【推荐1】自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N₂的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。回答下列问题：
   
(1)步骤①土样应取自表层土壤的原因是_____。
(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的_____培养基，原因是_____。

培养基类型	培养基组分
Ashby培养基	甘露醇（C6H14O6）、KH2PO4、MgSO4·7H2O、NaCl、K2SO4、CaCO3、蒸馏水、琼脂
LB培养基	蛋白胨、酵母提取物、NaCl、蒸馏水、琼脂

(3)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时，经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12，为进一步鉴定其固氮能力，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30天后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

注：
CK：对照处理组；
N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有氮全营养液：成分为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）；
CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL，接种自身固氮菌的无氮植物营养液）。
①对照组（CK）的处理为_____。
②自生固氮菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是_____。

【推荐2】氰化物是指含有CN基团的化合物，许多氰化物有剧毒，极少量就会使生物在短时间内中毒死亡。世界卫生组织《饮用水水质标准》规定，必须严格控制水中氰化物的含量，含有氰化物的废水要经过处理才能排放。采用生物法降解氰化物是减轻水中氰化物污染的有效途径之一、自然界中对氰化物有降解能力的微生物约有50种，它们能产生氰(腈) 水合酶和氰(腈)水解酶等，最终将氰化物中的C和N转变为CO₂和NH₃。
(1)欲从水体中分离出能够降解氰化物的微生物，首先应制备两种培养基，一种是牛肉膏蛋白胨培养基，另一种是以_______作为唯一氮源的选择培养基。然后将两种培养基倒平板，设置如下表所示的对照组和实验组：

对照组		实验组
①_______	②_______	③已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板	④

对照组①、②分别为_______。若对照组的平板上没有菌落生长，说明培养基在使用前未被杂菌污染；若实验组③平板上的菌落数显著多于同一稀释度的④平板上的菌落数，说明_______。
(2)用稀释涂布平板法计数能够降解氰化物的微生物时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是_______。若某同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为10⁶的菌液0.1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原菌液中上述目的菌的数量约为_______。经实验统计出的菌落数往往比活菌的实际数目少，原因是_______。实验结束后，使用过的培养基应进行_______处理才能倒掉，以防造成环境污染。

【推荐3】工业生产中，在发酵罐内利用酵母菌发酵生产乙醇时，需先通入无菌空气、搅拌，然后再密闭发酵，发酵罐内温度会因为酵母菌代谢产热而升高，温度可达35℃。通过诱变、筛选得到耐高温的酵母菌新品种，有利于提高酵母菌发酵生产乙醇效率，降低生产成本。
（1）酵母菌代谢过程中通过细胞呼吸产热的化学反应式是__________。
（2）酵母菌培养基的组分中含有1%酵母膏，2%蛋白胨，2%葡萄糖，其中能为酵母菌提供氮源的组分是______，如将该培养基配制成固体培养基，通常还需在培养基中加入的组分是______。
制备培养基的过程包括：计算①→称量②→溶化③→灭菌④→倒平板等，其中调节pH应在______（从①～④中选填）时进行。灭菌是指______。对培养基灭菌的方法是______。
（3）为确定诱变时期，需利用______（填“液体”或“固体”）培养基对酵母菌进行培养，得到的酵母菌生长曲线如下图所示，应选择图中______点对应时间的酵母菌进行诱变。

【推荐1】牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请回答下列问题。

　

(1)牛奶用巴氏消毒法消毒的好处是_______________________________。
(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是下图中的____。

　

(3)（1）问图示方法为稀释涂布平板法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为_______个，运用这种方法统计的结果往往较实际值________（填“大”或“小”），如果培养基上出现________的菌落，说明自制酸奶已被杂菌污染。
(4)已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要进一步分离纯化乳酸菌，应采用下图中________（填字母）所示的划线分离操作，其正确操作过程中，划线工具至少要灼烧________次。

　　

【推荐2】回答如与雾霾天气有关的问题。
(1)治理雾霾，既要控制城市人口规模、还要考虑自然-经济-社会效益，遵循的生态工程建设原理分别是_________ 、 ________。
(2)某小组尝试用纤维素制备燃料酒精，为了获得能高效合成纤维素酶的单菌落，可采用____法将初筛菌液接种在固体培养基上，从功能上看，这种培养基属于______培养基。欲在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最简单可行的做法是____________。
(3)下面是一个探究雾霾天气与肺癌的相关性的实验方案。（实验用具及材料：与雾霾天气类似的烟雾箱，大白鼠若干），请完成相关的内容。

	实验组	对照组
饲养空气条件	①_____	②_____
饲养其他条件	③_____
肿瘤成分检测	④定期抽血检测细胞表面的____化学成分

⑤我们认为：既使实验组的肿瘤成分检出高于对照组，也不能肯定得出“雾霾天气会导致人类肺癌”的结论，你认为理由有_______________________。

【推荐3】（一）回答与甘蔗醋制作有关的问题：
(1)为了获得酿造甘蔗醋的高产菌株，以自然发酵的甘蔗渣为材料进行筛选。首先配制醋酸菌选择培养基：将适量的葡萄糖、KH₂PO₄、MgSO₄溶解并定容，调节pH，再高压蒸汽灭菌，经_____后加入3%体积的无水乙醇。然后将10g自然发酵的甘蔗渣加入选择培养基，振荡培养24h。用_____将少量上述培养液涂布到含CaCO₃的分离培养基上，在30℃培养48h。再挑取分离培养基上具有_____的单菌落若干，分别接种到与分离培养基成分相同的_____培养基上培养24h后，置于4℃冰箱中保存。
(2)优良产酸菌种筛选。将冰箱保存的菌种分别接入选择培养基，培养一段时间后，取合适接种量的菌液在30℃、150r/min条件下振荡培养。持续培养至培养液中醋酸浓度不再上升，或者培养液中_____含量达到最低时，发酵结束。筛选得到的优良菌种除了产酸量高外，还应有_____（答出2点即可）等特点。
(3)制醋过程中，可将甘蔗渣制作成固定化介质，经_____后用于发酵。其固定化方法为_____。
（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
(4)天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的_____。
(5)结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、_____及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用_____的转基因方法。
(6)利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间短，且不经历_____过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。
(7)与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加_____，促进从状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成_____，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如_____（A．提高蔗糖浓度B．降低培养基浓度C．提高大量元素浓度D．不添加琼脂）。

【推荐1】苯酚（C₆H₆O）是重要的化工原料，被广泛应用工业生产中，易形成污染，具有致癌、致畸和致突变作用。苯酚降解菌能分解工业废水中的苯酚。自然界中能分解苯酚的微生物有几百种，多为细菌、放线菌等。分离和纯化高效降解苯酚的微生物的实验流程如图所示：

请回答下列问题：
（1）在制作苯酚降解菌的富集培养基和平板分离培养基时，培养基中应以______为唯一碳源，后者除基本营养成分外，还应添加______（物质），然后用____________（方法）对培养基进行灭菌。

（2）用平板划线法分离得到的单个菌落大小、颜色、隆起度等不完全一致的原因是__________________。
（3）对分离得到的某株苯酚降解菌进行菌株生长及苯酚降解实验，结果如图所示。实验结果表明此菌株适于降解的苯酚浓度为____g/L，判断依据是_____________。

【推荐2】在石油开采过程中，利用表面活性剂可提高采收率，但化学合成表面活性剂不易降解，带来一定的环境污染。某些微生物可代谢产生生物表面活性剂，拟从含油污水中筛选耐高温、高压的产生生物表面活性剂的菌株。
(1)分离能利用石油的耐高温菌种，流程如下图。

   
①上述过程所用的培养液应如何设计？_____
②固体培养基的制备过程包括：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，可采用____法对培养基进行灭菌。
③图中A处应采用______法进行接种。
(2)通过上述分离过程，获得16个菌株。如何从这些菌株中进一步筛选耐高压、高产生物表面活性剂的菌种？请写出基本思路：_______。
(3)为提高实验的可信度，设置了如下2个对照实验：

对照组	作用	应出现的现象
对照组1： 未接种的选择培养基	①_______	②_________
对照组2： ③________	判断选择培养基是否起到了选择作用	对照组2培养基上的菌落数④______（填“大于、小于、等于”）选择培养基上的菌落数

(4)简述产生物表面活性剂菌株在石油工业应用的生态学意义。______

【推荐3】氰化物是指含有CN基团的化合物，许多氰化物有剧毒，极少量就会使生物在短时间内中毒死亡。世界卫生组织《饮用水水质标准》规定，必须严格控制水中氰化物的含量，含有氰化物的废水要经过处理才能排放。采用生物法降解氰化物是减轻水中氰化物污染的有效途径之一、自然界中对氰化物有降解能力的微生物约有50种，它们能产生氰(腈) 水合酶和氰(腈)水解酶等，最终将氰化物中的C和N转变为CO₂和NH₃。
(1)欲从水体中分离出能够降解氰化物的微生物，首先应制备两种培养基，一种是牛肉膏蛋白胨培养基，另一种是以_______作为唯一氮源的选择培养基。然后将两种培养基倒平板，设置如下表所示的对照组和实验组：

对照组		实验组
①_______	②_______	③已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板	④

对照组①、②分别为_______。若对照组的平板上没有菌落生长，说明培养基在使用前未被杂菌污染；若实验组③平板上的菌落数显著多于同一稀释度的④平板上的菌落数，说明_______。
(2)用稀释涂布平板法计数能够降解氰化物的微生物时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是_______。若某同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为10⁶的菌液0.1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原菌液中上述目的菌的数量约为_______。经实验统计出的菌落数往往比活菌的实际数目少，原因是_______。实验结束后，使用过的培养基应进行_______处理才能倒掉，以防造成环境污染。

【推荐1】 “白菜—甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长周期短，耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜—甘蓝”培育过程示意图，请完成下列有关问题:

(1)由杂种细胞D培育成 “白菜—甘蓝”植株，采用的技术手段是__________。该过程说明植物细胞具有__________。
(2)要制备“白菜—甘蓝”的人工种子，要在d步骤选取具有生根发芽能力的__________(结构)，包裹上人造种皮制得。
(3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是__________，融合依据的原理是__________。
(4)要获得上图中白菜和甘蓝的原生质体，首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具:紫色洋葱磷片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等。请你从中选择合适的材料，完成下面检验是否已除去细胞壁实验的方法步骤，并预测和解释实验结果。
主要实验步骤：
①选取适宜浓度的蔗糖溶液，加入适量纤维素酶和果胶酶配制成细胞壁分解液。其中选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是:适宜浓度的蔗糖溶液______________。
②检验细胞壁分解液除去细胞壁。
第一步：用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶放在载玻片中央，滴加适量细胞壁分解液，制成临时装片，得到实验组装片。
第二步：____________________ 。
第三步：______________________ 。
结果预测和解释：______________。

【推荐2】细胞融合技术有着广泛应用。如图为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题。

(1)若a、b分别是基因型为yyRr和YYrr的两个玉米品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。科学家分别将它们的花粉除去细胞壁，然后诱导其融合，再将这些融合细胞培育出玉米新品种。
①这两个品种的花粉可用化学诱导剂_____ 诱导融合，共可产生_____ 种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过脱分化形成_____ ，再经培养可能得到不同于亲本基因型的玉米新品种。

②若想培育出基因型为yyRR的玉米植株，也可直接用基因型为_____（填“yyRr”或“YYrr”）的植株的花粉进行离体培养，得到单倍体植株后再经过_____处理并筛选获得，这种方法叫作_____。
(2)若a、b表示番茄和马铃薯两种植物的体细胞，请据图回答：
在“番茄—马铃薯”的培育过程中，运用了植物细胞工程中的_____技术，植物体细胞融合完成的标志是_____。
(3)已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后细胞需经过筛选，筛选后的所需细胞群应具备的特点是__________________。获得的单克隆抗体最终可以从__________________中提取。

【推荐3】下图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄-马铃薯”植株的过程，请回答下列问题：

（1）①②过程使用了__________酶，以获得植物的原生质体；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__________。
（2）过程③在化学药剂__________的作用下会发生植物原生质体的融合；动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是______________________________。
（3）过程__________属于脱分化，过程__________属于再分化，细胞分生分化的根本原因是__________。（前两空用图中的数字作答）
（4）过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是____________________。
（5）植物体细胞杂交的研究在________________________________________方面，取得了巨大突破