牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌,设计了如下实验。
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌:
配制全营养LB固体培养基。配方:水、蛋白胨,酵母提取物,NaCl,琼脂糖。(备注:琼脂糖是一种链状多糖,35—40℃时形成半固体状凝胶,90℃以上溶解;琼脂主要成分为琼脂糖和果胶,还有少量含氮化合物等)
配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖,NaCl,K2HPO4,尿素,酚红,琼脂糖。(备注:酚红是一种酸碱指示剂,在酸性时呈黄色,碱性时呈红色。)
Ⅲ.制备瘤胃稀释液如图并接种。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
回答下列问题:
(1)LB全营养固体培养基和尿素固体培养基都含有的微生物生长所需的4类基本营养物质,它们是____________ 。尿素固体培养基需用琼脂糖做凝固剂而不用琼脂的原因是__________________ 。
(2)尿素培养基中加酚红的原因是以尿素为氮源的微生物培养一段时间后,由于细菌产生的______ 向周围扩散,将培养基中的尿素分解,产生的______ 使培养基中的酚红由黄色变成红色。
(3)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板(2种平板)先行培养了一段时间,这样做的目的是__________________ 。为了判断尿素培养基是否具有选择作用,实验时还需要同时接种______ 平板。经适当培养,每隔24h统计一次菌落数目。为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24h~48h,观察并统计具有红色环带的菌落数,结果如下表,其中______ 号试管的稀释倍数比较合适(请从上图中1—5号试管中选择填写)。
(4)接下来,该小组对周围红色区域______ (填“大”或“小”)的菌落进行平板划线法纯化和分离,以便获得单菌落。操作时,接种环通过______ 方法灭菌。在第二次及以后划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是____________ 。
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌:
配制全营养LB固体培养基。配方:水、蛋白胨,酵母提取物,NaCl,琼脂糖。(备注:琼脂糖是一种链状多糖,35—40℃时形成半固体状凝胶,90℃以上溶解;琼脂主要成分为琼脂糖和果胶,还有少量含氮化合物等)
配制尿素固体培养基。配方:水、葡萄糖,NaCl,K2HPO4,尿素,酚红,琼脂糖。(备注:酚红是一种酸碱指示剂,在酸性时呈黄色,碱性时呈红色。)
Ⅲ.制备瘤胃稀释液如图并接种。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。
回答下列问题:
(1)LB全营养固体培养基和尿素固体培养基都含有的微生物生长所需的4类基本营养物质,它们是
(2)尿素培养基中加酚红的原因是以尿素为氮源的微生物培养一段时间后,由于细菌产生的
(3)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板(2种平板)先行培养了一段时间,这样做的目的是
稀释倍数 | 1×103 | 1×104 | 1×105 | 1×106 | 1×107 |
菌落数 | >500 | 367 | 248 | 36 | 18 |
(4)接下来,该小组对周围红色区域
更新时间:2022-08-03 22:22:33
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【推荐1】下表所示为某微生物培养基配方,请分析回答:
(1)根据物理性质,该培养基属于_______ 培养基;根据用途划分则属于________ 培养基。
(2)根据培养基原料,所培养的微生物的代谢类型,同化作用类型:_____________ ,异化作用类型:______________ 培养的微生物可能是_______________________ 。
(3)该培养基中的碳源是_____________ ,氮源是_____________ 。
(4)如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标,至少要加入__________ 和________ ,除去___________________ 。
(1)根据物理性质,该培养基属于
(2)根据培养基原料,所培养的微生物的代谢类型,同化作用类型:
(3)该培养基中的碳源是
(4)如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标,至少要加入
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【推荐2】一部手机上携带的细菌种类繁多,包括沙门氏菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌等,这已成为致病细菌传播的重要途径之一。为验证该观点,A、B两地大学分别组织一组科研人员进行实验调查。如图是A组和B组的实验流程和实验结果。下表是2种可供选择的培养基配方。
(1)从物理性质上看,题述两种培养基属于____ 培养基,为达到实验目的,应选择上表中的培养基____ ,理由是____ 。
(2)为防止外来杂菌的入侵,对实验使用的培养基应使用湿热灭菌,下列所示的操作步骤的正确顺序是( )
①让压力表的压力降为零②加热灭菌锅,打开排气阀,排除锅内冷空气③打开排气阀,排除锅内热蒸汽④关闭排气阀,让锅内温度上升⑤向灭菌锅内放入待灭菌物品⑥到达所需压力时,控制热源,维持压力
(3)如图所示,A、B两地的科研人员均完成了实验,但实验结果却完全不同。科研人员推测可能A组的培养基被污染了,如何证明培养基A是否被杂菌污染?____ 。
(4)取样面积如图所示,由于手机上存在各种微生物,为了准确计数平板上的细菌数量,依据不同微生物具有不同的菌落特征如____ (写出两点即可)等方面加以区分。科研人员将上述菌悬液进行梯度稀释,取0.1mL稀释倍数为:102的样品接种到4个平板上,经培养计数,4个平板的细菌菌落数分别是108、10、105、102,则该取样区域细菌密度约为____ 个/cm2。该数值一般比实际活菌值偏____ ,原因是____ 。
培养基名称 | 配方 |
培养基甲 | 牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl5g,蒸馏水1000mL,琼脂20g |
培养基乙 | 葡萄糖15g,KH₂PO₄1g,MgSO₄·7H₂O0.5g,KCl0.5g, FeSO₄·7H₂O0.01g,蒸馏水1000mL,琼脂20g |
(1)从物理性质上看,题述两种培养基属于
(2)为防止外来杂菌的入侵,对实验使用的培养基应使用湿热灭菌,下列所示的操作步骤的正确顺序是( )
①让压力表的压力降为零②加热灭菌锅,打开排气阀,排除锅内冷空气③打开排气阀,排除锅内热蒸汽④关闭排气阀,让锅内温度上升⑤向灭菌锅内放入待灭菌物品⑥到达所需压力时,控制热源,维持压力
A.⑤①②④⑥③ | B.⑤②④⑥①③ | C.⑤②④⑥③① | D.⑤②⑥①④③ |
(3)如图所示,A、B两地的科研人员均完成了实验,但实验结果却完全不同。科研人员推测可能A组的培养基被污染了,如何证明培养基A是否被杂菌污染?
(4)取样面积如图所示,由于手机上存在各种微生物,为了准确计数平板上的细菌数量,依据不同微生物具有不同的菌落特征如
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【推荐3】幽门螺杆菌在胃中大量繁殖会引起胃炎、胃溃疡等多种疾病,其结构如图1。幽门螺杆菌具有较强的尿素酶活性,该酶能催化尿素分解为氨和CO2。目前,13C呼气检测是诊断幽门螺杆菌感染的方法之一,其做法是:让待检者服下一定量的13C-尿素,约30分钟后收集其呼出的气体中是否含有13CO2。
(1)幽门螺杆菌与胃腺细胞共有的细胞结构有_______ (填图中的数字序号)。
(2)13C呼气法中,尿素为幽门螺杆菌提供__________。
(3)使用公筷可以减少幽门螺杆菌的感染率,其原理是__________。
(4)兴趣小组查找文献后提出了幽门螺杆菌在生活过程中分泌毒素导致胃壁细胞死亡溃烂的假设,并设计了实验过程如图2所示,其中A、B分别是__________ (填数字序号)。
①无菌水 ②自来水 ③幽门螺杆菌 ④滤液Ⅰ ⑤滤液Ⅱ
幽门螺杆菌导致的胃溃疡等疾病可通过同时服用多种抗生素根除。研究小组将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于幽门螺杆菌培养基表面,37°C培养4周,实验结果如图3。其中圆纸片A、B分别浸过抗生素A和抗生素B,圆纸片C浸过抗生素A和抗生素B的混合物,圆纸片D用作实验对照。
(5)培养基配制后可采用_______________ 方法杀死细菌芽孢等微生物,接种后应将培养皿_________ 放置培养。
(6)根据实验结果,治疗幽门螺杆菌的优选方案是服用__________。
(1)幽门螺杆菌与胃腺细胞共有的细胞结构有
(2)13C呼气法中,尿素为幽门螺杆菌提供__________。
A.碳源 | B.氮源 | C.特殊营养物质 | D.无机盐 |
A.抑制幽门螺杆菌繁殖 | B.切断媒介物传播途径 |
C.保护易感人群 | D.减少与感染者的接触 |
①无菌水 ②自来水 ③幽门螺杆菌 ④滤液Ⅰ ⑤滤液Ⅱ
幽门螺杆菌导致的胃溃疡等疾病可通过同时服用多种抗生素根除。研究小组将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于幽门螺杆菌培养基表面,37°C培养4周,实验结果如图3。其中圆纸片A、B分别浸过抗生素A和抗生素B,圆纸片C浸过抗生素A和抗生素B的混合物,圆纸片D用作实验对照。
(5)培养基配制后可采用
(6)根据实验结果,治疗幽门螺杆菌的优选方案是服用__________。
A.抗生素A | B.抗生素B | C.青霉素 | D.抗生素A和抗生素B |
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【推荐1】无菌操作是微生物接种技术的关键;传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中,均要无菌操作。回答下列相关问题:
(1)消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理__________ 。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩ C.①②③④⑤⑥⑧ D.以上全部
(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整_____________ , 接种前要进行_____________ , 在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。
(3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用_______ 法进行大肠杆菌接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意:每次划线前要___________ ;冷却后从上一区划线末端开始划;首尾区_____________ 。
(4)有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素,结果发酵失败,原因可能是______________________ 。
(1)消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩ C.①②③④⑤⑥⑧ D.以上全部
(2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整
(3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用
(4)有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素,结果发酵失败,原因可能是
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【推荐2】在农田土壤中,大部分磷与Ca2+、Fe3+、Fe2+等结合,这些物质不溶于水,很难被植物等吸收利用,所以在农业生产中,每年需施大量可溶性磷肥。为了挖掘土壤中潜在的磷库资源,减少化肥使用,寻找具有溶磷功能(将不溶性磷转化为可溶性磷)的微生物便成了发展绿色农业的重要任务。
某研究小组配制了如下培养基,以筛选玉米根际土壤中的溶磷菌。
分离培养基:葡萄糖10g、硫酸铵0.5g、硫酸镁0.3g、氯化钠0.3g、氯化钾0.2g、硫酸铁0.03g、硫酸锰0.03g、磷酸三钙5g、琼脂15g、蒸馏水定容至1000mL。
(1)在该分离培养基中,为微生物提供氮源的是________ ,提供碳源的是________ 。
(2)该培养基中__________ (填“能”或“不能”)有效筛选出溶磷菌,原因是_________ 。
(3)用选择培养基筛选分离目的菌,并对其进行计数,常用的接种方法是________ 。在微生物培养过程中,常用________ 法对培养基进行灭菌。实验操作应在酒精灯________ 附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。
(4)黑曲霉是一种溶磷菌,可通过释放有机酸将磷矿石溶解。现研究黑曲霉对磷酸钙、磷酸锌的溶磷效果,将黑曲霉接种到平板A(含磷酸钙)和平板B(含磷酸锌)上,可通过测定________ 检测溶磷效果。
某研究小组配制了如下培养基,以筛选玉米根际土壤中的溶磷菌。
分离培养基:葡萄糖10g、硫酸铵0.5g、硫酸镁0.3g、氯化钠0.3g、氯化钾0.2g、硫酸铁0.03g、硫酸锰0.03g、磷酸三钙5g、琼脂15g、蒸馏水定容至1000mL。
(1)在该分离培养基中,为微生物提供氮源的是
(2)该培养基中
(3)用选择培养基筛选分离目的菌,并对其进行计数,常用的接种方法是
(4)黑曲霉是一种溶磷菌,可通过释放有机酸将磷矿石溶解。现研究黑曲霉对磷酸钙、磷酸锌的溶磷效果,将黑曲霉接种到平板A(含磷酸钙)和平板B(含磷酸锌)上,可通过测定
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【推荐3】将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中,再将所缺的营养物质点植于平板上,该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质,便在这种营养物质扩散处生长繁殖,形成肉眼可见的菌落圈,这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类(碳源)的需求情况,操作流程如下:
Ⅰ.培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如表(加水定容至1L):
同时配制质量分数为10%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL
Ⅱ.将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的固体培养基混匀,倒平板。
Ⅲ.将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区,并注明要点植的糖类名称。
V.通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片,待平板吸收干燥后倒置培养24小时。
结合所学知识,回答下列问题:
(1)无碳培养基配方中加入(NH4)2SO4的目的是_____ 。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是_____ 。倒平板后用_____ 法进行接种。
(2)该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生,但大小不同,据此得到的初步结论是_____ 。
(3)生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株(失去合成某种生长因子能力的菌株)的筛选和鉴定,例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体,现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液,但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸-维生素缺陷型,某生物兴趣小组用生长谱法设计实验进行鉴定,请将他们的实验设计补充完整。
实验思路:将菌悬液与溶化并冷却至50℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀,倒平板;将培养基划分成两个相等的区域A、B;A区_____ 、B区_____ ;在适宜温度下培养,观察菌落产生的区域。
实验结果及结论:_____ 。
Ⅰ.培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如表(加水定容至1L):
成分 | NaCl | KH2PO4 | K2HPO4 | (HN4)2SO4 | MgSO4•7H2O | 琼脂 |
质量/g | 1 | 0.5 | 0.5 | 2 | 0.2 | 20 |
Ⅱ.将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的固体培养基混匀,倒平板。
Ⅲ.将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区,并注明要点植的糖类名称。
V.通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片,待平板吸收干燥后倒置培养24小时。
结合所学知识,回答下列问题:
(1)无碳培养基配方中加入(NH4)2SO4的目的是
(2)该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生,但大小不同,据此得到的初步结论是
(3)生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株(失去合成某种生长因子能力的菌株)的筛选和鉴定,例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体,现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液,但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸-维生素缺陷型,某生物兴趣小组用生长谱法设计实验进行鉴定,请将他们的实验设计补充完整。
实验思路:将菌悬液与溶化并冷却至50℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀,倒平板;将培养基划分成两个相等的区域A、B;A区
实验结果及结论:
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【推荐1】稻田除草后残留的除草剂A和除草剂B会污染环境。某科研小组欲从土壤中筛选能同时分解除草剂A和除草剂B的微生物(除草剂A和除草剂B均可作为氮源)。请回答下列问题:
(1)取土样:取多年_____________ 的稻田土壤放入塑料瓶中备用。
(2)配制培养基:将除草剂A和除草剂B混合后,用于制液体培养基甲取部分液体培养基甲,并加入_____________ (填凝固剂名称)配制固体培养基乙。为了检测配制的固体培养基乙是否灭菌合格,需要进行的操作是将一部分空白培养基乙培养一段时间,观察_____________ 。
(3)富集培养:将适量土样加入培养液甲中,置于恒温摇床上振荡培养一段时间。富集培养的目的是______________________ ;富集培养过程中振荡的作用是使所培养的微生物能充分利用___________ 。
(4)分离纯化:将富集培养的菌液涂布到培养基乙之前,需要进行的操作是_____________ 。接种培养后,最终获取优势菌落,保存菌种。
(5)复选:为进一步鉴定上一步骤中分离纯化的优势菌种能否同时分解除草剂A和除草剂B,还需配制两种培养基——丙和丁,而后将上述优势菌种分别接种到培养基丙和丁中进行培养观察,则培养基丙和丁的营养组成特点是__________________________ 。
(1)取土样:取多年
(2)配制培养基:将除草剂A和除草剂B混合后,用于制液体培养基甲取部分液体培养基甲,并加入
(3)富集培养:将适量土样加入培养液甲中,置于恒温摇床上振荡培养一段时间。富集培养的目的是
(4)分离纯化:将富集培养的菌液涂布到培养基乙之前,需要进行的操作是
(5)复选:为进一步鉴定上一步骤中分离纯化的优势菌种能否同时分解除草剂A和除草剂B,还需配制两种培养基——丙和丁,而后将上述优势菌种分别接种到培养基丙和丁中进行培养观察,则培养基丙和丁的营养组成特点是
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【推荐2】原核生物繁殖快、多为单细胞,且遗传物质相对较少,因此早期的基因工程操作都用原核生物作为受体细胞,其中以大肠杆菌应用最为广泛。目前市场上供应的降血糖药物多为重组人胰岛素,即应用基因工程技术生产的、与内源激素结构和生物活性相同的胰岛素。用于生产重组人胰岛素的表达系统主要有大肠杆菌和酵母菌,这两个系统各有利弊,大肠杆菌系统表达效率高,但后处理较难;酵母系统表达量虽然低,但对表达产物的处理较简便。下图为某研究小组设计的酵母菌培养流程,回答下列有关问题:
(1)实验中对所用实验物品、培养基进行灭菌处理的目的是_________________ ,除上述灭菌处理外,为达到相同的目的,操作时还要注意_______________ 。
(2)用大肠杆菌来生产重组人胰岛素,为何后处理比较难?_____________ 。
(3)进行酵母菌计数时,不采用平板划线法接种的原因是____________ 。对于频繁使用的菌种,常采用临时保藏的方法,但该方法保存时间不长,原因是____________________ 。
(4)虎红培养基是培养、分离和计数酵母菌的常用培养基。在该培养基平板上,酵母菌多数为圆形凸起、边缘整齐、表面光滑湿润、不透明乳白色或粉红色的菌落,少数菌落表面粗糙或皱褶、周边呈细分枝状,因此该培养基属于____________________ (填“选择培养基”或“鉴别培养基”)。观察发现,在培养基内部也分布有酵母菌菌落,分析内部出现菌落的原因为____________________________ 。
(5)为什么要将接种后培养皿倒过来放置(倒置)?__________________ 。
(1)实验中对所用实验物品、培养基进行灭菌处理的目的是
(2)用大肠杆菌来生产重组人胰岛素,为何后处理比较难?
(3)进行酵母菌计数时,不采用平板划线法接种的原因是
(4)虎红培养基是培养、分离和计数酵母菌的常用培养基。在该培养基平板上,酵母菌多数为圆形凸起、边缘整齐、表面光滑湿润、不透明乳白色或粉红色的菌落,少数菌落表面粗糙或皱褶、周边呈细分枝状,因此该培养基属于
(5)为什么要将接种后培养皿倒过来放置(倒置)?
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【推荐3】β-苯乙醇是具有令人愉悦的玫瑰香味的高级芳香醇,广泛用于食品和日化用品等生产领域。化学合成β-苯乙醇会产生多种杂质,而植物萃取则周期长、成本高,因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工业化新趋势。研究小组从玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下脚料及其肥料堆放的土壤中筛选可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株(YDF-1),实验过程如图所示。回答下列问题:
(1)初筛过程所用的接种方法是__________ 。该实验需制作多种培养基,这些培养基的配方不同,但一般都含有水、无机盐、_______________ 等物质,培养基制作后需使用_______________ 法进行灭菌,灭菌后的培养基再添加相应浓度的β-苯乙醇。由实验目的可知,初筛、复筛及再次复筛的培养基中,添加的β-苯乙醇的浓度应__________ (填“保持不变”或“逐渐增大”或“逐渐降低”),理由是___________ 。
(2)若实验过程中平板上的菌落过于密集,应进一步__________ ,便于菌落计数与分离。计数所得结果将比实际的活菌数低,原因是_____________ 。
(3)若取稀释倍数为104的0.1mL稀释液涂布到含2g/L的YEPD培养基后培养至菌落稳定,计算得出每毫升菌悬液中含4.5×106个菌体,则在该稀释倍数下平板上的平均菌落数是__________ 个。将初筛获得的菌株进行液体培养,其目的是_________ 。
(1)初筛过程所用的接种方法是
(2)若实验过程中平板上的菌落过于密集,应进一步
(3)若取稀释倍数为104的0.1mL稀释液涂布到含2g/L的YEPD培养基后培养至菌落稳定,计算得出每毫升菌悬液中含4.5×106个菌体,则在该稀释倍数下平板上的平均菌落数是
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【推荐1】幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道溃疡的主要致病因素,其不良预后是胃癌。据研究发现,目前我国有超过50%人感染了Hp病菌。Hp是微需氧菌,环境氧要求5%~8%,在大气或绝对厌氧环境下均能生长,Hp中某种酶催化尿素水解形成“氨云”保护细菌在高酸环境下生存。
在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察。请回答:
(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有________ ,所以它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现____ 色环带。
(2)步骤X的操作如下图所示:
①微生物接种的方法很多,但都要注意____________ ;上图所示方法为_____________ 。
②图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,目的是_____________ 。
(3)在培养时,需将培养皿________ 并放在恒温培养箱中。
在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:
配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察。请回答:
(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有
(2)步骤X的操作如下图所示:
①微生物接种的方法很多,但都要注意
②图示每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,目的是
(3)在培养时,需将培养皿
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【推荐2】土壤中富含有机营养和无机营养,可为多种微生物提供生活所需的营养物质,土壤中微生物种类丰富。农业生产中施用的尿素必须由土壤中分解尿素的细菌将其分解后才能被农作物吸收利用,所以,在施用尿素的农田土壤中含有大量分解尿素的细菌。某生物兴趣小组开展了“分离土壤中分解尿素的细菌并进行计数”的实验。请分析回答下列问题。
(1)培养基配方:KH2PO4 1.4g,Na2HPO4 2.1g,MgSO4·7H2O 0.2g,葡萄糖10.0g,尿素1.0g,蒸馏水1000mL,琼脂,无菌水及调节pH的试剂等。
①该培养基中葡萄糖的作用是______________________ ,培养基中作为唯一氮源的物质是___________ ;从功能上看,该培养基属于___________ 培养基。
②培养基中添加一定量KH2PO4和Na2HPO4,请分析所起的作用(至少说出两点)___________ 。
③分析培养基成分和实验目的,所用培养基的物理状态为______________________ 。
(2)土壤取样:用铁铲取表层以下3-8cm的土壤10g,并装在信封中备用。所用铁铲和信封在使用前都需要______________ 。
(3)制备土壤悬液:在酒精灯火焰旁,称取1g土壤样品,倒入盛有99mL___________ 的锥形瓶中,按要求制成10-2g/mL的土壤悬液。并进行一系列的梯度稀释,获得一系列浓度不同的土壤悬液。培养基配制及平板制作。
(4)接种:从浓度最低的土壤悬液开始,分别吸取0.1mL悬液,采用___________ 法将其接种到平板表面。在这一步骤中,下列选项不需要的是___________ (填序号)
①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④接种环 ⑤涂布器
(5)培养与观察,计数菌落:按要求进行培养,并每24h观察一次每个培养皿中的细菌菌落。计数时,选取菌落数为___________ 的一组为样本进行统计。
(1)培养基配方:KH2PO4 1.4g,Na2HPO4 2.1g,MgSO4·7H2O 0.2g,葡萄糖10.0g,尿素1.0g,蒸馏水1000mL,琼脂,无菌水及调节pH的试剂等。
①该培养基中葡萄糖的作用是
②培养基中添加一定量KH2PO4和Na2HPO4,请分析所起的作用(至少说出两点)
③分析培养基成分和实验目的,所用培养基的物理状态为
(2)土壤取样:用铁铲取表层以下3-8cm的土壤10g,并装在信封中备用。所用铁铲和信封在使用前都需要
(3)制备土壤悬液:在酒精灯火焰旁,称取1g土壤样品,倒入盛有99mL
(4)接种:从浓度最低的土壤悬液开始,分别吸取0.1mL悬液,采用
①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④接种环 ⑤涂布器
(5)培养与观察,计数菌落:按要求进行培养,并每24h观察一次每个培养皿中的细菌菌落。计数时,选取菌落数为
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
【推荐3】尿素是一种重要的氮肥,农作物不能将其直接吸收利用,而是通过土壤中的细菌将其分解为氨和CO2后才能被农作物利用。请回答下列问题:
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成________ 。
(2)为筛选尿素分解菌而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外,还包括水、碳源________ 等,该培养基能筛选出目的菌株的原因是________ 。
(3)一般依据尿素分解菌菌落的________ 、隆起程度和颜色等特征来统计菌落数目。现将10mL尿素分解菌悬液进行梯度稀释,分别取0.1mL稀释倍数为106的样液接种到3个培养基上,培养一段时间后,统计菌落数分别为39、42、45,则1mL悬液中活细菌数量为________ 个。上述过程采用的接种方法是________ 。
(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调节________ ;接种前要进行________ ,这种操作的目的是________ 。
(5)进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________ (填序号)。
①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
实验结束后,使用过的培养基应该进行________ 处理后才能倒掉。
(1)土壤中的某些细菌能分解尿素是因为该种细菌能合成
(2)为筛选尿素分解菌而制备的培养基中含有的营养物质除尿素外,还包括水、碳源
(3)一般依据尿素分解菌菌落的
(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调节
(5)进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约50个菌落,而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有
①所取土样不同 ②培养基被污染 ③接种操作错误 ④没有设置对照实验
实验结束后,使用过的培养基应该进行
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