【推荐1】PCR技术是20世纪80年代发展起来的新技术，广泛应用于分子生物学、基因工程及其他与DNA鉴定相关的领域，如疾病检测、商品检疫、法医鉴定等。回答下列问题：
（1）引物是PCR技术中的关键物质。利用PCR技术扩增某个致病基因时，所设计的一对引物必须具备________和________的特点。
（2）将PCR所需的物质准备完毕后，在PCR仪上用94~96℃的温度预热5 min，其目的是_______________。温度降低到50~60℃后，发生_________，将温度回升至72℃，反应体系中的________酶催化________合成双链DNA。
（3）多重PCR技术在一个反应体系中使用两对以上的引物，可应用于检测食品中的多种致病菌，原因是__________________________。

【推荐2】真菌AFPs基因表达的蛋白质能提高细胞的抗冻能力，将AFPs基因导入番茄中培育抗冻番茄品种，延长番茄果实的储存期。AFPs基因及基因表达载体的元件组成情况如图甲、乙所示，图中的 EcoRⅠ、HindⅢ、BamHⅠ、SmaⅠ均表示限制性内切核酸酶，相关酶的切割位点分布如图所示，基因经所有酶切割后均会产生不同的黏性末端。回答下列问题：
   
(1)使用PCR技术扩增AFPs基因时，需要在一定的缓冲溶液中才能进行，需提供分别与两条模板链结合的2种引物，引物的作用是_____________。两种引物与两条单链DNA结合的过程称为_____________。
(2)构建基因表达载体时，宜选择限制性内切核酸酶 BamHⅠ、HindⅢ，而不能使用限制性内切核酸酶 SmaⅠ，不能使用 SmaⅠ的原因是_____________（答出2点）。与单独使用 BamHⅠ处理，使用限制性内切核酸酶 BamHⅠ、HindⅢ处理的优势是___________（答出2点）。
(3)含有重组质粒的受体细胞不能在含潮霉素的培养基上正常生长，能在含四环素的培养基上正常生长，原因是_____________。分子水平上检测 AFPs基因是否翻译形成了相应的蛋白质，具体做法是___________。

【推荐3】质膜内在蛋白在植物生物膜系统中广泛存在，是植物运输水分和CO₂的主要通道。为了研究干旱胁迫下质膜内在蛋白基因Z1（图1表示已知其中一条链的碱基序列）在玉米中的表达和调控情况，科研人员建构含有Z1基因的高表达载体（图2表示该载体的T-DNA序列），通过转基因技术培育出了Zl蛋白高表达植株。请回答下列问题。
   
(1)通过PCR扩增Zl基因时，通常选择下列____组合作为引物对。

A．5'-TAAGTTGTCT-3'和5'-CTTGGATGAT-3'

B．5'-TCTGTTGAAT-3'和5'-CTTGGATGAT-3'

C．5'- GAACCTACTA -3'和5'- ATTCAACAGA -3'

D．5'- ATCATCCAAG -3'和5'- ATTCAACAGA -3

(2)根据基因表达载体的结构组成分析，图2中的Ubiquitin和P35S是____，其功能是____。
(3)为检测质膜内在蛋白基因是否导入玉米细胞，可采用PCR技术对转基因玉米株系进行检测，并对PCR产物用电泳技术来鉴定。由图3电泳结果可知，____号玉米株系含有目的基因。
   
(4)为探究Z1转基因玉米的抗干旱能力，对野生型玉米株系（WT株系）和ZI转基因玉米（Oe1-3株系）进行干旱处理后测定其地上部分的鲜重，分别计算其相对于正常条件下生长的野生型植株的地上部分生物量，结果如图4所示。图示结果说明____。
   
(5)为进一步探究Z1基因在分子及细胞水平的作用机制，研究人员将Z1基因与绿色荧光蛋白基因连接到同一载体上并导入玉米细胞,发现绿色荧光分布在细胞膜上；在图2的Ubiquitin下游连接GUS基因（表达产物可水解底物呈蓝色），发现蓝色主要分布在叶肉细胞中。请结合Z1蛋白的功能推测其作用机制是____。

【推荐1】回答下列（一）、（二）小题：
（一）回答与胴腐病防治有关的问题：
果树的胴腐病是由某真菌引起的疾病，某中学的科研小组计划分离出该真菌做药物防治实验，为胴腐病的防治提供合理的建议，实验时使用的PDA培养基配方如下表所示：

物质	马铃薯	葡萄糖	自来水	氯霉素
含量	200g	20g	1000mL	0．3g

（该真菌在PDA培养基上生长时有特定的形态特征）
（1）对该培养基进行高压蒸汽灭菌，一般建议采用的温度和压力分别是________，除温度和压力之外，影响高压蒸汽灭菌效果的因素还有灭菌对象含菌量、灭菌对象PH、加热与散热速度以及________________等（答出2点即可）。
（2）为了观察菌落，还需加入到培养基中的成分是________，培养基转移到三角瓶或试管时必须用________。
（3）从染病枝条溃疡处剪取患病组织，________后置于培养基中培养，待菌落形态特征稳定后，用________法将该菌转移至三个分别含有等量0．5%水碱剂、40%福美砷、清水的PDA培养基中进行抗药性实验，每隔24h记录一次最后划线区域的菌落数目。
①选取菌落数目稳定的培养皿记录作为结果，这样可以防止________________。
②记录结果如下：

小组	0．5%水碱剂	40%美福砷	清水
菌落数目	2	8	17

分析得出结论：________________________________________________________________。
（二）回答与棉花培育及应用有关的问题：
（1）用________代替热碱来处理棉织物，可在比较温和的PH及温度条件下使处理后的织物手感柔软且强度增大。若用某些微生物来处理棉织物，发现产品质量明显变差，很可能是织物中的部分________被降解。
（2）为了培育出“兔毛棉花”’，科研人员将兔角蛋白基因转入棉花受伤部位的细胞________中，再将这些细胞进行植物组织培养，为鉴定最终是否成功培育出“兔毛棉花”，在分子水平上可采用的检测方法是________________。
（3）棉酚是有毒性的化学物质，主要存在于棉花的根、叶和棉籽等器官中。棉籽含有高质量的蛋白质，科研人员希望棉籽能成为人类的食物来源，除了对棉籽作脱酚处理之外，也可采用________技术对细胞中的特定基因进行定点改造，此项操作________（“改变”或“不改变”）特定基因的核苷酸序列。考虑到改造后的棉花要在自然环境中广泛种植，棉花叶中应________（“含有”或“不含有”）棉酚，理由是________________________。

【推荐2】面对新冠疫情，目前最有效的手段还是接种疫苗。若欲制备和使用DNA疫苗，应先制备含病毒抗原基因的重组质粒，再将其注入人体，最终表达出具有疫苗性质的蛋白质。图1是备选质粒。图2是含有抗原基因的一段DNA，逆转录自新冠病毒变异株Omicron。图中涉及的BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ三种限制酶的识别序列和产物均不同。

(1)为使抗原基因与备选质粒高效拼接，构建重组质粒应选用__________（限制酶），理由是_________。
(2)若备选质粒被HindⅢ限制酶切割后产生的单链末端是AGCT-，切割位点在A与A之间，则HindⅢ的识别序列最可能是_________。

A．-AGCT-

B．-AAGCT-

C．-AAGCTT-

D．-TAGCTA-

(3)若注入人体的DNA疫苗已成功免疫，则涉及的生理过程是_________。
①有丝分裂②减数分裂③细胞分化④复制⑤转录⑥翻译

A．①④⑤⑥	B．②③④⑤
C．②④⑤⑥	D．①③④⑤⑥

(4)接种基因工程制备的DNA疫苗比灭活或减毒的病毒疫苗更安全原因是_________

A．该疫苗是抗体	B．该疫苗不具有病毒的全部遗传物质
C．接种该疫苗更接近天然感染	D．接种后不会出现病毒增殖和感染

(5)面对目前新冠疫情的防控形势，你认为新冠疫苗能否成为战胜新冠病毒的“终极武器”，并说明原因。___________________。

【推荐3】接种疫苗是预防传染病的一项重要措施，乙肝疫苗的使用可有效阻止乙肝病毒的传播，降低乙型肝炎发病率。在乙肝病毒（HBV）的结构蛋白中，用来制备疫苗的主要是HBsAg蛋白（乙肝病毒表面抗原，一种病毒蛋白）。目前HBsAg基因已在生物体系中成功表达。如图表示用农杆菌转化法培育转基因番茄，生产乙肝疫苗的技术路线。请回答下列问题。

(1)利用PCR技术获取HBsAg基因片段时，需要用到我国台湾科学家钱嘉韵首先分离出的DNA聚合酶，其作用是______。在PCR反应过程中，复性时，图2中的引物______（填字母）与DNA单链相应互补序列结合。通常采用______来鉴定PCR的产物。
(2)图1中过程①需要用到的限制酶是______。这样形成的重组质粒中，标记基因是______。
(3)纯化培养过程②得到的含重组质粒的农杆菌时，须使用______（选填“液体”或“固体”）培养基，接种前该培养基需要采用______灭菌法灭菌。
(4)利用植物组织培养技术将转基因番茄细胞培育成试管苗的过程中，培养基中需要加入的植物激素是______，以诱导番茄细胞脱分化和再分化。
(5)现有健康、生理状态基本相同的未免疫小鼠若干，若要从分子水平检测转基因番茄作为口服乙肝疫苗是否有效，请写出实验思路并预期结果。