组卷网 > 高中生物综合库 > 生物技术与工程 > 发酵工程 > 微生物的培养与应用 > 微生物的培养与应用综合
题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:456 题号:15068586
将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中,再将所缺的营养物质点植于平板上,该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质,便在这种营养物质扩散处生长繁殖,形成肉眼可见的菌落圈,这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类(碳源)的需求情况,操作流程如下:
Ⅰ.培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如表(加水定容至1L):
成分NaClKH2PO4K2HPO4(HN42SO4MgSO4•7H2O琼脂
质量/g10.50.520.220
同时配制质量分数为10%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL
Ⅱ.将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的固体培养基混匀,倒平板。
Ⅲ.将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区,并注明要点植的糖类名称。
V.通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片,待平板吸收干燥后倒置培养24小时。
结合所学知识,回答下列问题:
(1)无碳培养基配方中加入(NH42SO4的目的是_____。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是_____。倒平板后用_____法进行接种。
(2)该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生,但大小不同,据此得到的初步结论是_____
(3)生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株(失去合成某种生长因子能力的菌株)的筛选和鉴定,例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体,现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液,但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸-维生素缺陷型,某生物兴趣小组用生长谱法设计实验进行鉴定,请将他们的实验设计补充完整。
实验思路:将菌悬液与溶化并冷却至50℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀,倒平板;将培养基划分成两个相等的区域A、B;A区_____、B区_____;在适宜温度下培养,观察菌落产生的区域。
实验结果及结论:_____

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【推荐1】在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。

(1)欲验证培养基是否受污染应怎样操作?________________________
(2)在固体培养基上形成的菌落中,有透明带菌落利用的氮源主要是____________,据此可筛选出目的菌。
(3)统计菌落数目的方法有______________________________
(4)筛选出的菌种在-20℃长期保存时,菌液中需要加入一定量的______________
(5)完成图中的C步骤需要灼烧接种环灭菌__________次。
2021-07-04更新 | 64次组卷
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【推荐2】I.纤维素是地球上储量最丰富的可再生资源之一,经纤维素酶催化水解后,可被微生物发酵利用。真核生物长枝木霉的纤维素酶基因通常随机分布在染色体上。某研究人员用重离子束诱变育种得到了高产纤维素酶的长枝木霉菌株,并对高产纤维素酶的机理进行了研究。如图为高产纤维素酶机理的部分示意图。

(1)根据题意可知,图中纤维素酶基因所含遗传信息的传递方向是______
A、细胞核→细胞质       B、细胞质→细胞质
C、细胞质→核糖体       D、质粒→核糖体
(2)纤维素酶基因的表达受葡萄糖等降解物的影响,形成阻遏效应。由图可知,关于该阻遏效应的说法正确的是______
A、负反馈调节       B、分级调节
C、葡萄糖为信息分子       D、阻遏葡萄糖的过度产生
(3)纤维素酶为复合酶系,主要包括三种组分,它们分别使纤维素长链变短链、短链变二糖、二糖变单糖。请推测,这种降解纤维素的协同作用得以实现的原因不包括它们______
A、分子结构不同       B、催化反应类型相同
C、底物相同       D、最适pH相近
(4)研究发现,PDI和OST是纤维素酶加工修饰的关键蛋白分子。根据以上信息和所学知识分析,高产菌株可以高效合成、分泌纤维素酶可能依赖于__________(编号选填)。
①PDI和OST在核糖体上高效工作
②菌株分泌纤维素酶的方式
③在外界碳源的诱导作用下快速启动纤维素酶基因的转录
④囊泡的生成和移动不消耗能量
(5)重离子束诱变后的高产长枝木霉不可能发生的改变是______
A、基因数目       B、新生多肽的合成方式
C、组蛋白修饰水平       D、内质网的结构
II.工业上,还可通过基因工程改造长枝木霉,从而获得高效生产纤维素酶的菌株。如图为携带OST高表达基因(OST-H基因)的重组质粒导入野生型长枝木霉后,从中筛选高产菌株的流程。其中培养基④中富含纤维素,接种菌株后用刚果红进行染色,而刚果红可与多糖形成红色沉淀,菌落周围的透明圈大小可反映菌株所产纤维素酶的酶活力。

(6)图中步骤I-IV中需在超净台上进行的是___________
(7)关于②号培养基的配制方法正确的是______
A、以OST-H为碳源       B、以纤维素酶为碳源
C、以纤维素为碳源       D、以纤维素酶为氮源
(8)上述过程中,接种的正确操作是______
A、仅步骤I为稀释涂布法接种       B、步骤I、III均为稀释涂布法接种
C、步骤I的接种工具可用火焰灼烧灭菌       D、步骤III使用接种环为接种工具
(9)为达到筛选高产菌株的目的,正确的说法是______
A、步骤II中应挑选直径较大的菌落
B、菌种转接到培养基③目的是为了扩大培养
C、步骤III接种前应进行菌种稀释
D、培养基④应先灭菌再调pH
(10)如表为步骤IV测得的1-4号待选菌株和野生型菌株的数据,请分析菌株4透明圈最大的原因?____________________________________

编号

透明圈大小(mm)

1

4.21±0.54

2

4.62±0.23

3

4.55±0.32

4

5.09±0.41

野生

0.05±0.18

2024-01-11更新 | 267次组卷
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2016-11-26更新 | 243次组卷
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