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题型:非选择题-解答题 难度:0.65 引用次数:132 题号:19648253
高等植物中的乙烯生物合成受到发育阶段和环境的共同调节,其中乙烯合成酶在这一过程中起到至关重要的作用。拟南芥乙烯合成酶相关基因主要有两种:AtACS4和AtACS5。为研究以上基因表达水平与发育阶段的关系,科学家将AtACS4和AtACS5的启动子分别和GUS报告基因融合,并转入拟南芥。图1为使用的载体图谱,kanr为卡那霉素抗性基因,Ampr为氨苄青霉素抗性基因。回答下列问题:
             
(1)构建重组DNA分子:取足量的拟南芥叶片并提取_____,通过_____得到两种启动子片段的拷贝,为使启动子正确插入载体,在获得的启动子两端分别引入__________两种不同限制酶的识别序列,再用_____酶处理启动子与表达载体获得重组DNA分子。
(2)农杆菌转化拟南芥:将两种重组DNA分子分别导入农杆菌,后将转化的农杆菌分别置于添加了_____的LB液体培养基中进行培养。为确定培养所得农杆菌确实转入了重组DNA分子,可以通过_____进行检测。后将转基因农杆菌与消毒后的拟南芥叶片共同培养,将共同培养后的烟草叶片转入含有营养物以及__________培养基(填写培养基名称)中脱菌、诱导培养和筛选。经过发芽和生根培养后的组培苗需进行炼苗,炼苗的作用是_____
(3)拟南芥乙烯合成酶的表达特点:使用GUS染液染色后,具GUS基因表达产物的部位会现蓝色,用肉眼或在显微镜下可看到,且在一定程度下根据染色深浅可反映出GUS基因的表达水平。使用GUS染液对不同发育阶段的两种转基因拟南芥进行染色。AtACS4和AtACS5的启动子和GUS报告基因融合后进行转化获得的转基因拟南芥经过GUS染色后的实验结果依次为图2的A、B。可以推测AtACS4和AtACS5的表达特点为_____

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【推荐1】为了增加油菜种子的含油量,研究人员尝试将酶D基因与转运肽基因相连,一起导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。回答下列问题。
   
(1)三种限制酶(ClaI、SacI、XbaI)的切点 如图所示,则用________酶处理两个基因后,可得到_______(填图中字母)端相连的融合基因。
(2)将上述融合基因插入如图所示Ti质粒的T-DNA中,构建_______并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_______的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落,再利用液体培养基振荡培养,得到用于转化的侵染液。
(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间,此过程的目的是________,进一步筛选后获得转基因油菜细胞。
(4)用________法可检测转基因油菜细胞中的融合基因是否成功表达。
2023-08-10更新 | 38次组卷
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【推荐2】番茄是一种营养丰富、经济价值较高的双子叶作物,在我国广泛种植。中国科学院遗传与发育生物学研究所李传友团队以红果番茄为材料,提出了一种利用多重基因编辑技术,靶向敲除红果番茄中控制三类相应色素合成或代谢的关键基因,快速定向创制七种不同果色番茄的策略。下图是科研人员用CRISPR/Cas9基因编辑技术定点敲除目标基因的示意图,请回答下列问题:
   
(1)研究发现CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌细胞内,推测该系统在细菌细胞内的作用是__________
(2)CRISPR/Cas9基因编辑技术中,sgRNA是根据目标DNA人工设计合成的向导RNA,与核酸酶Cas9蛋白结合形成复合物。CRISPR/Cas9系统能精准识别相关基因,依据的原理是__________发生碱基互补配对;Cas9蛋白可催化__________键断裂,剪切特定DNA片段。若要在目标DNA中插入其他基因,可以利用__________将它们连接起来。
(3)研究人员利用携带着已完成编辑基因的__________侵染番茄植株,最终获得不同果色的番茄。该方法的优点是可以使目的基因导入植物细胞,并将其插入到植物细胞的染色体DNA上,从而使目的基因在植物细胞中__________
(4)经CRISPR/Cas9基因编辑技术改造的基因结构变化属于__________(填“定向”或“不定向”)基因突变,编辑是否成功可以通过提取相关基因进行PCR扩增后经__________鉴定。
2023-06-06更新 | 164次组卷
非选择题 | 适中 (0.65)
【推荐3】为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(图1),拟将其与质粒(图2)重组再借助农杆菌导入菊花中。请回答相关问题:

(1)研究者从其他植物中克隆出花色基因C时采用了PCR技术扩增,其中需要有一段____的核苷酸序列,以便根据这一序列合成___种引物除花色基因C引物之外,扩增过程中还需要_________________
(2)为防止目的基因的自身环化和任意连接,有同学认为可以用 EcoRI和BamHI两种酶切割含C基因的DNA和图中质粒,有同学认为不妥,理由是________________
(3)最后需要将重组质粒导入菊花细胞研究者采用了农杆菌转化法,这是利用了农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)的特性:_______________。若导入的是菊花体细胞,还需要通过_____________才能得到菊花植株。
2019-12-05更新 | 175次组卷
共计 平均难度:一般