所示。为使DNA片段能定向插入T-DNA中,可用PCR技术在DNA片段的两端添加限制酶识别序列,M、N端添加的序列所对应的限制酶分别是
③Bapt基因的检测和鉴定。将受体细胞经农杆菌液浸泡,Bapt基因会随T-DNA整合到受体细胞染色体上,继而进行植物细胞组织培养,培养基中加入
(2)PCR技术可用于目的基因的扩增,为确保准确性,在设计PCR引物时必须注意:用于PCR的引物长度通常为20~30个核苷酸,过短会导致特异性差,过长则会使反应体系有关步骤温度提高,从而超过
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【推荐3】人参是一种名贵药材,具有良好的滋补作用。口服α干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程,①~④表示相关的操作,EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶,它们的识别序列及切割位点如下表所示。请回答:______ 。科研人员还需在两种引物的一端分别加上相应的碱基序列,以便于后续基因的剪切和连接,这两种碱基序列分别是________ 和______ 。
(2)过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有_______ ,基因表达载体中的启动子的作用是_____ ,标记基因的作用是_______ 。
(3)过程③中需先用________ 处理根瘤农杆菌,可使根瘤农杆菌处于_______ 的状态,以便将基因表达载体导入细胞。
(4)过程④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过______ 过程获得DNA,再进行PCR扩增,若最终未能检测出干扰素基因,可能原因有________ 。
(2)过程②所构建的基因表达载体中未标注出的必需元件还有
(3)过程③中需先用
(4)过程④中,科研人员提取愈伤组织细胞的RNA后,先通过
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解题方法
【推荐1】H18杂交瘤细胞产生的抗人肝癌单克隆抗体HAb18对于人体肝癌的靶向治疗具有重要的意义,但H18杂交瘤细胞在培养过程中的凋亡现象制约着细胞的高密度培养以及生产能力的提高。通过基因工程可改造H18杂交瘤细胞的抗凋亡能力,相关研究步骤如下:
①细胞培养:将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养。一段时间后,用胰蛋白酶处理培养液,漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个·mL-1。
②免疫小鼠:向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,共3次,最后一次免疫后3天,取脾脏制成细胞悬液备用。
③细胞融合及筛选:将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEG作用下进行融合,筛选出能产生抗人肝癌单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞。
④改造H18杂交瘤细胞:利用PCR技术获得小鼠的bcl-XL基因(抗凋亡基因),构建表达载体,通过脂质体法导入H18杂交瘤细胞,再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞。
请分析回答:
(1)步骤①肝癌细胞培养液中加入小牛血清的目的是__________ ,培养液中还需加入一定量抗生素的目的是______________________ 。
(2)步骤②中,肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是______________ 。
(3)步骤③中,除了用50%PEG促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是______________ 。步骤④中通过脂质体法将表达载体导入H18杂交瘤细胞的原理是___________________ 。
(4)与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是____________________________ 。
(5)乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型,科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交瘤细胞凋亡,其结果如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/6/6/6582b52c-8d20-4f48-80a0-f5bde1c08d48.png?resizew=374)
抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的条件是___________________ 。
①细胞培养:将人肝癌细胞在含10%小牛血清的培养液中培养。一段时间后,用胰蛋白酶处理培养液,漂洗后调整细胞悬液浓度为1×107个·mL-1。
②免疫小鼠:向小鼠体内注射肝癌细胞悬液0.8mL,以后每隔2周免疫1次,共3次,最后一次免疫后3天,取脾脏制成细胞悬液备用。
③细胞融合及筛选:将脾脏细胞悬液和骨髓瘤细胞悬液在50%PEG作用下进行融合,筛选出能产生抗人肝癌单克隆抗体HAb18的H18杂交瘤细胞。
④改造H18杂交瘤细胞:利用PCR技术获得小鼠的bcl-XL基因(抗凋亡基因),构建表达载体,通过脂质体法导入H18杂交瘤细胞,再筛选出抗凋亡能力明显提高的H18杂交瘤细胞。
请分析回答:
(1)步骤①肝癌细胞培养液中加入小牛血清的目的是
(2)步骤②中,肝癌细胞免疫小鼠需在一定时间内间隔注射3次,其目的是
(3)步骤③中,除了用50%PEG促进细胞融合外,常用的生物诱导因素是
(4)与普通抗肝癌药物相比,用抗人肝癌单克隆抗体HAb18与相应抗癌药物结合制成的“生物导弹”治疗肝癌的主要优点是
(5)乙醇有诱导细胞凋亡的作用。为了建立H18杂交瘤细胞凋亡检测模型,科研人员利用不同浓度的乙醇溶液诱导H18杂交瘤细胞凋亡,其结果如图所示。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/editorImg/2024/6/6/6582b52c-8d20-4f48-80a0-f5bde1c08d48.png?resizew=374)
抗凋亡细胞株的建立与筛选应选择的条件是
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【推荐2】奶牛乳腺系统中血清淀粉样蛋白A3(M-SAA3)是主要的乳腺炎急性期蛋白之一,其含量与乳腺炎的严重程度呈正相关,生产上经常用M-SAA3抗体检测奶牛乳腺炎早期发病情况,以减少经济损失。下图是抗M-SAA3单克隆抗体的制备流程示意图,请据图回答下列问题:___________ 端分别加入图中所示__________ 酶切位点,然后进行PCR扩增。将扩增后的目的基因与质粒经限制酶酶切后进行连接,获得重组质粒。
(2)②过程将重组质粒导入大肠杆菌的方法是___________ ,之后接种于添加卡那霉素的___________ 培养基上(填培养基的功能分类)。将获得的菌体经过冰浴超声破碎等一系列纯化步骤后获得的物质B是___________ ,用B作为抗原免疫小鼠,每隔14天重复免疫一次,共4次,目的是___________ 。
(3)经筛选获得的杂交瘤细胞之后还需进行③___________ 过程,经过多次筛选,就可获得足够数量的C细胞。
(4)为进一步研究④过程获得的单克隆抗体的性能,科研人员将获得的7株单克隆抗体分别与天然M-SAA3低值(低浓度)和高值(高浓度)样本利用___________ 技术进行检测,检测结果显示在低值样本中出现了较浅的杂交带,而在高值样本中出现了较深的杂交带,体现了该抗体具有___________ 特点。
(2)②过程将重组质粒导入大肠杆菌的方法是
(3)经筛选获得的杂交瘤细胞之后还需进行③
(4)为进一步研究④过程获得的单克隆抗体的性能,科研人员将获得的7株单克隆抗体分别与天然M-SAA3低值(低浓度)和高值(高浓度)样本利用
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【推荐3】癌胚抗原(CEA)是某些癌细胞表面产生的一种糖蛋白,临床上通过制备CEA的单克隆抗体来诊断癌症,回答下列问随。
(1)制备CEA的单克隆抗体时,首先将___________ 注入小鼠体内,使小鼠产生免疫反应。然后从产生免疫反应小鼠的脾脏中获取___________________ 细胞(染色体数目 40 条),将其与骨髓瘤细胞(染色体数目 60 条)融合。因为融合率不是100%,且融合过程具有随机性,所以要对融合后的细胞进行筛选。筛选出的杂交细胞还要经过多次筛选,最终获得_______________________________ 的杂交瘤细胞。获得的杂交瘤细胞中有______ 个细胞核,染色体数目最多是________ 条。
(2)获得杂交瘤细胞后,将其注射到小鼠膜腔内增殖或_____________________ 之后从中提取大量CEA抗体。CEA单克隆抗体与抗癌药物偶联后,可以使抗瘤药物定向作用于癌细胞,该过程所利用的免疫学原理为________________________ 。
(1)制备CEA的单克隆抗体时,首先将
(2)获得杂交瘤细胞后,将其注射到小鼠膜腔内增殖或
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【推荐1】自然界中有一种含有叶绿体的原生动物——眼虫,这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题:“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?”他尝试设计出如图所示的实验方案。结合实验方案回答问题:
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/16/1946531194429440/1947753276235776/STEM/723c04b4273e41a89a2271c57ff4a299.png?resizew=343)
实验原理:根据眼虫的特点,动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下:
(1)①中选的植物材料细胞中,必须有的细胞器是_________________ 。
(2)③过程所用的酶是_____________ 。
(3)④过程除了用电激之外,还可以用___________ 等作为诱导因素。(答出两种)
(4)⑤过程中动物细胞体外培养需要满足的条件是________ 、________ 、____________ 。
(5)在整个实验过程中,要强调所用的器械的灭菌和无菌操作,原因是各种杂菌可以在培养基上迅速生长,培养基一旦被污染,迅速生长的各种杂菌不但会和__________ 争夺营养,而且这些杂菌生长的过程中会产生大量________ 导致培养物迅速死亡。
(6)在⑤⑥过程中,通常要添加血清,原因是______________ 。
![](https://img.xkw.com/dksih/QBM/2018/5/16/1946531194429440/1947753276235776/STEM/723c04b4273e41a89a2271c57ff4a299.png?resizew=343)
实验原理:根据眼虫的特点,动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。实验步骤如下:
(1)①中选的植物材料细胞中,必须有的细胞器是
(2)③过程所用的酶是
(3)④过程除了用电激之外,还可以用
(4)⑤过程中动物细胞体外培养需要满足的条件是
(5)在整个实验过程中,要强调所用的器械的灭菌和无菌操作,原因是各种杂菌可以在培养基上迅速生长,培养基一旦被污染,迅速生长的各种杂菌不但会和
(6)在⑤⑥过程中,通常要添加血清,原因是
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【推荐2】2018年1月25日,我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA,经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴,流程如图所示,①~⑥表示过程,该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。请分析回答:________ ,恢复其全能性较难。
(2)进行过程①时,细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有________ 。在进行细胞原代培养时会出现细胞贴壁生长和________ 现象。
(3)为获得数量较多的卵母细胞,采集前应先用________ 激素处理母猴,从卵巢采集到的卵母细胞经成熟培养后进行去核处理,在对卵母细胞去核时,还应同时去除透明带内的________ (细胞)。
(4)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前,用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中,灭活的仙台病毒所起的作用是________ 。
(5)在进行过程⑤之前,应对代孕猴和供卵母细胞的猴做____________ 处理,使供、受体生殖器官的生理变化相同,为供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境,受体子宫对移入的胚胎基本不发生________ 反应,为胚胎在受体内存活提供了可能。
(6)假如用胚胎分割移植的方式来克隆食蟹猴,胚胎分割囊胚时应注意的问题是________________ 。
(7)研究人员在确定去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的作用时,做了两组实验,其中A组用正常培养液培养融合细胞,B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞,实验结果如下图所示。分析实验数据可知,Kd4d的mRNA的作用是____________ 。
(2)进行过程①时,细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有
(3)为获得数量较多的卵母细胞,采集前应先用
(4)研究人员在将胎猴的体细胞注入去核卵母细胞前,用灭活的仙台病毒进行了短暂处理。在此过程中,灭活的仙台病毒所起的作用是
(5)在进行过程⑤之前,应对代孕猴和供卵母细胞的猴做
(6)假如用胚胎分割移植的方式来克隆食蟹猴,胚胎分割囊胚时应注意的问题是
(7)研究人员在确定去甲基化酶(Kd4d)的mRNA的作用时,做了两组实验,其中A组用正常培养液培养融合细胞,B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞,实验结果如下图所示。分析实验数据可知,Kd4d的mRNA的作用是
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【推荐3】自1996年世界上第一只体细胞克隆羊多莉诞生以来,人类已经成功克隆了马、牛和猪等大型家畜,但体细胞克隆灵长类动物一直没有取得进展,究其原因主要是灵长类动物的卵细胞极为敏感,极轻微挤压都可能导致异常分裂,且细胞核移植到去核卵细胞后不能完全恢复到分化前的功能状态,导致胚胎发育率低。2017年,我国科学家利用“聪明的化学方法和操作技巧”成功培育出了体细胞克隆猴“中中”和“华华”,该成果一经公布轰动了全世界。下图所示为克隆猴的培育过程。
(1)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植,原因是__________ 。
(2)我国科学家经过多年的反复试验,可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作,在15秒之内完成核移植,操作迅速使卵细胞受损极小,在技巧上保证了实验的成功。实际操作中,去核是指去除__________ ;核移植时将供体细胞注入__________ ,通过电融合法使两细胞融合,供体核进入卵母细胞,形成重构胚;
(3)“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重构胚,同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂(TSA)处理重构胚,提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用机理分别是__________ 、__________ ,从而改变组蛋白的表观遗传修饰来调控基因表达。Kdm4d和TSA处理前后基因的碱基序列__________ (填“会”或“不会”)发生改变。
(4)除操作技巧和化学方法的运用外,克隆猴的成功也得益于每一步严谨科学的实验操作。体外培养重构胚时,培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外,通常需要加入__________ 等一些天然成分,将其置于含有__________ 混合气体的CO2培养箱中培养。
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(1)动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植,原因是
(2)我国科学家经过多年的反复试验,可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作,在15秒之内完成核移植,操作迅速使卵细胞受损极小,在技巧上保证了实验的成功。实际操作中,去核是指去除
(3)“聪明的化学方法”也是保证实验成功的条件。我国科学家将组蛋白去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA注入重构胚,同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂(TSA)处理重构胚,提高了胚胎的发育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用机理分别是
(4)除操作技巧和化学方法的运用外,克隆猴的成功也得益于每一步严谨科学的实验操作。体外培养重构胚时,培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外,通常需要加入
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