肿瘤相关成纤维细胞(CAF)存在于各种实体肿瘤中,是肿瘤微环境建立的基础,对肿瘤发生、发展和转移起促进作用。树突状细胞(DC)一种抗原呈递细胞(下图)通过细胞融合制备了DC/CAF融合细胞疫苗,研究了靶向CAF的肿瘤免疫治疗。
(1)DC将抗原摄取、加工处理后,在其表面形成抗原-MHC复合物,复合物会与T细胞特异性结合,该过程体现了细胞膜具有_____________ 功能。在CD80/CD86等分子的共同作用下,激活T细胞,使其增殖分化形成效应T细胞,效应T细胞的功能是_____________ 。
(2)DC/CAF融合疫苗的制备:分别从癌组织和骨髓中分离CAF和DC诱导细胞融合后需要进行_____________ ,再将得到的DC/CAF融合细胞,加入到动物细胞培养液中培养,用于制备疫苗。培养环境中所需的主要气体包括细胞代谢必需的______________ 和维持培养液pH值的_____________ 。保持培养环境处于无菌无毒条件的操作包括_____________ (答出两点即可)。
(3)DC/CAF融合疫苗的检测
①检测DC/CAF融合细胞表面相关分子的表达量发现未活化的DC与CAF融合后表现出活化DC的特性,推测其原因是_____________ 。
②将DC/CAF融合细胞与T细胞共培养,以未融合细胞与T细胞共培养组为对照,一段时间后检测相关指标,结果表明融合细胞能更有效地活化T细胞。可供检测的指标是_____________ 等。(写出一项指标即可)
(1)DC将抗原摄取、加工处理后,在其表面形成抗原-MHC复合物,复合物会与T细胞特异性结合,该过程体现了细胞膜具有
(2)DC/CAF融合疫苗的制备:分别从癌组织和骨髓中分离CAF和DC诱导细胞融合后需要进行
(3)DC/CAF融合疫苗的检测
①检测DC/CAF融合细胞表面相关分子的表达量发现未活化的DC与CAF融合后表现出活化DC的特性,推测其原因是
②将DC/CAF融合细胞与T细胞共培养,以未融合细胞与T细胞共培养组为对照,一段时间后检测相关指标,结果表明融合细胞能更有效地活化T细胞。可供检测的指标是
更新时间:2021-05-03 16:35:31
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【推荐1】时至今日,新冠肺炎疫情仍在全球大流行,研究表明,新冠肺炎(COVID-2019)是由一种传染性极强的新型冠状病毒(2019-nCov,RNA病毒)引起的急性感染性肺炎。当新冠病毒侵入人体,机体会启动免疫反应对抗该病毒。下图为新冠病毒入侵人体引发的部分免疫反应(数字表示过程,字母表示细胞),请回答下列问题:
(1)2019-nCoV主要通过呼吸道侵入人体,鼻腔中的黏膜属于人体免疫系统的第_____ 道防线,可抵御部分病原体的侵袭。
(2)图示过程为_____ 免疫的基本过程。过程①是新冠病毒被_____ 等摄取处理并呈递在细胞表面的过程,细胞b是_____ 细胞。
(3)当新冠病毒侵入患者细胞时,仅靠图中过程不能清除,需要启动_____ 免疫。该免疫的效应阶段起作用的细胞是_____ ,该细胞由_____ 细胞分裂分化产生。
(4)科研工作者已成功研制预防新冠肺炎疫苗,从免疫学角度讲,接种疫苗属于_____ 。(选填“主动免疫”或“被动免疫”)。疫苗需要接种2~3次,其目的是_____ 。
(5)目前针对新冠肺炎没有特效药,注射疫苗是预防新型冠状病毒的最有效途径。除了注射疫苗外你还有什么建议_____ (答出两点即可)。
(1)2019-nCoV主要通过呼吸道侵入人体,鼻腔中的黏膜属于人体免疫系统的第
(2)图示过程为
(3)当新冠病毒侵入患者细胞时,仅靠图中过程不能清除,需要启动
(4)科研工作者已成功研制预防新冠肺炎疫苗,从免疫学角度讲,接种疫苗属于
(5)目前针对新冠肺炎没有特效药,注射疫苗是预防新型冠状病毒的最有效途径。除了注射疫苗外你还有什么建议
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【推荐2】2020年诺贝尔生理学或医学奖授予发现丙型肝炎病毒(HCV)的三位科学家。HCV为单股正链(+RNA)病毒,下图表示该病毒在宿主细胞内增殖的过程(①②③④表示过程)。+RNA既能作为翻译的模板,又能作为模板合成-RNA,再以-RNA为模板合成子代+RNA。
(1)丙肝病毒在机体内一旦与肝细胞表面受体结合,便会逐渐被细胞膜包裹并侵入细胞,丙肝病毒进入体细胞的方式是__________ ,该过程体现了细胞膜具有__________ 的结构特点。
(2)根据图中信息,写出丙肝病毒的遗传信息传递过程:__________ 。
(3)在宿主细胞中,可与+RNA发生碱基互补配对的核酸有__________ 和__________ 。
(4)目前。丙肝病毒常用的检测方法主要有核酸检测法和抗体检测法,两种检测方法的基本原理分别是_____ 和__________ 。
(5)在免疫系统的作用下,有的感染者会自愈,是因为人体往往先通过__________ 免疫来阻止病毒通过血液循环扩散,再通过__________ 免疫裂解靶细胞,最后达到清除病毒的目的。
(6)为了证明HCV的遗传物质是RNA,模仿蔡斯和赫尔希的实验,用放射性同位素标记法分别标记丙肝病毒的RNA和核衣壳蛋白质,却难以达到目的,原因是__________ 。
(1)丙肝病毒在机体内一旦与肝细胞表面受体结合,便会逐渐被细胞膜包裹并侵入细胞,丙肝病毒进入体细胞的方式是
(2)根据图中信息,写出丙肝病毒的遗传信息传递过程:
(3)在宿主细胞中,可与+RNA发生碱基互补配对的核酸有
(4)目前。丙肝病毒常用的检测方法主要有核酸检测法和抗体检测法,两种检测方法的基本原理分别是
(5)在免疫系统的作用下,有的感染者会自愈,是因为人体往往先通过
(6)为了证明HCV的遗传物质是RNA,模仿蔡斯和赫尔希的实验,用放射性同位素标记法分别标记丙肝病毒的RNA和核衣壳蛋白质,却难以达到目的,原因是
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【推荐3】嵌合抗原受体T 细胞 (CAR-T) 疗法使人类的抗癌史翻开了新的篇章。细胞在癌 变过程中产生了肿瘤抗原,其中一部分抗原与肿瘤细胞内的MHC 分子结合形成“抗原-MHC” 复 合体,并呈递在细胞表面才能被T 细胞识别。研究发现,肿瘤细胞可通过下调MHC 的表达来逃 避T 细胞的识别。为应对这种“免疫逃逸”,科研人员分离出患者的T 细胞,利用基因工程技 术为T 细胞装上特异性识别肿瘤抗原的嵌合抗原受体 (CAR), 体外扩增培养CAR-T 细胞,再输回患者体内,即可进行肿瘤免疫治疗。
(1)当体内出现肿瘤细胞时,可激发机体的免疫系统发挥_______ 功能,调动_____ ( 细胞名称)将其裂解。
(2)CAR-T 细胞疗法能克服肿瘤细胞通过下调MHC 分子表达导致的免疫逃逸,原因是_____ _;但肿瘤细胞的高突变性仍然能够改变少数细胞的肿瘤抗原从而实现免疫逃逸。
(3)近年来CAR-T 细胞疗法又取得新进展。新一代CAR(SUPRACAR) 分为两部分,一部分是在T 细胞上表达的“通用”受体,另一部分则是单独的“肿瘤”受体,可以同时辅以不同的肿瘤受体scFy。与传统CAR-T细胞相比,SUPRACAR-T细胞疗法在治疗癌症上的优势是_______
(4)CAR-T 细胞疗法还存在一些问题,如易引起细胞因子释放综合征 (CRS) 等。为抑制CRS 的发生,根据 SUPRACAR-T 细胞疗法的原理,提出在必要时降低T 细胞活性的思路_____ 。
(1)当体内出现肿瘤细胞时,可激发机体的免疫系统发挥
(2)CAR-T 细胞疗法能克服肿瘤细胞通过下调MHC 分子表达导致的免疫逃逸,原因是
(3)近年来CAR-T 细胞疗法又取得新进展。新一代CAR(SUPRACAR) 分为两部分,一部分是在T 细胞上表达的“通用”受体,另一部分则是单独的“肿瘤”受体,可以同时辅以不同的肿瘤受体scFy。与传统CAR-T细胞相比,SUPRACAR-T细胞疗法在治疗癌症上的优势是
(4)CAR-T 细胞疗法还存在一些问题,如易引起细胞因子释放综合征 (CRS) 等。为抑制CRS 的发生,根据 SUPRACAR-T 细胞疗法的原理,提出在必要时降低T 细胞活性的思路
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【推荐1】酿酒酵母大量应用于酿酒、人重组蛋白合成等领域,研究人员通过基因改造制备生产效率高、可适应工业发酵条件的酵母。
(1)在该实验中,分别采用了高压蒸汽、酒精、紫外线照射等几种不同的灭菌处理。这些方法依次可用于杀灭什么部位的杂菌________
A.接种环、手、培养基 B.培养皿、手、高压锅
C.手、超净工作台、微生物菌种 D.培养基、手、超净工作台
判断培养基灭菌是否彻底的方法为________ 。下图中________ 号试管为酵母菌在半固体培养基中培养后状态。
(2)酿酒酵母代谢类型是_______ 。在葡萄酒酿造过程中,葡萄也需要冲洗,其主要目的是_______________ 。
(3)研究人员经上述过程得到A菌株。
①将等量的野生型酵母菌和A菌株接种于等量的培养基中。经过一段时间的有氧发酵后,调整发酵条件至厌氧发酵,该过程需要调整发酵罐中的____ (填写选项前字母)。
a.温度 b.pH c.溶解氧 d.搅拌速度
②将野生型酵母菌和 A菌株分别接种于发酵条件相同的两个发酵罐中。发酵一段时间后,检测发酵罐中酵母菌的数量(图1)。结果表明,与野生型酵母菌相比,A菌株_______ 。
③木糖广泛分布于植物中,野生型酵母菌不能有效利用。将两种菌株分别接种在以木糖或葡萄糖为唯一碳源的培养基中,检测两种酵母菌数目,结果如图2所示。综合以上实验结果,在以植物源性营养物质为发酵底物的条件下,发酵后期(图1中阴影所示部分)野生型酵母菌数量显著下降而A菌株能够维持相对稳定的原因是______________ 。
(4)A菌株是否可用于酿酒的工业化生产?请说明理由________ 。
(1)在该实验中,分别采用了高压蒸汽、酒精、紫外线照射等几种不同的灭菌处理。这些方法依次可用于杀灭什么部位的杂菌
A.接种环、手、培养基 B.培养皿、手、高压锅
C.手、超净工作台、微生物菌种 D.培养基、手、超净工作台
判断培养基灭菌是否彻底的方法为
(2)酿酒酵母代谢类型是
(3)研究人员经上述过程得到A菌株。
①将等量的野生型酵母菌和A菌株接种于等量的培养基中。经过一段时间的有氧发酵后,调整发酵条件至厌氧发酵,该过程需要调整发酵罐中的
a.温度 b.pH c.溶解氧 d.搅拌速度
②将野生型酵母菌和 A菌株分别接种于发酵条件相同的两个发酵罐中。发酵一段时间后,检测发酵罐中酵母菌的数量(图1)。结果表明,与野生型酵母菌相比,A菌株
③木糖广泛分布于植物中,野生型酵母菌不能有效利用。将两种菌株分别接种在以木糖或葡萄糖为唯一碳源的培养基中,检测两种酵母菌数目,结果如图2所示。综合以上实验结果,在以植物源性营养物质为发酵底物的条件下,发酵后期(图1中阴影所示部分)野生型酵母菌数量显著下降而A菌株能够维持相对稳定的原因是
(4)A菌株是否可用于酿酒的工业化生产?请说明理由
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【推荐2】胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得,流程如下:
(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用______ 或___________ 法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是________________________________ 。
(2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供________ 和______ 。
(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和__________ 以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用______________ 方式加热以防止温度过高。
(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为______ 。
(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用
(2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供
(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和
(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为
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【推荐3】大肠杆菌是寄生于人和动物肠道中的细菌,其代谢产物能与染料伊红-亚甲蓝反应,便菌落呈深紫色。检测水样是否符合饮用水卫生标准时,常用滤膜法测定大肠杆菌的数目,流程如图所示:用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红-亚甲蓝培养基(EMB培养基)上培养→统计菌落数目。
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是_____ 。
(2)从功能上划分,EMB培养基属于_____ 培养基,为检测该培养基灭菌是否彻底,对于该培养基应采用的检测方法是_____ 。
(3)为检测严重污染的水体中大肠杆菌数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板中,应选择颜色为_____ 的菌落进行计数。
(4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可以测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样,一份待测水样来自变酸的果酒,从中检测到两种微生物,它们在结构上的主要区别是_____ 。另一份来自湖泊,若要通过测量蓝藻的数目来研究“水华”,则培养基配方中必须添加_____ (从“水”“无机盐”“碳源”“氮源”中选填)
(1)过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶,其中需要进行灭菌处理的是
(2)从功能上划分,EMB培养基属于
(3)为检测严重污染的水体中大肠杆菌数量,将水样适当稀释后,取样涂布在上述平板中,应选择颜色为
(4)该同学进一步思考,利用滤膜法也可以测定待测水样中其他微生物的数目。他取了两份水样,一份待测水样来自变酸的果酒,从中检测到两种微生物,它们在结构上的主要区别是
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【推荐1】EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程为:将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2、非EV71蛋白注射到小鼠体内,多次免疫后,取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如下图所示。(1)EV71免疫的小鼠血清抗体_______ (填“是”或“不是”)单一抗体,据图分析,判断依据是__________ 。
(2)制备抗EV71单克隆抗体时,选用________ 免疫的小鼠的B细胞效果最佳。
单克隆抗体的制备,流程图如下:(3)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得_______________ 。将其接种到96孔板,进行___________ 培养和____________ ,目的是获得_______________________ 。
(4)图中最终筛选出来的细胞,其特点是___________________________________ 。
(5)图中体外的扩大培养,是从________________ 中获取大量的单克隆抗体。该单克隆抗体具有的优点,能准确识别___________ 的细微差异,与特定__________________ ,并且可______________ 。
(2)制备抗EV71单克隆抗体时,选用
单克隆抗体的制备,流程图如下:(3)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选目的是获得
(4)图中最终筛选出来的细胞,其特点是
(5)图中体外的扩大培养,是从
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【推荐2】Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入________ 以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出________ 反应最强的培养孔所对应的小鼠M。
(2)实验用骨髓瘤细胞置于________ 恒温培养箱中37℃培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中________ (填“有”或“无”)骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有________ 能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择________ 的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中________ 培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。 单克隆单体的优点是________________________ 。
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
(1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入
(2)实验用骨髓瘤细胞置于
(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有
(4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。
对照组(A) | 131I治疗组(B) | 单克隆抗体治疗组(C) |
给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水 | 给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I |
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【推荐3】生物技术在生产中获得了广泛应用,如下是生物技术制备抗体的两个途径模式简图。回答下列问题。
(1)在抗体1的制备过程中,利用了每种B淋巴细胞______ 的特性和骨髓瘤细胞能够______ 的特性。
(2)在抗体2的制备过程中,构建基因表达载体时,目的基因序列中______ (填“能”或“不能”)含有用到的限制酶的识别序列,原因是______ 。
(3)图中用到的生物技术主要有______ 。
(4)在动物基因工程中,常以受精卵作为受体细胞,其原因是______ 。除图中方法外,若用棉花产生抗体2,则⑥过程的受体细胞通常选用______ ,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过______ 技术获得能产生抗体的转基因棉花植株。
(1)在抗体1的制备过程中,利用了每种B淋巴细胞
(2)在抗体2的制备过程中,构建基因表达载体时,目的基因序列中
(3)图中用到的生物技术主要有
(4)在动物基因工程中,常以受精卵作为受体细胞,其原因是
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【推荐1】非洲猪瘟疫情由ASFV病毒感染猪肺泡巨噬细胞引起的一种急性、高度致死性传染病,全世界尚未研制出安全有效的疫苗。我国科研人员在ASFV病毒的K基因(大小为790bp)中间插入荧光素酶基因(Gluc)和绿色荧光蛋白基因(EGFP),构建了可观察及定量检测酶活性的重组病毒(ASFV-Gluc-EGFP)体系,如左图所示,实现了ASFV病毒的快捷高效检测。
回答下列问题:
(1)左图中的Hind III能切开两个核苷酸之间的______ ,Gluc基因和EGFP基因有助于______ 的筛选。
(2)为初步鉴定重组病毒是否构建成功,科研人员对ASFV病毒和重组病毒进行PCR扩增和电泳鉴定扩增过程中,引物的作用是______ 。电泳得到右图中的1号和2号两种条带,其中2号属于______ PCR产物的条带。
(3)为进一步验证重组病毒是否成功表达,科研人员将重组病毒接种到猪肺泡巨噬细胞并培养一段时间,培养过程中所需的气体环境是______ 。要检测Gluc和EGFP两种基因是否成功表达,可采用的方法有______ 、______ 。
回答下列问题:
(1)左图中的Hind III能切开两个核苷酸之间的
(2)为初步鉴定重组病毒是否构建成功,科研人员对ASFV病毒和重组病毒进行PCR扩增和电泳鉴定扩增过程中,引物的作用是
(3)为进一步验证重组病毒是否成功表达,科研人员将重组病毒接种到猪肺泡巨噬细胞并培养一段时间,培养过程中所需的气体环境是
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【推荐2】科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图),请结合图示回答下列问题:
(1)转基因技术的核心步骤是___________ 的构建,此过程通常需要___________ 和DNA连接酶等工具酶。
(2)在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用___________ 酶处理。在进行原代培养时,细胞增殖还表现出____________ 和接触抑制等特点。
(3)若要一次获得双胎或多胎,可将重组胚胎培养到桑椹胚时期并均等分割,或培养到___________ 时期,然后将其___________ 均等分割。
(4)转基因奶牛是与供体奶牛遗传物质相同的犊牛,但也不是100%的复制,原因最可能是①__________________________________ ;②__________________________________ 。
(1)转基因技术的核心步骤是
(2)在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用
(3)若要一次获得双胎或多胎,可将重组胚胎培养到桑椹胚时期并均等分割,或培养到
(4)转基因奶牛是与供体奶牛遗传物质相同的犊牛,但也不是100%的复制,原因最可能是①
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【推荐3】亨廷顿舞蹈病是由单基因(HTT)突变导致的神经退行性疾病,中科院利用基因编辑(CRISPR/Cas9)技术首次成功培育出亨廷顿舞蹈病的基因“敲入”猪模型,为制备其它神经退行性疾病大动物模型提供了技术范本和理论依据。具体操作过程如下图:
(1)基因编辑技术所使用的CRISPR/Cas9系统需要对特定的DNA序列识别并切割,其功能类似于基因工程工具中的______ 。据图推测若要将基因片段“敲入”,还需用到类似于基因工程工具中的______ 。
(2)过程②所利用的生物技术是______ 。过程①~⑥体现的生物学原理是______ 。
(3)根据图1中信息,结合已有知识,基因编辑技术与转基因技术所利用的遗传学原理是_______ 。
(4)图1中成纤维细胞中的目的基因是_______ 。
(5)在此研究之前,研究人员已建立转基因亨廷顿舞蹈病的猪模型,但出生不久后即死亡。由图可知,与转基因猪模型相比,基因“敲入”猪模型优势在于______ 。
A.操作过程更简单 B.致病基因可遗传给后代
C.培育的时间较短 D.发生突变的概率更高
(6)假如上图中目的基因用J表示,其所在的DNA片段如下图2所示,图3示所用质粒的部分碱基序列。(现有4种限制酶:MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、EcoRⅠ,能识别的碱基序列和酶切位点分别为:C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、G↓AATTC)
据图2、3分析,构建重组质粒的过程中,能(宜)使用的限制酶是_______ 。
(1)基因编辑技术所使用的CRISPR/Cas9系统需要对特定的DNA序列识别并切割,其功能类似于基因工程工具中的
(2)过程②所利用的生物技术是
(3)根据图1中信息,结合已有知识,基因编辑技术与转基因技术所利用的遗传学原理是
(4)图1中成纤维细胞中的目的基因是
(5)在此研究之前,研究人员已建立转基因亨廷顿舞蹈病的猪模型,但出生不久后即死亡。由图可知,与转基因猪模型相比,基因“敲入”猪模型优势在于
A.操作过程更简单 B.致病基因可遗传给后代
C.培育的时间较短 D.发生突变的概率更高
(6)假如上图中目的基因用J表示,其所在的DNA片段如下图2所示,图3示所用质粒的部分碱基序列。(现有4种限制酶:MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、EcoRⅠ,能识别的碱基序列和酶切位点分别为:C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、G↓AATTC)
据图2、3分析,构建重组质粒的过程中,能(宜)使用的限制酶是
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