人的血清蛋白(HSA)具有重要的医用价值,研究人员欲用乳腺生物反应器来大量生产HSA。下图所示为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322,图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Neor表示新霉素抗性基因,箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。请据图回答问题:
(1)人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外,还必须有__________ (答出两点)等,
(2)若选用牛作为受体动物,可将人血清蛋白基因与__________ 等调控组件重组在一起,通过__________ 方法将目的基因导入牛的受精卵中,然后使其发育成转基因牛。
(3)据图分析,在构建基因表达载体时,选择__________ 作为切割质粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和载体的正确连接效率,其原因是____________________ 。
(4)为了排除普通受体细胞(未导入质粒)、空质粒受体细胞(导入pBR322质粒而非重组质粒)的干扰,目的基因导入后,进行了进一步筛选:制备甲、乙两种培养基,甲培养基含新霉素,乙培养基含新霉素和氨苄青霉素,含重组质粒的受体细胞在甲培养基上__________ (填“能”或“不能”)生存,在乙培养基上__________ (填“能”或“不能”)生存。
(5)据下图分析,利用PCR技术获取HSA基因时,应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的__________ ,需扩增__________ 次后得到HSA目的基因。
(1)人工构建pBR322质粒除了含特定限制酶切割位点、标记基因、复制原点外,还必须有
(2)若选用牛作为受体动物,可将人血清蛋白基因与
(3)据图分析,在构建基因表达载体时,选择
(4)为了排除普通受体细胞(未导入质粒)、空质粒受体细胞(导入pBR322质粒而非重组质粒)的干扰,目的基因导入后,进行了进一步筛选:制备甲、乙两种培养基,甲培养基含新霉素,乙培养基含新霉素和氨苄青霉素,含重组质粒的受体细胞在甲培养基上
(5)据下图分析,利用PCR技术获取HSA基因时,应选择甲、乙、丙、丁四种引物中的
更新时间:2023-08-23 20:32:02
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【推荐1】DNA亲子鉴定测试原理是:从被测试者的血滴或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA,用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段,放进凝胶内,用电泳推动DNA小片段分离,再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起,然后利用特别的染料在X光下,便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。反复几次过程,每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码,便可得到超过99.9%的分辨概率。 请回答:
(1)限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段,这主要体现了酶的( )
A.专一性 B.高效性 C.多样性 D.作用条件温和
(2)“探针”是指( )
A.某一个完整的目的基因
B.目的基因片段的特定DNA
C.与目的基因相同的特定双链DNA
D.与目的基因互补的特定单链DNA
(3)条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。为什么?________
(4)样品DNA经PCR技术扩增,可以获取大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA分子半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图)。在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活动的生物体。
①图中A过程表示________ 。
②某样品DNA中共含3000个碱基对,碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1/2,现欲得到100个与样品相同的DNA,至少需要向试管中加入__________ 个腺嘌呤脱氧核苷酸。
③A过程也称为DNA的变性,此过程在温度高达90~95℃时才能完成,说明DNA分子具有________ 性。
④由图中信息分析可知,催化C过程的酶是________ ,它与正常细胞里的酶区别是__
(1)限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段,这主要体现了酶的
A.专一性 B.高效性 C.多样性 D.作用条件温和
(2)“探针”是指
A.某一个完整的目的基因
B.目的基因片段的特定DNA
C.与目的基因相同的特定双链DNA
D.与目的基因互补的特定单链DNA
(3)条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。为什么?
(4)样品DNA经PCR技术扩增,可以获取大量DNA分子克隆。其原理是利用DNA分子半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图)。在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活动的生物体。
①图中A过程表示
②某样品DNA中共含3000个碱基对,碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1/2,现欲得到100个与样品相同的DNA,至少需要向试管中加入
③A过程也称为DNA的变性,此过程在温度高达90~95℃时才能完成,说明DNA分子具有
④由图中信息分析可知,催化C过程的酶是
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【推荐2】科研工作者将柽柳匙叶草液泡膜IIa+/K+逆向转运蛋白基因(TaNHX2基因)转移到棉花细胞内,获得了耐盐新品种。图1是含有目的基因的DNA片段,Sau3AI、EcoRI、BamHI为三种限制酶(Sau3AI、BamHI切割形成的黏性末端相同);图2是农杆菌Ti质粒结构示意图。请分析回答问题:
(1)目前常用_____ 方法从柽柳叶草基因组中获取TaNHX2基因,该方法需有分别与两条模板链结合的2种引物,引物是_____ 。
(2)计划用EcoR1分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒,以构建基因表达载体。
①构建表达载体的目的是_____ 需要的工具酶是_____ 。
②本方案的缺陷是:可能导致_____ 以及目的基因与质粒的反向连接。
③为避免上述缺陷,最佳方案是用_____ 切割图1的DNA,用_____ 切割图2质粒。
(3)目的基因成功导入受体细胞后,还需要利用_____ 技术才能得到转基因棉花苗,这一技术的原理是_____ 。
(4)要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果,检测方法是_____ 。
(1)目前常用
(2)计划用EcoR1分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒,以构建基因表达载体。
①构建表达载体的目的是
②本方案的缺陷是:可能导致
③为避免上述缺陷,最佳方案是用
(3)目的基因成功导入受体细胞后,还需要利用
(4)要在个体生物学水平上检测耐盐新品种的培育效果,检测方法是
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解题方法
【推荐3】对某冠状病毒进行核酸检测其实就是对病毒的遗传物质RNA进行检测。目前主流方法为实时荧光RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应)法。为检测某人是否感染了该冠状病毒,需要进行以下相关操作:①分析PCR扩增结果;②从组织样本中提取RNA;③RT(逆转录)成cDNA;④采集样本(咽拭子或鼻拭子);⑤利用PCR扩增DNA片段。回答下列问题:
(1)若要得到正确的核酸检测结果,正确的操作顺序应该是______________________ (用数字序号表示)。核酸检测样本多采集于咽、鼻,这些部位存在多种微生物,提取物中核酸种类可能有多种,但通过PCR技术可专一地对该冠状病毒的核酸序列进行扩增,原因是_________________________________ 。
(2)操作⑤中,需设计2种引物,需要提供引物的原因是______________________ ;复性时温度的设定是该步操作成败的关键,而复性的作用是______________________ 。
(3)PCR扩增时,在加入引物的同时还需加入一个特异性荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团,如图所示:探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;______________________ 在催化子链延伸时,还具有外切酶活性,它可以沿着___________ (填“5'→3'”或“3'→5'”)方向将探针酶切,使报告基团和淬灭基团分离,随着DNA扩增次数的增加,荧光的强度会逐渐增大,从而实现荧光信号的变化与____________________ 的形成完全同步。
(4)除了荧光检测法,还可以通过____________________ 法分析PCR扩增结果。
(1)若要得到正确的核酸检测结果,正确的操作顺序应该是
(2)操作⑤中,需设计2种引物,需要提供引物的原因是
(3)PCR扩增时,在加入引物的同时还需加入一个特异性荧光探针,其两端分别标记一个报告基团和一个淬灭基团,如图所示:探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;
(4)除了荧光检测法,还可以通过
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【推荐1】根据下列所给材料回答问题:
材料一、把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌的质粒上,然后导入大肠杆菌内,产生出人的胰岛素。
材料二、有人把蜘蛛产生丝腺蛋白的基因转入羊的细胞中,在羊分泌的乳汁中加入某种物质后,可抽出细丝,这种细丝可望用作手术的缝合线。
(1)材料一中把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌质粒上的目的是___________ ,同时使目的基因能够表达和发挥作用。所用的工具酶有___________ 。
(2)一种生物的基因在另一种生物体内能够表达,而不影响其他基因的表达,这说明基因具有一定的___________ ;同时可以说明各种生物共用一套___________ 。
(3)材料一和材料二中的目的基因往往采取___________ 方法获得,因此在构建基因表达载体时在目的基因的首端一定要连接上___________ 。
(4)材料二中的转基因羊称为___________ 。目前科学家除了用乳山羊生产丝腺蛋白外,还能够产生抗凝血酶、血清白蛋白等重要药物。
(5)材料二所用的缝合线与普通缝合线相比,其优点是______________________ 。
材料一、把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌的质粒上,然后导入大肠杆菌内,产生出人的胰岛素。
材料二、有人把蜘蛛产生丝腺蛋白的基因转入羊的细胞中,在羊分泌的乳汁中加入某种物质后,可抽出细丝,这种细丝可望用作手术的缝合线。
(1)材料一中把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌质粒上的目的是
(2)一种生物的基因在另一种生物体内能够表达,而不影响其他基因的表达,这说明基因具有一定的
(3)材料一和材料二中的目的基因往往采取
(4)材料二中的转基因羊称为
(5)材料二所用的缝合线与普通缝合线相比,其优点是
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【推荐2】人的血清白蛋白在临床上需求量很大。将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,就可以利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白。大致过程如下:
(1)获得人血清白蛋白基因后,常利用__________ 技术,在体外将其大量扩增。要使人的血清白蛋白基因在奶牛乳腺细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、____________ 、__________ 、标记基因等部分。
(2)通过①采集的精子需放在一定浓度的肝素溶液中进行培养,其目的是______________ 。
(3)要实现过程②超数排卵,应在性成熟母牛发情期某一阶段用__________ 处理,然后在恰当时期进行胚胎收集,即______________ 。
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛,在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意将____________________ 均等分割。一般培养至________ 或__________ 期,再进行胚胎移植。
(5)过程⑤要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是____________________________ 。
(1)获得人血清白蛋白基因后,常利用
(2)通过①采集的精子需放在一定浓度的肝素溶液中进行培养,其目的是
(3)要实现过程②超数排卵,应在性成熟母牛发情期某一阶段用
(4)若要一次获得多只完全相同的转基因牛,在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,应注意将
(5)过程⑤要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是
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解题方法
【推荐3】牛凝乳酶是一种在未断奶的小牛胃中发现的蛋白酶,它能促使牛奶凝结来生产奶酪。然而,牛凝乳酶的供应量有限,科学家将编码牛凝乳酶的基因导入大肠杆菌中,以希望实现牛凝乳酶的批量生产,其中目的基因和质粒的示意图如图所示,NcoⅠ、EcoRⅠ、XhoⅠ表示限制酶。回答下列问题:(1)科学家从牛胃黏膜细胞中提取mRNA,通过______ 形成cDNA,再利用PCR技术获得目的基因,上述两个过程所需要的原料是______ (填“相同”或“不同”)的。
(2)根据图中信息分析,为了将目的基因和质粒重组,需要使用限制酶和______ 酶,其中应选择的两种限制酶是______ ,不选择另外一种限制酶的原因是______ 。
(3)将目的基因和质粒连接形成重组质粒,然后导入大肠杆菌中。选择大肠杆菌作为受体细胞,是因为大肠杆菌具有______ (答出2点)等特点。为初步筛选重组质粒是否导入大肠杆菌细胞中,需要在培养基中添加______ (填“氨苄青霉素”或“四环素”)。
(4)通过实验获取了A、B两组成功导入了重组质粒的大肠杆菌,将这两组大肠杆菌在适宜条件下培养一段时间,将两组大肠杆菌表达出的产物加入牛奶中,发现A组牛奶未凝结,B组牛奶出现凝结现象,该结果说明了______ 。
(2)根据图中信息分析,为了将目的基因和质粒重组,需要使用限制酶和
(3)将目的基因和质粒连接形成重组质粒,然后导入大肠杆菌中。选择大肠杆菌作为受体细胞,是因为大肠杆菌具有
(4)通过实验获取了A、B两组成功导入了重组质粒的大肠杆菌,将这两组大肠杆菌在适宜条件下培养一段时间,将两组大肠杆菌表达出的产物加入牛奶中,发现A组牛奶未凝结,B组牛奶出现凝结现象,该结果说明了
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【推荐1】我国有1/3的成年人因乳糖酶(LCT)分泌少,不能完全消化牛奶中的乳糖,食用牛奶后会出现腹泻等不适症状。为解决这一乳糖不耐受问题,我国科学家利用转基因技术和克隆技术将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,培育出了可产低乳糖牛奶的拉克斯牛,培育过程如图所示,A~C表示操作步骤。回答下列问题:
(图中胚胎成纤维细胞是由胚胎干细胞经分裂分化后产生的一类仍具有分裂能力的细胞)
(1)科学家常用PCR技术特异性地快速扩增肠乳糖酶基因,若将1个含肠乳糖酶基因的DNA分子经PCR反应循环3次后,共需要消耗引物_____ 个。PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定,在凝胶中DNA分子的迁移速率与_____ (答出两点)有关。通过步骤A获取重组质粒T时,除需要限制酶BamHI外,还需要_____ 等酶的参与。
(2)重组质粒T中,除肠乳糖酶基因、标记基因、终止子、复制原点外,还必须有_____ (填“乳腺蛋白基因的启动子”或“肠乳糖酶基因的启动子”);选择该启动子的原因是_____ ,实现步骤B常用的方法是_____ ,步骤C涉及的技术称为_____ 。
(3)动物基因工程中常用受精卵作为受体细胞,而在拉克斯牛的培育过程中选择胚胎成纤维细胞作为受体细胞,此举有何意义:_____ 。
(4)下列对拉克斯牛的分析中哪几项是正确的?_____。
(5)在牛胚胎移植前,可用分割针从囊胚的_____ 细胞取样进行性别鉴定,将检验合格的胚胎移植到经_____ 处理的受体母牛子宫内,经发育、妊娠得到克隆牛。若现已确定LCT基因插入到了牛染色体上,却未获得较低乳糖含量的乳汁,为进一步确定原因,可采用_____ 技术进行检测。
(图中胚胎成纤维细胞是由胚胎干细胞经分裂分化后产生的一类仍具有分裂能力的细胞)
(1)科学家常用PCR技术特异性地快速扩增肠乳糖酶基因,若将1个含肠乳糖酶基因的DNA分子经PCR反应循环3次后,共需要消耗引物
(2)重组质粒T中,除肠乳糖酶基因、标记基因、终止子、复制原点外,还必须有
(3)动物基因工程中常用受精卵作为受体细胞,而在拉克斯牛的培育过程中选择胚胎成纤维细胞作为受体细胞,此举有何意义:
(4)下列对拉克斯牛的分析中哪几项是正确的?_____。
A.拉克斯牛体内的神经、肌肉和乳腺细胞中均含有乳糖酶基因 |
B.除乳糖酶基因外,拉克斯牛的核基因与图中黑白花奶牛相同 |
C.对图中拉克斯牛进行克隆繁育,无法获得雄拉克斯牛 |
D.导入了乳糖酶基因的重组细胞2,一定能培育出拉克斯牛 |
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【推荐2】油菜籽中蛋白质和油脂的相对含量,与酶1和酶2对共同底物丙酮酸的竞争有关。 酶1促进蛋白质的合成,酶2促进油脂的合成。通过生物工程技术对油菜进行改造,以得到含有基因A的油菜,流程图如下。请据图作答:
(1)上述改造过程中运用的生物工程技术是__________ 。
(2)通过__________ 、__________ 或人工化学合成等方法,都可获取目的基因A。过程①中的处理方法为__________ 。
(3)过程④中要防止杂菌污染的原因是_______ 。通过过程④得到的油菜植株中,所有细胞_______ (填“一定”、“不一定”或“一定不”)含有基因A。
(4)已知转录时基因A的模板链与酶1基因的模板链互补。相对普通油菜,含基因A的油菜籽粒油脂含量显著提高,请分析其机理:______________________________ 。
(1)上述改造过程中运用的生物工程技术是
(2)通过
(3)过程④中要防止杂菌污染的原因是
(4)已知转录时基因A的模板链与酶1基因的模板链互补。相对普通油菜,含基因A的油菜籽粒油脂含量显著提高,请分析其机理:
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【推荐3】如图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程,请据图回答问题。
(1)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:_________ (至少答出两项)
(2)“织女”繁育过程中实施的基因工程包括四个基本操作步骤,其核心步骤是_______ ,该步骤最关键的调控组件是_______ 。实现②过程的常用方法是_______ 。
(3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎,常采用的方法是进行_______ 。把⑤送入⑥时,⑤的最佳时期是_______ ,⑦和某些转基因羊可通过分泌乳汁来生产人类所需药物,这类的转基因动物被称为_______ 。对早期胚胎④或⑤是否必须进行性别鉴定?_______ 。
(1)克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:
(2)“织女”繁育过程中实施的基因工程包括四个基本操作步骤,其核心步骤是
(3)从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎,常采用的方法是进行
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【推荐1】叶绿体是植物基因工程的理想受体,将外源基因整合到叶绿体DNA中往往能够获得高效表达,由此发展出叶绿体基因工程。回答下列问题:
(1)叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体,表达载体中除目的基因外,还必须有启动子、终止子、复制原点、______ 等。启动子的作用是__________ 。叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性,若目的基因来源于真核生物,则往往选用目的蛋白对应cDNA片段而不是基因组DNA片段作为目的基因,原因是________ 。
(2)将目的基因导入烟草细胞叶绿体时,要穿过多层生物膜,因而常将包裹在金属颗粒表面的表达载体轰击进入叶绿体,提高转化效率,该方法称为_______________ 。
(3)检测目的基因是否成功导入受体细胞的叶绿体时,实验组以待测的样本DNA为模板,使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增,同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组,将以_______ 为模板的组别作为阴性对照组。若________ ,则说明目的基因导入成功。
(4)转入叶绿体中的基因_______ (填“会”或“不会”)随花粉传递给子代,理由是__________________ 。
(1)叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体,表达载体中除目的基因外,还必须有启动子、终止子、复制原点、
(2)将目的基因导入烟草细胞叶绿体时,要穿过多层生物膜,因而常将包裹在金属颗粒表面的表达载体轰击进入叶绿体,提高转化效率,该方法称为
(3)检测目的基因是否成功导入受体细胞的叶绿体时,实验组以待测的样本DNA为模板,使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增,同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组,将以
(4)转入叶绿体中的基因
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【推荐2】下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答:
(1)在基因工程中,A表示目的基因,如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,B表示构建的基因表达载体,其组成除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及____________ 等,其中启动子是__________ 酶识别和结合的部位。
(2)B→C为转基因绵羊的培育过程,其中②过程常用的方法是______________ ,使用的绵羊受体细胞为________ ,④用到的生物技术主要有动物细胞培养和____________ 。
(3)B→D为转基因抗虫棉的培育过程,其中③过程常用的方法是______________ ,要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出检测目的基因是否转录出了mRNA,方法是___________ ,以____________________ 作为探针。
(1)在基因工程中,A表示目的基因,如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,B表示构建的基因表达载体,其组成除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及
(2)B→C为转基因绵羊的培育过程,其中②过程常用的方法是
(3)B→D为转基因抗虫棉的培育过程,其中③过程常用的方法是
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【推荐3】新冠病毒有多重抗原决定簇,可以刺激机体产生多种抗体。有些非中和抗体结合新冠病毒后反而有利于病毒进入巨噬细胞内。单克隆抗体可有效预防病毒感染,且不依赖于患者基础免疫状态,是一种极具潜力的新冠肺炎预防手段。回答下列问题:
(1)核酸检测是新冠病毒常见的一种检测技术,该技术的原理是__________ 。
(2)新冠病毒刚流行时,医生通常用新冠治愈者的血清治疗病人,但后来不提倡捐献血浆治疗病人,可能的原因是___________ 。
(3)新冠病毒的S蛋白具有很强的抗原性,若已知S蛋白的氨基酸序列,可采用__________ 方法获得S蛋白基因。
(4)制备单克隆抗体的过程中,涉及的动物细胞工程技术有___________ ;在扩大培养之前,有两次筛选,其中第二次筛选的目的是__________ 。
(5)有人说若感染过新冠病毒就会终身免疫,你的观点是__________ ,理由是__________ (写出一种即可)。
(1)核酸检测是新冠病毒常见的一种检测技术,该技术的原理是
(2)新冠病毒刚流行时,医生通常用新冠治愈者的血清治疗病人,但后来不提倡捐献血浆治疗病人,可能的原因是
(3)新冠病毒的S蛋白具有很强的抗原性,若已知S蛋白的氨基酸序列,可采用
(4)制备单克隆抗体的过程中,涉及的动物细胞工程技术有
(5)有人说若感染过新冠病毒就会终身免疫,你的观点是
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