回答下列(一)、(二)小题:
(一)科研人员从长期受到废弃油脂污染的淤泥中得43%种油脂降解菌A和B,现对2种油脂降解菌进行培养分析,请回答下列问题:
(1)科研人员配置了含有0.3%NH4NO3、0.05%KH2PO4、0.05%K2HPO4、0.02%MgSO4、微量元素液和含废弃油脂等的培养基,从功能上来看,该培养基属于____________ 培养基,加入0.05%KH2PO4、0.05%K2HPO4的目的是____________ 。
(2)如图所示,科研人员称取了5g淤泥样品,将其加入45mL无菌水中,进行梯度稀释,在5个平板上分别用____________ 取0.1ml稀释液,涂布均匀后适当培养,5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160,则1g淤泥中活菌数约为____________ 个(保留小数点后两位)。用这种方法统计得到的数值往往____________ (填“偏大”或“偏小”)。
(二)水母体内含有绿色荧光蛋白,拟利用转基因技术将水母的绿色荧光蛋白基因转入矮牵牛中培育绿色荧光矮牵牛。请回答下列相关问题:
(3)将水母细胞破碎后提取____________ ,在逆转录酶的作用下形成单链互补DNA,然后利用PCR技术扩增,再与pBIN质粒连接形成重组质粒,并导入大肠杆菌构建成____________ 。将文库中的大肠杆菌进行单菌落分离后,选择具有____________ 的菌落,进而获得目的基因。
(4)野生pBIN质粒不能将其上的DNA片段整合到植物细胞的染色体DNA上,因此需使野生pBIN质粒接入____________ 片段。在构建重组质粒时,选用两种不同的限制性内切核酸酶联合酶切的目的是_________ 。
(5)若利用农杆菌转化法进行矮牵牛的活体目的基因导入,通常需对叶片、子叶等感染部位进行损伤处理。若将农杆菌菌液加在未进行损伤处理的腋芽处,也可完成转化,原因是_____________ 。植物组织完成转化后常用抗生素进行除菌,选用抗生素种类时需要考虑____________ 。抗生素的使用也会对外植体产生一定的毒害作用。如果选用发根农杆菌介导目的基因导入的同时会引起外植体产生大量的不定根,选择不定根的____________ 进行继代培养2-3次就可在不使用抗生素的情况下获得无菌苗。
(一)科研人员从长期受到废弃油脂污染的淤泥中得43%种油脂降解菌A和B,现对2种油脂降解菌进行培养分析,请回答下列问题:
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(二)水母体内含有绿色荧光蛋白,拟利用转基因技术将水母的绿色荧光蛋白基因转入矮牵牛中培育绿色荧光矮牵牛。请回答下列相关问题:
(3)将水母细胞破碎后提取
(4)野生pBIN质粒不能将其上的DNA片段整合到植物细胞的染色体DNA上,因此需使野生pBIN质粒接入
(5)若利用农杆菌转化法进行矮牵牛的活体目的基因导入,通常需对叶片、子叶等感染部位进行损伤处理。若将农杆菌菌液加在未进行损伤处理的腋芽处,也可完成转化,原因是
更新时间:2023-03-16 10:31:27
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非选择题-实验题
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适中
(0.65)
【推荐1】根据有关微生物的知识,分析回答问题。
(1)当水体过于纯净时,硝化细菌会形成休眠体,这种休眠体被称为________ 。
(2)对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液,可利用选择性培养基进行微生物筛选。筛选硝化细菌的培养基成份包括__________________________________ (供选:葡萄糖、纤维素、牛肉膏、(NH4)2SO4、KNO3、无机盐、琼脂、伊红-美蓝染料、H2O),制备培养基时,灭菌与调pH值的先后顺序是_______________ 。
(3)如利用上述培养基筛选大肠杆菌菌落,则应另外添加的成份是_________ ,菌落特征为_______________________________ 。
(4)将采自养殖池中的水样1ml稀释100倍,然后吸取稀释后的水样1ml,接种于上述硝化细菌选择性培养基上培养,接种所使用的工具是___________ 。一段时间后观察菌落并计数,实验重复三次结果如图。该养殖池每毫升水含有硝化细菌_______ 个。
(1)当水体过于纯净时,硝化细菌会形成休眠体,这种休眠体被称为
(2)对于混有硝化细菌、蓝细菌和大肠杆菌的悬浮液,可利用选择性培养基进行微生物筛选。筛选硝化细菌的培养基成份包括
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(4)将采自养殖池中的水样1ml稀释100倍,然后吸取稀释后的水样1ml,接种于上述硝化细菌选择性培养基上培养,接种所使用的工具是
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非选择题-解答题
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适中
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【推荐2】济南外国语学校国际课程中心8名同学组成的JNFILS团队斩获2021iGEM(国际基因工程机器大赛)全球金奖,该团队以“细菌纤维素口罩”作为本次iCEM的研究课题,以应对目前因新冠疫情大量使用口罩导致的环境问题。
(1)细菌纤维素的合成是一个通过大量多酶复合体系(纤维素合成酶)精确调控的多步反应过程。在生产过程中为了提高效率,采用__________ 对该酶系进行固定化;同时为了充分发挥固定化酶的优势,除了探究固定酶作用所需的适宜条件外,还需探究__________________________________ 。
(2)细菌(醋酸菌)合成纤维素是一个低能耗的绿色过程。在培养基中以无毒的水溶性D葡萄糖为________ ,在__________ 的培养条件下,通过静态培养在培养基液体与空气界面之间由无病原的醋酸菌生产出纤维素。
(3)自然条件下,微生物可以将细菌纤维素降解成小分子糖而不造成环境污染。为提高分解效率而进行纤维素分解菌筛选时,需要在培养基中加入__________ 染料,原理是__________ ,而纤维素分解菌可以产生纤维素酶,分解纤维素使菌落周围出现透明圈。
(1)细菌纤维素的合成是一个通过大量多酶复合体系(纤维素合成酶)精确调控的多步反应过程。在生产过程中为了提高效率,采用
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
【推荐3】染料废水是一种难处理的工业废水。研究发现,活性污泥中能筛选出对蓝色的2BLN染料废水具有高效脱色能力的菌株,它们通过降解具生物毒性的分散蓝2BLN而降低废水危害。图1表示目标菌株GN-1的筛选和脱色实验流程,图2表示GN-1菌株接种量对脱色效果影响的实验结果。______ (答出2点)等物质,培养基制作后需使用______ 法进行灭菌。图1中含分散蓝2BLN的液体培养基甲的作用是______ 。
(2)图中所用到的接种方法是______ 。所示菌落①至④中,目标菌株GN-1应从菌落______ (选填编号)中挑取。分离和纯化培养须使用固体培养基,理由是______ 。
(3)随着染料废水中分散蓝2BLN初始浓度的持续增加,CN-1菌株的脱色能力可能怎样变化?______ 。阐述分析过程______ 。根据图2所示结果,综合考虑脱色效果(6d脱色率达90%以上为合格)和经济效益,CN-1菌株的最佳接种量为______ 。
(1)该实验需要制作多种培养基,这些培养基的配方不同,但一般都含有水、无机盐、
(2)图中所用到的接种方法是
(3)随着染料废水中分散蓝2BLN初始浓度的持续增加,CN-1菌株的脱色能力可能怎样变化?
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
【推荐1】尿素是一种重要的农业肥料,经微生物分解后能更好地被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示。
将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到100 mL。实验过程如图所示:
回答下列问题:
(1)该培养基为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型包括________________ (答出两点即可)。能筛选出目的菌的原因是__________________ 。
(2)图中将细菌接种到固体培养基上时,采用的方法是__________________ 。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定:在培养基中加入________ 指示剂,接种并培养初步筛选的菌种,若指示剂变成________ 色,则可说明该菌种能够分解尿素。
(3)在实验中,下列材料或用具需要灭菌的是_____ (填序号),需要消毒的是______ (填序号)。
①培养细菌的培养基与培养皿 ②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行________ 处理后,才能倒掉。
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 琼脂 |
1.4 g | 2.1 g | 0.2 g | 10 g | 1 g | 15 g |
将表中物质溶解后,用蒸馏水定容到100 mL。实验过程如图所示:
回答下列问题:
(1)该培养基为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型包括
(2)图中将细菌接种到固体培养基上时,采用的方法是
(3)在实验中,下列材料或用具需要灭菌的是
①培养细菌的培养基与培养皿 ②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手
(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
名校
【推荐2】番茄灰霉病菌严重影响番茄生产,枯草芽孢杆菌可以产生对多种病原菌具有抑制作用的蛋白质。为探究枯草芽孢杆菌能否用于番茄灰霉病的生物防治,研究者设计了相关实验。回答下列问题:
(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时,取适量______ 菌液涂布于固体培养基上,将无菌滤纸片(直径5mm)在______ 菌液中浸泡后覆盖于固体培养基中心,数秒后取出滤纸片,培养皿倒置培养后测量______ 大小以判定抑菌效果。
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用______ (填“静置”或“摇床震荡”)培养。培养过程中抽样检测活菌数量时,应采用______ 法,其原因是________________________ 。
(3)利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定枯草芽孢杆菌的抗菌蛋白分子量时,SDS的作用是________________________ 。
(1)检测枯草芽孢杆菌对番茄灰霉病菌的抑制作用时,取适量
(2)枯草芽孢杆菌为好氧微生物,液体培养时应采用
(3)利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定枯草芽孢杆菌的抗菌蛋白分子量时,SDS的作用是
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
【推荐3】琼脂是制备固体培养基必须的材料,当实验室大量使用固体培养基时,需要把废弃的固体培养基分解,避免污染环境。糖蜜发酵废液的黑褐色色素所造成的色泽污染是环境保护所不容许的,为了脱除这种黑褐色色素,需要筛选能产生脱色酶的菌体。在从琼脂生产厂区土壤中筛选目的菌时,获得了既能分解琼脂,又具有脱色能力的分解菌。请回答下列问题:
(1)在筛选分解琼脂的细菌时,应选择以_________ 为唯一碳源的固体培养基,从功能上分析,此培养基属于____________ 。
(2)在分离细菌时,接种环通过_____________ 方法灭菌。在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是_________________________________________ 。
(3)鉴定具有脱色能力的琼脂分解菌时,需在基本培养基中加入_____________ ,适宜条件下培养一段时间后,发现培养基上形成圆形凹穴,有的凹穴周围出现透明圈,原因是______________________________ 。
(4)进行污染物脱色时,也可以将脱色酶进行固定,该技术的优点有___________ (至少两点)。
(1)在筛选分解琼脂的细菌时,应选择以
(2)在分离细菌时,接种环通过
(3)鉴定具有脱色能力的琼脂分解菌时,需在基本培养基中加入
(4)进行污染物脱色时,也可以将脱色酶进行固定,该技术的优点有
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非选择题-实验题
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适中
(0.65)
【推荐1】泡菜是一种历史悠久的大众喜爱的发酵蔬菜制品。研究发现,乳酸菌是泡菜生产中的主要生产菌种,但不同乳酸菌的繁殖周期不同。蔬菜在腌制过程的某些阶段也会产生较多的亚硝酸盐。为了获得生产周期短、亚硝酸盐含量低的泡菜,某兴趣小组进行了菌种的筛选(过程如图所示)和相关研究。(假设不同乳酸菌在一个繁殖周期中产生酸量相近。)
(1)乳酸菌的培养条件除了适宜的温度、pH之外,还必须保证_____ 条件。初筛、复筛宜选择_____ (固体或液体)培养基。将乳酸菌接种培养时常采用_____ 方法。
(2)当复筛的培养基中出现_____ 即可接种到斜面保藏。增殖培养易选择_____ (固体或液体)培养基。
(3)从实验的目的分析,性能测定主要是测量确定乳酸菌的_____ 和蔬菜腌制过程中_____ 。
(4)在腌制过程中,坛中会出现溶液量增多现象,主要原因是_____ 。
(5)封坛一段时间后,开坛测定亚硝酸盐含量的变化,并进行实验数据的记录筛选合适的乳酸菌作为菌种来制作泡菜。最佳食用泡菜的时间,应该选择_____ 时间段食用。
(1)乳酸菌的培养条件除了适宜的温度、pH之外,还必须保证
(2)当复筛的培养基中出现
(3)从实验的目的分析,性能测定主要是测量确定乳酸菌的
(4)在腌制过程中,坛中会出现溶液量增多现象,主要原因是
(5)封坛一段时间后,开坛测定亚硝酸盐含量的变化,并进行实验数据的记录筛选合适的乳酸菌作为菌种来制作泡菜。最佳食用泡菜的时间,应该选择
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非选择题-解答题
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适中
(0.65)
【推荐2】为建设社会主义新农村,解决农村生产生活垃圾处理的问题,某办事处给出了如下处理方案:
(1)某团队想通过富集培养从土壤中筛选出降解玉米秸秆的复合菌:
①为避免杂菌污染,取样时应注意什么?_____ (至少答出2点)。
②富集培养的目的是_____ 。
(2)若要筛选出能分解包装塑料的细菌应使用_____ 培养基(按功能分),其作用原理是_____ 。
(3)化工废水经专业化处理,无污染物后才能排入河流。调查发现,某湖泊附近有一家化工厂,长期向湖偷排工业废水,造成湖中沉积了大量污染物,其中环境污染物M(一种含有C、H、O、N的有机物)难以降解。为了从中分离获得能降解M的细菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
①据表判断,其中成分M是作为_____ 起作用,培养基_____ (填“甲”或“乙”)可用于分离能降解M的目的菌。
②在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191.该过程中采取的接种方法是_____ ,1mL原土壤样液中的细菌数量为_____ ×108个;与血细胞计数板计数法相比,此计数方法测得的活细菌数较_____ 。
生活垃圾分类 | 处理方案 |
厨余垃圾、作物秸秆 | 堆肥或生产沼气 |
包装类垃圾 | 卫生填埋 |
有害垃圾、化工废水 | 专业化处理 |
(1)某团队想通过富集培养从土壤中筛选出降解玉米秸秆的复合菌:
①为避免杂菌污染,取样时应注意什么?
②富集培养的目的是
(2)若要筛选出能分解包装塑料的细菌应使用
(3)化工废水经专业化处理,无污染物后才能排入河流。调查发现,某湖泊附近有一家化工厂,长期向湖偷排工业废水,造成湖中沉积了大量污染物,其中环境污染物M(一种含有C、H、O、N的有机物)难以降解。为了从中分离获得能降解M的细菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
成分 | 无机盐 | 淀粉 | M | 琼脂 | 水 |
培养基甲 | + | + | + | - | + |
培养基乙 | + | + | + | + | + |
①据表判断,其中成分M是作为
②在5个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191.该过程中采取的接种方法是
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适中
(0.65)
【推荐3】回答下列(一)、(二)小题
(一)红曲酒是中国传统名酒,有消食活血、健脾燥胃的功效。我国福建、浙江、台湾等部分地区有用糯米酿制红曲酒进而酿制红曲醋的习俗。回答与酿酒和制醋有关的问题:
(1)为获得优良酿酒红曲霉菌株,可将原菌株诱变处理后制成较稀浓度的悬液,通过___________ 法获得单菌落,进而筛选出优良菌株。将优良菌株接种在液体培养基中,置于___________ 上振荡,进行扩大化培养。
(2)蒸煮过的糯米淀粉在红曲霉菌分泌的___________ 作用下水解成葡萄糖,为酒精发酵提供原料。配制酵母菌悬液时,要让酵母迅速发挥作用,可___________ ,混匀后放置片刻,待悬液中___________ 即可。
(3)在红曲醋生产中,将适量的红曲酒、水、___________ 等混合,通过添加谷壳糠等制成松散的发酵料,有利于充分发酵。除菌株种类及温度、pH等环境因素外,影响红曲醋风味的因素还有___________ (写出两点)。
(二)野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥一花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力,再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,流程如下图。据图回答:
(4)该过程用到的细胞工程技术有_____________ 、_____________ 。
(5)过程①所需的酶是_____________ ,过程②中PEG的作用是_____________ ,经过②操作后,需筛选出融合的杂种细胞,显微镜下观察融合的活细胞中有黑芥叶肉细胞的_____________ (填写细胞器名称)存在可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(6)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的_____________ 以维持原生质体的形态和活性。原生质体经过细胞壁再生,进而脱分化形成_____________ 。
(7)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和双亲植株的根尖,制成装片,在显微镜下观察并比较染色体的_____________ 。将杂种植株栽培在含有_____________ 的环境中,可筛选出具有高抗性的杂种植株。
(一)红曲酒是中国传统名酒,有消食活血、健脾燥胃的功效。我国福建、浙江、台湾等部分地区有用糯米酿制红曲酒进而酿制红曲醋的习俗。回答与酿酒和制醋有关的问题:
(1)为获得优良酿酒红曲霉菌株,可将原菌株诱变处理后制成较稀浓度的悬液,通过
(2)蒸煮过的糯米淀粉在红曲霉菌分泌的
(3)在红曲醋生产中,将适量的红曲酒、水、
(二)野生黑芥具有黑腐病的抗性基因,而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相关工程技术可以获得抗黑腐病杂种黑芥一花椰菜植株。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力,再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,流程如下图。据图回答:
(4)该过程用到的细胞工程技术有
(5)过程①所需的酶是
(6)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的
(7)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和双亲植株的根尖,制成装片,在显微镜下观察并比较染色体的
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【推荐1】基因工程的第一步是筛选获取目的基因,利用PCR技术获取目的基因是一种常用的手段。图示是某DNA分子经酶切后,DNA片段自身环化并利用PCR技术扩增的部分过程。
(1)PCR与生物体内DNA复制过程不同,PCR反应中解旋不需要_________ 酶催化而是通过_________ 实现的,因此PCR技术使用的DNA聚合酶必须是_________ 的。
(2)如果在某基因组中定位了一个目的基因X,其碱基序列未知,但已知X临近区域的一段DNA序列,此时可利用图示方法进行目的基因的筛选和扩增。作用于图示多个限制酶切点的限制酶种类一般应_________ (填“相同”或“不同”)。操作时根据图中的_________ 设计引物,将含有目的基因的DNA片段克隆出来。
(3)实践中也常用RT-PCR技术扩增目的基因,这种技术是以RNA为模板。若利用RT-PCR技术扩增胰岛素基因,应选择_________ 细胞提取RNA。
(1)PCR与生物体内DNA复制过程不同,PCR反应中解旋不需要
(2)如果在某基因组中定位了一个目的基因X,其碱基序列未知,但已知X临近区域的一段DNA序列,此时可利用图示方法进行目的基因的筛选和扩增。作用于图示多个限制酶切点的限制酶种类一般应
(3)实践中也常用RT-PCR技术扩增目的基因,这种技术是以RNA为模板。若利用RT-PCR技术扩增胰岛素基因,应选择
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适中
(0.65)
名校
【推荐2】人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原,经加工后形成含两条肽链(A、B链)的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法:“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段,利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因,表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据图分析并回答下列问题:
(1)由于_____ ,“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体_____ 细胞中的mRNA,再由mRNA经逆转录得到的胰岛素基因,_____ (填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”)法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。
(2)如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接,在设计PCR引物时可添加限制酶_____ 的识别序列,PCR引物与识别序列的_____ (填“3’或5′”)端结合。通过上述方法获得人的胰岛素基因后,需要通过PCR技术进行扩增,若计划用1个胰岛素基因为模板获得m(m大于2)个胰岛素基因,则消耗的引物总量是_____ 个。引物序列中的GC含量越高,对PCR过程中的_____ 步骤影响最大。
(3)PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定,下列叙述中正确的有_____。(多选)
(4)科学家利用蛋白质工程技术,研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素,获得赖脯胰岛素基因的途径是:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的_____ 序列。
(1)由于
(2)如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接,在设计PCR引物时可添加限制酶
(3)PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定,下列叙述中正确的有_____。(多选)
A.PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶,该酶主要在退火过程起作用 |
B.待测样品中DNA分子的大小和构象、凝胶的浓度等都会影响DNA在电泳中的迁移速率 |
C.进行电泳时,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 |
D.琼脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测 |
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(0.65)
解题方法
【推荐3】探究以商业化转基因酿酒酵母发酵制备食品级乳酸的可行性,为采用转基因商业酿酒酵母制备乳酸提供理论及技术基础。回答下列问题:
(1)为获取富含乳酸脱氢酶A(LDHA)基因(目的基因),可通过检索___ 获取其编码序列,用化学合成法制备得到。由于牛与酿酒酵母在密码子使用偏好性方面存在很大差异,根据酿酒酵母密码子使用频率表,将牛LDHA基因中的密码子对应序列替换为___ 对应序列,编码的氨基酸序列___ 。
(2)获取LDHA基因后利用PCR技术进行扩增,经___ 鉴定后,切割凝胶,再将凝胶溶解,回收其中包含LDHA基因的DNA片段。然后使用限制酶切割___ ,将带有___ 的酶切产物纯化回收后,用DNA连接酶连接。再将重组的克隆载体导入感受态大肠杆菌中,经___ 后,提取质粒,经KpnⅠ及SacⅠ双酶切后,LDHA基因片段克隆到表达载体中,由来源于酿酒酵母的___ 启动其表达。
(3)为检测转基因酿酒酵母产LDHA 酶活性,将筛选到的转基因酿酒酵母菌株及非转基因酿酒酵母菌株按106个/mL浓度___ 于含200g/L葡萄糖的YPD液体培养基中,于30℃、200r/min及___ 条件下培养24h后,检测LDHA酶活性。实验结果为___ ,说明LDHA基因已成功导入酿酒酵母中并在实验条件下可成功获得表达。
(4)转基因及非转基因酿酒酵母菌株的发酵能力如图所示。非转基因酿酒酵母___ (填“具有”或“不具有”)发酵产乳酸的能力,判断依据是___ 。图中结果表明LDHA基因的导入对酿酒酵母发酵能力的影响是___ 。
(1)为获取富含乳酸脱氢酶A(LDHA)基因(目的基因),可通过检索
(2)获取LDHA基因后利用PCR技术进行扩增,经
(3)为检测转基因酿酒酵母产LDHA 酶活性,将筛选到的转基因酿酒酵母菌株及非转基因酿酒酵母菌株按106个/mL浓度
(4)转基因及非转基因酿酒酵母菌株的发酵能力如图所示。非转基因酿酒酵母
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