三七素(β-ODAP)是一种存在于三七、人参等植物当中的植物天然产物,它是传统名药云南白药的主要止血成分之一,该化合物由两个前体物质L-2,3-二氨基丙酸(L-DAP)和草酰CoA(oxalyl-CoA)在酰基转移酶(BAHD)催化下缩合而成。这两个前体物质在植物中由何而来尚不清楚,但在大肠杆菌等微生物中,科学家已鉴定出相关合成路径(如图),为进一步构建高产三七素的工程菌株提供了借鉴。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所需的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有__________ (答出两点即可)。
(2)为评价金黄色葡萄球菌合成L-DAP的能力,可将该菌的纯培养物分别接种在__________ (固体/液体)培养基中进行摇床培养,一段时间后,检测L-DAP含量,此外还需要通过__________ 检测金黄色葡萄球菌的增殖情况。
(3)若以大肠杆菌为宿主构建生产三七素的工程菌,需要利用PCR获取、扩增可表达__________ 酶的目的基因,在构建多基因表达载体时,为了能够连接上述目的基因、并有利于筛选出目标菌,质粒载体应含有__________ (答出2点即可)。
(4)研究发现大肠杆菌(工程菌)表达的某种酶溶解度低,针对这个问题,科研人员将表达该酶的基因中AUU和AUC(大肠杆菌常用的异亮氨酸密码子)替换成AUA(大肠杆菌不常用的异亮氨酸密码子),新合成的该酶溶解度提高了七倍。试分析通过同义密码子替换提高酶溶解度的机理是:通过降低翻译的速度,____________________ 。
(1)通常在实验室培养微生物时,需要对所需的玻璃器皿进行灭菌,灭菌的方法有
(2)为评价金黄色葡萄球菌合成L-DAP的能力,可将该菌的纯培养物分别接种在
(3)若以大肠杆菌为宿主构建生产三七素的工程菌,需要利用PCR获取、扩增可表达
(4)研究发现大肠杆菌(工程菌)表达的某种酶溶解度低,针对这个问题,科研人员将表达该酶的基因中AUU和AUC(大肠杆菌常用的异亮氨酸密码子)替换成AUA(大肠杆菌不常用的异亮氨酸密码子),新合成的该酶溶解度提高了七倍。试分析通过同义密码子替换提高酶溶解度的机理是:通过降低翻译的速度,
更新时间:2022-11-28 15:16:30
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【推荐1】染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现,活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株,它们通过降解具生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN-1的筛选和脱色实验流程,图2表示GN-1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。______ (答出2点)等物质,培养基制作后需使用______ 法进行灭菌。图1中含分散蓝2BLN的液体培养基甲的作用是______ 。
(2)图中所用到的接种方法是______ 。所示菌落①至④中,目标菌株GN-1应从菌落______ (选填编号)中挑取。分离和纯化培养须使用固体培养基,理由是______ 。
(3)随着染料废水中分散蓝2BLN初始浓度的持续增加,CN-1菌株的脱色能力可能怎样变化?______ 。阐述分析过程______ 。根据图2所示结果,综合考虑脱色效果(6d脱色率达90%以上为合格)和经济效益,CN-1菌株的最佳接种量为______ 。
(1)该实验需要制作多种培养基,这些培养基的配方不同,但一般都含有水、无机盐、
(2)图中所用到的接种方法是
(3)随着染料废水中分散蓝2BLN初始浓度的持续增加,CN-1菌株的脱色能力可能怎样变化?
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【推荐2】营养缺陷型菌株是指野生型菌株由于基因突变,致使细胞合成途径出现某些缺陷,丧失合成某些氨基酸的能力,因而必须在基本培养基中补加该营养物质才能正常生长的一类突变菌株。下图是实验人员利用“影印法”筛选出的某种氨基酸缺陷型菌株的示意图。据图回答下列问题:
(1)从培养基的基本营养物质组成角度来看,氨基酸既可以为微生物生长提供____________ ,又可以提供____________ ,除此之外,培养基中还应该含有____________ 和____________ 。
(2)为防止杂菌污染,培养基需要通过____________ 灭菌,接种后的平板须____________ 培养。
(3)进行过程④时,应先将无菌绒布印至____________ 培养基上,目的是____________ 。
(4)筛选氨基酸缺陷型菌株应挑选____________ 培养基上____________ (填“A”或“B”)位置对应的菌落。
(1)从培养基的基本营养物质组成角度来看,氨基酸既可以为微生物生长提供
(2)为防止杂菌污染,培养基需要通过
(3)进行过程④时,应先将无菌绒布印至
(4)筛选氨基酸缺陷型菌株应挑选
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【推荐3】紫杉醇是从红豆杉中提取的一种高效抗癌的药物,虽然能造福人类,但却为濒危的红豆杉带来灭顶之灾。为取代从天然植株中提取紫杉醇的方式,可进行细胞产物工程化生产,其过程为:获取红豆杉外植体→消毒→诱导愈伤组织→细胞培养→提取紫杉醇。请回答下列问题:
(1)紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种___________ (初生/次生)代谢物,可利用______________ 技术实现其工业化生产。
(2)获得愈伤组织这一过程对光照的要求是_____________ 。研究发现用幼嫩茎段比成年老枝更易产生愈伤组织,原因是幼嫩茎段_____________ 。
(3)用少量果胶酶处理愈伤组织获取分散的细胞,在_______________ (固体、液体或半固体)培养基中进行培养,可有效提高紫杉醇的产量。据下图分析,为获得最大紫杉醇总产量,最适合的2,4-D浓度应为____________ (填“0.5”、“1.0”或“2.0”)mg/L。注:生长速率=每天每升培养基中增加的细胞干重克数
(4)多倍体愈伤组织细胞产量常高于二倍体,若愈伤组织细胞(染色体数为12条)经诱导处理染色体加倍后,显微镜下观察细胞中染色体数最多可达到____________ 条。
(5)与从天然植株中提取相比,利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是___________ (答出1点)。
(1)紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种
(2)获得愈伤组织这一过程对光照的要求是
(3)用少量果胶酶处理愈伤组织获取分散的细胞,在
(4)多倍体愈伤组织细胞产量常高于二倍体,若愈伤组织细胞(染色体数为12条)经诱导处理染色体加倍后,显微镜下观察细胞中染色体数最多可达到
(5)与从天然植株中提取相比,利用上述技术生产紫杉醇的重要意义是
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【推荐1】幽门螺杆菌是一种致病菌(该菌对万古霉素、两性霉素B等抗生素不敏感,对青霉素高度敏感),其危害主要是引起胃黏膜的炎症,形成急慢性胃炎及消化道溃疡。体检时可通过14C尿素呼气试验来检测幽门螺杆菌感染情况。受试者口服14C标记的尿素胶囊后,定时收集受试者呼出的气体并测定其中是否含有14CO2以及量的多少,作为诊断指标。现从患者胃内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验步骤如下,请回答:
(1)幽门螺杆菌能够以尿素为氮源,是因为其能产生__________ 。在培养基中加入酚红指示剂,若有幽门螺杆菌,则菌落周围会出现____________________ 。
(2)若利用尿素培养基来分离幽门螺杆菌,对培养基灭菌所采用的方法____________________ 。
(3)某研究小组利用半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)对幽门螺杆菌进行培养。幽门螺杆菌在正常空气的氧浓度或氧浓度过低条件下均不能生长。下图中__________ 号和__________ 号试管可分别代表幽门螺杆菌和酵母菌的生长状态。
(4)若要将得到的幽门螺杆菌进行扩大培养,可采用肉汤基础培养液进行培养,培养液中需加入混合抗生素(包括万古霉素、两性霉素B等),其目的是:____________________ 。
(5)医生针对幽门螺杆菌的常用治疗方案是:连续服用青霉素2周,至14C检测阴性后停药。其依据是:________________________________________________________________________________ 。
(1)幽门螺杆菌能够以尿素为氮源,是因为其能产生
(2)若利用尿素培养基来分离幽门螺杆菌,对培养基灭菌所采用的方法
(3)某研究小组利用半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)对幽门螺杆菌进行培养。幽门螺杆菌在正常空气的氧浓度或氧浓度过低条件下均不能生长。下图中
(4)若要将得到的幽门螺杆菌进行扩大培养,可采用肉汤基础培养液进行培养,培养液中需加入混合抗生素(包括万古霉素、两性霉素B等),其目的是:
(5)医生针对幽门螺杆菌的常用治疗方案是:连续服用青霉素2周,至14C检测阴性后停药。其依据是:
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【推荐2】研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。我国科学家从深海冷泉附近的沉积物样品中分离、鉴定得到拟杆菌X,然后使用不同碳源的培养基对拟杆菌X进行培养,实验结果如图甲所示。回答下列问题:______ 等四类,对培养基通常采用______ 法进行灭菌。为了检测灭菌是否合格,需要进行的操作是____________ 。
(2)图乙表示使用不同接种方法后培养拟杆菌X的实验结果,图乙中能用于拟杆菌X计数的是培养基______ (填序号),该培养基对应的接种方法是____________ 。
(3)据图甲分析,在培养8天后,不同培养基中拟杆菌X的种群密度基本达到了稳定,其原因是________________________ 。
(4)据图甲分析,若要尽快扩大培养拟杆菌X,最好选择以______ 为碳源的培养基。
(1)拟杆菌X生长、繁殖所需的主要营养物质有水、碳源、
(2)图乙表示使用不同接种方法后培养拟杆菌X的实验结果,图乙中能用于拟杆菌X计数的是培养基
(3)据图甲分析,在培养8天后,不同培养基中拟杆菌X的种群密度基本达到了稳定,其原因是
(4)据图甲分析,若要尽快扩大培养拟杆菌X,最好选择以
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【推荐3】随着科技的快速发展,生物实验技术已经走进了人们的生产、生活。利用所学知识回答下列相关问题:
(1)生产果汁时,水果中的果胶对果汁加工带来的影响是__________ 、__________ 。在探究果胶酶最适温度、pH及用量时,检测指标是_____________________________________ 。
(2)啤酒是以大米和大麦为原料,用大麦芽的__________ 将淀粉水解糖化,过滤后得到麦芽汁,麦芽汁中加入啤酒花以抑菌并增加特有的苦味和香味,然后在麦芽汁中加入啤酒酵母发酵,发酵过程中通过控制_________________________ (至少答出两点)等条件可得到不同风味的啤酒。
(3)在酸奶中加入一定量的溶菌酶,然后用巴氏消毒法处理,处理后的溶菌酶_________ (填“能”或“不能”)起到防腐作用,原因是______________________ 。
(4)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是________________________________________ 。
(1)生产果汁时,水果中的果胶对果汁加工带来的影响是
(2)啤酒是以大米和大麦为原料,用大麦芽的
(3)在酸奶中加入一定量的溶菌酶,然后用巴氏消毒法处理,处理后的溶菌酶
(4)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是
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【推荐1】请回答有关下图的问题:
(1)图中①~⑤所示的生物工程为___________________ 。该工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过对_________ 的修饰或合成,对现有的进行改造,或制造出一种新的_______________ ,以满足人类生活的需求。
(2)图中序号④所示过程叫做____________ ,该过程遵循的碱基互补配对原则不同于翻译过程的是_________ (请将模板碱基写在前)
(3)若大量扩增目的基因,则用的是_________ 技术(写出全称),该过程需要的聚合酶的特点是______________ 。
(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,在图中⑨过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体___________ 的精子。
(5)为获得较多的受精卵进行研究,图中⑥过程一般用激素对供体做_________ 处理。为提高培育成功率,进行⑩过程之前,要对___________ 动物做___________ 处理。若图中的卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢,则其在⑧之前需进行体外培养到___________ 期方能受精。
(6)用胚胎分割技术处理发育到____________ 期或囊胚期的早期胚胎,可获得同卵双胎或多胎。若是对囊胚进行处理,要注意将___________ 均等分割。
(1)图中①~⑤所示的生物工程为
(2)图中序号④所示过程叫做
(3)若大量扩增目的基因,则用的是
(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产,在图中⑨过程之前,要对精子进行筛选,保留含性染色体
(5)为获得较多的受精卵进行研究,图中⑥过程一般用激素对供体做
(6)用胚胎分割技术处理发育到
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【推荐2】下图是某种动物蛋白质工程示意图,请据图回答下列问题:
(1)目前,蛋白质工程中难度最大的是图中编号______ 所示的过程。
(2)与该动物细胞中胰岛素基因相比,过程④获得的目的基因不含有非编码区和______ 。 ⑤过程中所用到的载体必须具备能够在宿主细胞内复制并稳定保存、具有特定的限制酶切割位点、__________ 等条件。
(3)若⑥过程所得的卵母细胞是从屠宰母畜的卵巢中获得的,则体外受精前的⑧过程表示在体外人工培养卵母细胞到________________ 期。要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行⑨过程即_______________ 处理。
(4)目前常用的措施是将构建的基因表达载体导入到该种动物的受精卵中,导入方法是________________ ,选择受精卵作为受体细胞的主要原因是_____________________ 。
(5)为提高培育成功率,进行⑩过程之前,需对胚胎进行质量检查,应取部分滋养层细胞,以_______________________ 为探针进行DNA分子杂交检测;⑩过程中,生产上常用_______________ 期的早期胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体,可以使用________ 技术。
(1)目前,蛋白质工程中难度最大的是图中编号
(2)与该动物细胞中胰岛素基因相比,过程④获得的目的基因不含有非编码区和
(3)若⑥过程所得的卵母细胞是从屠宰母畜的卵巢中获得的,则体外受精前的⑧过程表示在体外人工培养卵母细胞到
(4)目前常用的措施是将构建的基因表达载体导入到该种动物的受精卵中,导入方法是
(5)为提高培育成功率,进行⑩过程之前,需对胚胎进行质量检查,应取部分滋养层细胞,以
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【推荐3】重组DNA技术使实验上从基因到蛋白和从蛋白到基因都成为可能。从少量的纯化蛋白可得到部分的氨基酸序列,这为获取目的基因提供了序列信息。一旦该基因被分离并测序,它的蛋白编码序列就可用于设计一个DNA分子,然后在遗传工程化细胞中产生蛋白质产物。这样就可以在生化或者结构上研究该蛋白质了。该基因还可以经过操作后转入细胞或者生物体内研究其功能。据图回答下列问题:
(1)由图可知,获取目的基因序列的方法可以是________________________ 。
(2)如果从cDNA文库中获取目的基因,需要对cDNA文库进行筛选,其原因是_______________ 。
(3)大肠杆菌作为受体细胞,一般用Ca2+进行处理,使之变成_______ 细胞。
(4)PCR扩增基因的前提是:根据已知目的基因的序列合成__________ ,还需要在________ 的作用下进行延伸。
(5)合成的探针与转基因生物的基因组DNA杂交,如果显示出杂交带,则表明__________ 。
(6)该技术使科学家可以设计一个新的DNA,进而产生大量蛋白质,研究其功能,这就是二代基因工程—____________ ,它是以蛋白质分子的________ 及其与生物_________ 的关系作为基础。
(1)由图可知,获取目的基因序列的方法可以是
(2)如果从cDNA文库中获取目的基因,需要对cDNA文库进行筛选,其原因是
(3)大肠杆菌作为受体细胞,一般用Ca2+进行处理,使之变成
(4)PCR扩增基因的前提是:根据已知目的基因的序列合成
(5)合成的探针与转基因生物的基因组DNA杂交,如果显示出杂交带,则表明
(6)该技术使科学家可以设计一个新的DNA,进而产生大量蛋白质,研究其功能,这就是二代基因工程—
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【推荐1】HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。鸡卵清蛋白是由输卵管上皮细胞中卵清蛋白基因特异性表达后分泌至输卵管内,参与构成鸡蛋清的蛋白质。下图是利用基因工程技术制备HA蛋白鸡输卵管生物反应器的过程。几种可供选择的限制酶识别序列如下:回答下列问题。
(1)①过程利用禽流感病毒的RNA进行逆转录,获得能表达出HA蛋白的目的基因,该过程需要使用的酶是____ ,原料是____ 。
(2)通过设计引物,可在PCR特异性扩增目的基因时,使目的基因两端加入相应的限制酶识别序列,进而使目的基因能够与鸡卵清蛋白基因启动子、载体正确连接,构建基因表达载体。为了实现上述目的,用于扩增目的基因的引物应具有____ 限制酶识别序列;此外,引物还需满足的条件有____ 。②过程需使用的限制酶有____ 。
(3)使用鸡卵清蛋白基因启动子的目的是____ 。
(4)上述过程获得的HA蛋白可作为疫苗的主要成分对鸡进行免疫,使鸡获得抵抗禽流感病毒的能力,这属于____ (填“免疫预防”“免疫诊断”或“免疫治疗”)。
(1)①过程利用禽流感病毒的RNA进行逆转录,获得能表达出HA蛋白的目的基因,该过程需要使用的酶是
(2)通过设计引物,可在PCR特异性扩增目的基因时,使目的基因两端加入相应的限制酶识别序列,进而使目的基因能够与鸡卵清蛋白基因启动子、载体正确连接,构建基因表达载体。为了实现上述目的,用于扩增目的基因的引物应具有
(3)使用鸡卵清蛋白基因启动子的目的是
(4)上述过程获得的HA蛋白可作为疫苗的主要成分对鸡进行免疫,使鸡获得抵抗禽流感病毒的能力,这属于
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【推荐2】下列几幅图与基因工程有关。图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列,图2表示目的基因及限制酶切割位点,图3表示目的基因上的DNA片段,图4表示质粒。请回答下列问题:
(1)获得图2中目的基因的方法除PCR技术外,还有________________ 。
(2)采用PCR扩增目的基因的原理是______________________ ,图2中A、B、C、D 4种单链DNA片段中,有________ 两种引物(DNA复制方向由5′→3′)。
(3)图3为目的基因中的某一片段,下列有关叙述正确的是________ 。
a.该片段的基本骨架由脱氧核糖与磷酸交替连接而成
b.该片段含A—T碱基对比较多,故其结构比较稳定
c.若利用PCR扩增该片段,则需解旋酶将①氢键全部解开
d.若该片段复制6次,则需要碱基A的数量至少是252个
(4)在构建目的基因表达载体时,用PstⅠ、EcoRⅠ两种酶同时切割目的基因和质粒,是为了防止一种酶切割时产生________ ,从图2切割下目的基因需要消耗________ 个水分子。不选用限制酶PstⅠ和Hind Ⅲ同时对质粒和目的基因进行切割的原因是________________ 。
(1)获得图2中目的基因的方法除PCR技术外,还有
(2)采用PCR扩增目的基因的原理是
(3)图3为目的基因中的某一片段,下列有关叙述正确的是
a.该片段的基本骨架由脱氧核糖与磷酸交替连接而成
b.该片段含A—T碱基对比较多,故其结构比较稳定
c.若利用PCR扩增该片段,则需解旋酶将①氢键全部解开
d.若该片段复制6次,则需要碱基A的数量至少是252个
(4)在构建目的基因表达载体时,用PstⅠ、EcoRⅠ两种酶同时切割目的基因和质粒,是为了防止一种酶切割时产生
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【推荐3】转基因抗虫棉在世界范围内被广泛种植,有效控制了对Bt抗虫蛋白敏感的棉铃虫的种群数量,但其生态安全性一直是人们关注的焦点。
(1)为培育转基因抗虫棉,需筛选、获取Bt抗虫蛋白基因(Bt基因)作为________ 。在实际种植过程中,棉铃虫会对转基因抗虫棉产生抗性,请提出延缓棉铃虫对Bt抗虫蛋白产生抗性的一项措施_________ 。
(2)为评价转基因抗虫棉的生态安全性,科研人员探究不同Bt抗虫蛋白通过棉铃虫对天敌大草蛉生长发育的影响。用添加不同Bt抗虫蛋白的饲料分别饲养棉铃虫幼虫,一段时间后检测大草蛉的相关指标,结果如下表。(甲组和乙组分别添加Bt抗虫蛋白CrylAc、Cry2Ab)。
①从生态系统的组成成分划分,大草蛉属于________ 。Bt抗虫蛋白可沿着________ 对大草蛉产生潜在影响。
②请从以下不同种类的棉铃虫中,选择甲组适宜的实验材料________ (填选项)。
A.对Bt抗虫蛋白CrylAc敏感的棉铃虫
B.对Bt抗虫蛋白CrylAc有抗性的棉铃虫
C.注射Bt抗虫蛋白CrylAc的棉铃虫
③该实验的空白对照组放入的有________ 。
④上表结果说明,不同Bt抗虫蛋白通过棉铃虫对大草蛉的生长发育无明显影响,判断依据是________ 。
(3)科研人员还准备利用对Bt抗虫蛋白不敏感的绿盲蝽,进一步探究Bt抗虫蛋白对其天敌大草蛉生长发育的间接影响。请说明该方案不选择对Bt抗虫蛋白敏感的绿盲蝽进行实验的理由_______ 。
(1)为培育转基因抗虫棉,需筛选、获取Bt抗虫蛋白基因(Bt基因)作为
(2)为评价转基因抗虫棉的生态安全性,科研人员探究不同Bt抗虫蛋白通过棉铃虫对天敌大草蛉生长发育的影响。用添加不同Bt抗虫蛋白的饲料分别饲养棉铃虫幼虫,一段时间后检测大草蛉的相关指标,结果如下表。(甲组和乙组分别添加Bt抗虫蛋白CrylAc、Cry2Ab)。
分组 检测指标 | 空白对照组 | 甲对照组 | 甲组 | 乙对照组 | 乙组 |
4龄幼虫质量(mg) | 12.19 | 12.59 | 12.47 | 12.59 | 11.54 |
幼虫发育至蛹所经历的时间(d) | 12.47 | 13.04 | 12.97 | 13.41 | 13.04 |
化蛹率(%) | 64.48 | 64.00 | 61.63 | 63.00 | 60.91 |
蛹至羽化所经历的时间(d) | 13.01 | 13.52 | 14.01 | 13.09 | 13. 11 |
羽化率(%) | 60.85 | 60.00 | 59.15 | 58.37 | 57.63 |
②请从以下不同种类的棉铃虫中,选择甲组适宜的实验材料
A.对Bt抗虫蛋白CrylAc敏感的棉铃虫
B.对Bt抗虫蛋白CrylAc有抗性的棉铃虫
C.注射Bt抗虫蛋白CrylAc的棉铃虫
③该实验的空白对照组放入的有
④上表结果说明,不同Bt抗虫蛋白通过棉铃虫对大草蛉的生长发育无明显影响,判断依据是
(3)科研人员还准备利用对Bt抗虫蛋白不敏感的绿盲蝽,进一步探究Bt抗虫蛋白对其天敌大草蛉生长发育的间接影响。请说明该方案不选择对Bt抗虫蛋白敏感的绿盲蝽进行实验的理由
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