小鼠毛囊中表达F蛋白。为研究F蛋白在毛发生长中的作用,利用基因工程技术获得了F基因敲除的突变型纯合体小鼠,简称f小鼠,突变基因用f表示。f小鼠皮毛比野生型小鼠长50%,表现出毛绒绒的样子,其它表型正常。(注:野生型基因用++表示;f杂合子基因型用+f表示)
回答下列问题:
(1)F基因敲除方案如图甲。在F基因的编码区插入了一个DNA片段P,引起F基因产生______ ,导致mRNA提前出现终止密码子,使得合成的蛋白质因为缺失了______ 而丧失活性。要达到此目的,还可以对该基因的特定碱基进行______ 和______ 。(2)从野生型、f杂合子和f小鼠组织中分别提取DNA,用限制酶HindⅢ酶切,进行琼脂糖电泳,用DNA探针检测。探针的结合位置如图甲,检测结果如图乙,则f小鼠和f杂合子对应的DNA片段分别位于第______ 泳道和第______ 泳道。(3)g小鼠是长毛隐性突变体(gg),表型与f小鼠相同。f基因和g基因位于同一条常染色体上。f杂合子小鼠与g小鼠杂交,若杂交结果是______ ,则g和f是非等位基因;若杂交结果是______ ,则g和f是等位基因。(注:不考虑交叉互换;野生型基因用++表示;g杂合子基因型用+g表示)
(4)确定g和f为等位基因后,为进一步鉴定g基因,分别提取野生型(++)、g杂合子(+g)和g小鼠(gg)的mRNA,反转录为cDNA后用(2)小题同样的DNA探针和方法检测,结果如图丙。g小鼠泳道没有条带的原因是______ 。组织学检查发现野生型和g杂合子表达F蛋白,g小鼠不表达F蛋白,因此推测F蛋白具有的作用______ 。
回答下列问题:
(1)F基因敲除方案如图甲。在F基因的编码区插入了一个DNA片段P,引起F基因产生
(4)确定g和f为等位基因后,为进一步鉴定g基因,分别提取野生型(++)、g杂合子(+g)和g小鼠(gg)的mRNA,反转录为cDNA后用(2)小题同样的DNA探针和方法检测,结果如图丙。g小鼠泳道没有条带的原因是
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(已下线)2024年1月浙江省普通高校招生选考科目考试生物学试题押新高考卷 生物技术与工程-备战2024年高考生物临考题号押题(新高考通用)第三章 基因工程【速记清单】- 2023-2024学年高二生物单元速记·巧练(人教版2019选择性必修3)2024年高考生物真题完全解读(1月浙江卷)
更新时间:2024-03-04 16:57:58
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【推荐1】我国有7 0000年的种植水稻的历史,如今水稻已经成为我国重要作物。生产实践中获得具有杂种优势的杂合种子是提高水稻产量的重要途径,同时寻找抗病、耐旱、耐盐、耐高温基因并对其调控机制进行深入研究对水稻遗传改良具有重要意义。
(1)自然条件下,科研人员从水稻品种ZH11中筛选出雄性不育突变体(hms1)。利用雄性不有突变体进行杂交水稻育种的优势是_______ 。将野生型ZH11和突变体(hms1)杂交,F1自交,F2中突变型(hms1)占1/4,说明突变性状为______ 。
(2)科研人员获得纯合稻瘟病抗性突变体M,并对野生型(WT)和抗性突变体M的R基因进行测序分析,结果如图1。据图1可知,与WT中R基因序列相比,抗性突变体M的R基因发生了_______ 缺失。该突变基因控制合成的蛋白质中,氨基酸______ 发生改变,导致该蛋白质空间结构改变,生理功能丧失。
(3)科学家从拟南芥中获取功能基因HARDY(HRD),并将其转入水稻中过量表达,从而提高了水稻的水分利用效率。在干旱条件下,野生型(WT)和HRD增强表达的转基因水稻植株A、B(HRDA、HRDB)的根生物量(根系干重)及叶片蒸腾速率的测定结果如图所示。据图分析转基因水稻耐旱能力增强的原因包括______ 和_______ 。
(4)某研究所提取水稻品种nonabokra的两个耐盐基因qskc - 1和Saltol并导入普通水稻zhonghuall,从而筛选出成功整合的耐盐水稻植株(两个耐盐基因都表达才表现为高耐盐性状)。如图表示两个基因随机整合的三种情况,让三株转基因水稻植株自交,后代中高耐盐性状的个体所占比例最大的是_____ 。(5)研究人员获得两个耐高温突变体甲、乙(二者均为隐性突变个体),已知耐高温突变体乙的隐性突变基因位于水稻3号染色体上,为探究两种突变体是否为同一基因突变导致,让两种突变体杂交后, F1再自交(不考虑染色体互换),观察并统计F2的表型及比例。
①若F2均耐高温,说明_____ ;
②若_____ ,说明两突变基因是非同源染色体上的非等位基因;
③若F2不耐高温:耐高温≈1:1,说明两突变基因是同源染色体上的非等位基因。
(1)自然条件下,科研人员从水稻品种ZH11中筛选出雄性不育突变体(hms1)。利用雄性不有突变体进行杂交水稻育种的优势是
(2)科研人员获得纯合稻瘟病抗性突变体M,并对野生型(WT)和抗性突变体M的R基因进行测序分析,结果如图1。据图1可知,与WT中R基因序列相比,抗性突变体M的R基因发生了
(3)科学家从拟南芥中获取功能基因HARDY(HRD),并将其转入水稻中过量表达,从而提高了水稻的水分利用效率。在干旱条件下,野生型(WT)和HRD增强表达的转基因水稻植株A、B(HRDA、HRDB)的根生物量(根系干重)及叶片蒸腾速率的测定结果如图所示。据图分析转基因水稻耐旱能力增强的原因包括
(4)某研究所提取水稻品种nonabokra的两个耐盐基因qskc - 1和Saltol并导入普通水稻zhonghuall,从而筛选出成功整合的耐盐水稻植株(两个耐盐基因都表达才表现为高耐盐性状)。如图表示两个基因随机整合的三种情况,让三株转基因水稻植株自交,后代中高耐盐性状的个体所占比例最大的是
①若F2均耐高温,说明
②若
③若F2不耐高温:耐高温≈1:1,说明两突变基因是同源染色体上的非等位基因。
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【推荐2】果蝇的正常翅(D)对短翅(d)为显性,D、d位于常染色体上。抗杀虫剂(E)对不抗杀虫剂(e)为显性,E、e不位于Y染色体上。现将一只正常翅抗杀虫剂雌果蝇与一只短翅不抗杀虫剂雄果蝇杂交,F1的表裂及数量如下表:回答下烈问题:
(1)只考虑翅型性状,F1果蝇的基因型为______ ,翅型基因与杀虫剂抗性基因的遗传不一定遵循自由组合定律,理由是______ 。
(2)同时考虑两对相对性状,选择杀虫剂抗性性状不同的果蝇,通过一次杂交确定E、e所处染色体的位置,应从F1中选择______ 进行杂交,得F2,观察F2的表型,并统计比例(不考虑基因突变、交叉互换)。
①若F2雌雄中均为正常翅抗杀虫剂:短翅抗杀虫剂:正常翅不抗杀虫剂:短翅不抗杀虫剂=3:1:3:1,则_____ 。
②若F2_____ ,则E、e基因位于常染色体上,且与D、d在同一条染色体上
③若F2_____ ,则E、e基因位于X染色体上。
(3)结果表明,E、e基因位于X染色体上,F1随机交配获得子代后施加杀虫剂,子代中纯合短翅抗杀虫剂的雌性个体所占的比例为_____ 。
F1 | 正常翅抗杀虫剂雌 | 正常翅抗杀虫剂雄 | 正常翅不抗杀虫剂雌 | 正常翅不抗杀虫剂雄 |
402 | 399 | 401 | 398 |
(2)同时考虑两对相对性状,选择杀虫剂抗性性状不同的果蝇,通过一次杂交确定E、e所处染色体的位置,应从F1中选择
①若F2雌雄中均为正常翅抗杀虫剂:短翅抗杀虫剂:正常翅不抗杀虫剂:短翅不抗杀虫剂=3:1:3:1,则
②若F2
③若F2
(3)结果表明,E、e基因位于X染色体上,F1随机交配获得子代后施加杀虫剂,子代中纯合短翅抗杀虫剂的雌性个体所占的比例为
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【推荐3】正常的水稻体细胞染色体数为2n=24。现有一种三体水稻,细胞中7号染色体的同源染色体有三条,即染色体数为2n+1=25。下图为该三体水稻细胞及其产生的配子类型和比例示意图(6、7为染色体标号;A为抗病基因,a为非抗病基因;①~④为四种类型配子)。已知染色体数异常的配子(如①、③)中雄配子不能参与受精作用,其他配子均能参与受精作用。请回答:
(1)若减数分裂过程没有发生基因突变和同源染色体非姐妹染色单体之间的交换,且产生的配子均有正常活性,则配子②和③________________ (填“可能”或“不可能”)来自一个初级精母细胞,配子④的7号染色体上的基因为________________ 。
(2)某同学取该三体的幼嫩花药观察减数分裂过程,若某次级精母细胞形成配子①,则该次级精母细胞中染色体条数为___________________ 。若取该三体的花药离体培养,所获得的单倍体中抗病个体与非抗病个体比例为_________ 。
(3)现用非抗病水稻(aa)和该三体抗病水稻(AAa)杂交,已测得正交实验的F1中抗病水稻:非抗病水稻=5:1。请预测反交实验的F1中,抗病水稻所占比例为________ ,抗病水稻个体的基因型为______________ 。
(4)香稻的香味由隐性基因(b)控制,普通稻的无香味由显性基因(B)控制,等位基因B、b可能位于6号染色体上,也可能位于7号染色体上。现有正常的香稻和普通稻,7号染色体三体的香稻和7号染色体三体的普通稻等四种纯合子种子供选用,请你设计杂交实验并预测实验结果,从而定位等位基因B、b的染色体位置。
实验步骤:
①选择正常的香稻为父本和三体的普通稻为母本杂交得F1。
②用正常的香稻为母本与F1中三体的普通稻为父本杂交。
③统计子代中的香稻和普通稻的性状分离比。
实验结果:
①若子代中的香稻和普通稻的性状分离比为__________ ,则等位基因(B、b)位于7号染色体上。
②若子代中的香稻和普通稻的性状分离比为__________ ,则等位基因(B、b)位于6号染色体上。
(1)若减数分裂过程没有发生基因突变和同源染色体非姐妹染色单体之间的交换,且产生的配子均有正常活性,则配子②和③
(2)某同学取该三体的幼嫩花药观察减数分裂过程,若某次级精母细胞形成配子①,则该次级精母细胞中染色体条数为
(3)现用非抗病水稻(aa)和该三体抗病水稻(AAa)杂交,已测得正交实验的F1中抗病水稻:非抗病水稻=5:1。请预测反交实验的F1中,抗病水稻所占比例为
(4)香稻的香味由隐性基因(b)控制,普通稻的无香味由显性基因(B)控制,等位基因B、b可能位于6号染色体上,也可能位于7号染色体上。现有正常的香稻和普通稻,7号染色体三体的香稻和7号染色体三体的普通稻等四种纯合子种子供选用,请你设计杂交实验并预测实验结果,从而定位等位基因B、b的染色体位置。
实验步骤:
①选择正常的香稻为父本和三体的普通稻为母本杂交得F1。
②用正常的香稻为母本与F1中三体的普通稻为父本杂交。
③统计子代中的香稻和普通稻的性状分离比。
实验结果:
①若子代中的香稻和普通稻的性状分离比为
②若子代中的香稻和普通稻的性状分离比为
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【推荐1】下面是人体胰岛素基因控制合成胰岛素的示意图,据图回答:
(1)高度螺旋化的染色体上的基因由于①____________ 过程受阻而不能表达。
(2)与DNA分子相比,RNA分子中特有的化学组成是____________________ 。
(3) 决定丙氨酸的密码子是_________ ,将氨基酸运输到核糖体的工具是____________ 。
(4)②过程中,一个mRNA上结合多个核糖体的意义是_____________________________ 。
(5)已知①过程中,某mRNA中鸟嘌呤占29%,鸟嘌呤与尿嘧啶之和占碱基总数的54%,其模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤占19%,则该mRNA对应的DNA区段中腺嘌呤所占的碱基比例为___________ 。
(1)高度螺旋化的染色体上的基因由于①
(2)与DNA分子相比,RNA分子中特有的化学组成是
(3) 决定丙氨酸的密码子是
(4)②过程中,一个mRNA上结合多个核糖体的意义是
(5)已知①过程中,某mRNA中鸟嘌呤占29%,鸟嘌呤与尿嘧啶之和占碱基总数的54%,其模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤占19%,则该mRNA对应的DNA区段中腺嘌呤所占的碱基比例为
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【推荐2】核基因P53是细胞的“基因组卫士”。当人体细胞DNA受损时,P53基因被激活,通过图示相关途径最终修复或清除受损DNA,从而保持细胞基因组的完整性。请回答下列问题。
(1)人体细胞中P53基因的存在对生物体内遗传物质的稳定性具有重要意义,从进化的角度来说这是________ 的结果。
(2)图中①是________ 过程,该过程控制合成的P53蛋白通过调控某DNA片段合成lncRNA,进而影响过程①,该调节机制属于________ 调节。
(3)细胞中lncRNA是________ 酶催化的产物,之所以被称为非编码长链,是因为它不能用于________ 过程,但其在细胞中有重要的调控作用。
(4)图中P53蛋白可启动修复酶系统,在修复断裂的DNA分子时常用的酶是________ 。据图分析,P53蛋白还具有________ 功能。
(5)某DNA分子在修复后,经测定发现某基因的第1201位碱基由G变成了T,从而导致其控制合成的蛋白质比原蛋白质少了许多氨基酸,原因是原基因转录形成的相应密码子发生了转变,可能的变化情况是________ (用序号和箭头表示)。
①AGU(丝氨酸)②CGU(精氨酸)③GAG(谷氨酸)④GUG(缬氨酸)⑤UAA(终止密码)⑥UAG(终止密码)
(1)人体细胞中P53基因的存在对生物体内遗传物质的稳定性具有重要意义,从进化的角度来说这是
(2)图中①是
(3)细胞中lncRNA是
(4)图中P53蛋白可启动修复酶系统,在修复断裂的DNA分子时常用的酶是
(5)某DNA分子在修复后,经测定发现某基因的第1201位碱基由G变成了T,从而导致其控制合成的蛋白质比原蛋白质少了许多氨基酸,原因是原基因转录形成的相应密码子发生了转变,可能的变化情况是
①AGU(丝氨酸)②CGU(精氨酸)③GAG(谷氨酸)④GUG(缬氨酸)⑤UAA(终止密码)⑥UAG(终止密码)
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【推荐3】下图为某种真菌细胞中有关物质合成示意图, ①~⑤表示生理过程,据图分析回答:
(1)由图可知,真菌细胞中转录发生的场所为_____ ,催化过程①需要的酶有_____ 。
(2)物质Ⅱ的基本组成单位是_____ ,它含_____ 个游离的磷酸基团。
(3)过程③中,一个mRNA上结合多个核糖体的意义是_____ ,因而提高了蛋白质合成效率。
(4)用某药物处理细胞后发现,细胞质基质中RNA含量显著减少,由此推测该药物抑制了_____ (填序号)过程。
(5)miRNA是真核细胞中的一类内源性的具有调控功能但不编码蛋白质的短序RNA,它可组装进沉默复合体,识别某些特定的mRNA(靶RNA)进而调控基因的表达(如右图)。由图推测,miRNA可能的作用原理是通过引导沉默复合体干扰____ 识别密码子,进而阻止_____ 过程。
(1)由图可知,真菌细胞中转录发生的场所为
(2)物质Ⅱ的基本组成单位是
(3)过程③中,一个mRNA上结合多个核糖体的意义是
(4)用某药物处理细胞后发现,细胞质基质中RNA含量显著减少,由此推测该药物抑制了
(5)miRNA是真核细胞中的一类内源性的具有调控功能但不编码蛋白质的短序RNA,它可组装进沉默复合体,识别某些特定的mRNA(靶RNA)进而调控基因的表达(如右图)。由图推测,miRNA可能的作用原理是通过引导沉默复合体干扰
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【推荐1】由于基因突变,导致蛋白质中的一个赖氨酸发生了改变。根据下表和图回答问题:
(1)图中 I 过程叫_____ ,II 过程发生的场所是_____ 。
(2)如果 DNA 分子一条链的碱基排序是…TACTGCTCGTCC…,则以该链为模板形成的 mRNA 最终指导合成的肽链中氨基酸的序列是____________ 。
(3)除赖氨酸以外,图解中 X 是密码子表中哪一种氨基酸的 可能性最小__________________ 。 原因是 _____________________________ 。
(4)某植物体细胞发生上述突变后,基因型发生改变 (含2对基因),控制的花色为蓝花,该细胞经植物组织培养所得植株再自交, 其子代为1紫:6红:9蓝。若将这一子代中的红花植株的花粉两两融合,培养出的融合植株花色的表现型和基因型种类分别有_____ 、_____ 种。
第一个字 母 | 第二个字母 | 第三个字 母 | |||
U | C | A | G | ||
A | 异亮氨 酸 | 苏氨 酸 | 天冬酰 胺 | 丝氨 酸 | U |
异亮氨 酸 | 苏氨 酸 | 天冬酰 胺 | 丝氨 酸 | C | |
异亮氨 酸 | 苏氨 酸 | 赖氨酸 | 精氨 酸 | A | |
甲硫氨 酸 | 苏氨 酸 | 赖氨酸 | 精氨 酸 | G |
(1)图中 I 过程叫
(2)如果 DNA 分子一条链的碱基排序是…TACTGCTCGTCC…,则以该链为模板形成的 mRNA 最终指导合成的肽链中氨基酸的序列是
(3)除赖氨酸以外,图解中 X 是密码子表中哪一种氨基酸的 可能性最小
(4)某植物体细胞发生上述突变后,基因型发生改变 (含2对基因),控制的花色为蓝花,该细胞经植物组织培养所得植株再自交, 其子代为1紫:6红:9蓝。若将这一子代中的红花植株的花粉两两融合,培养出的融合植株花色的表现型和基因型种类分别有
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【推荐2】瘦素( Leptin)是脂肪细胞分泌的一种蛋白质激素,能抑制食欲、增加能量代谢、抑制脂肪合成从而减少脂肪积累。当健康者外周脂肪增多时,瘦素分泌增多并作用于下丘脑,通过图示途径参与血脂代谢的调节。
(1)组成瘦素的基本单位是____________ 。瘦素通过____________ 进行运输,作用于下丘脑中的靶细胞。
(2)激素X是____________ ,其促进了脂肪细胞内的____________ (过程①/过程②)。其与激素Y的关系称之为____________ (协同/拮抗)作用。
(3)研究发现,大多数肥胖者体内瘦素浓度高于正常人,其体重却没有降低,因此推测肥胖者体内存在着“瘦素抵抗”。推测肥胖者出现瘦素抵抗的原因可能有____________ 。
A.瘦素受体基因突变 B.下丘脑神经细胞上瘦素受体数量不足
C.瘦素进入下丘脑受阻 D.激素X促进脂肪细胞分泌瘦素
(4)正常情况下,激素Y会促进瘦素的分泌,而瘦素可以抑制激素Y分泌,二者之间形成__________ 调节机制。研究还发现,瘦素受体基因不仅可以在下丘脑细胞中大量表达,还可以在各种免疫细胞包括吞噬细胞、B细胞、T细胞均可以表达,也可以在睾丸、卵巢、哺乳期乳腺等细胞表达。根据以上描述可以得出瘦素在____________ 和____________ 过程中发挥着重要作用。
(1)组成瘦素的基本单位是
(2)激素X是
(3)研究发现,大多数肥胖者体内瘦素浓度高于正常人,其体重却没有降低,因此推测肥胖者体内存在着“瘦素抵抗”。推测肥胖者出现瘦素抵抗的原因可能有
A.瘦素受体基因突变 B.下丘脑神经细胞上瘦素受体数量不足
C.瘦素进入下丘脑受阻 D.激素X促进脂肪细胞分泌瘦素
(4)正常情况下,激素Y会促进瘦素的分泌,而瘦素可以抑制激素Y分泌,二者之间形成
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【推荐3】人类囊性纤维病的发生与氯离子的跨膜运输有关请据图回答问题:
(1)由图1可知,氯离子通过_______ 方式转运至细胞外,随氯离子在细胞外的浓度逐渐升高,使外界溶液的浓度大于_______ 的浓度,导致水分子向膜外扩散的速度_______ (加快/减慢),使覆盖在肺部细胞表面的黏液被稀释。
(2)由图2可知,由于_______________ 空间结构改变,导致氯离子不能够运出细胞而形或囊性纤维病。
(3)囊性纤维病属于常染色体隐性遗传病,大多数患者是由于CFTR基因变异引起的。图3是囊性纤维病(基因为A、 a)和血友病<基因为H、h)的家系图,请据图回答:
①II-2和II-3结婚,生育一个两病都患的女孩的概率为________ ;
②请写出二号家庭有关血友病的遗传图解。________
(1)由图1可知,氯离子通过
(2)由图2可知,由于
(3)囊性纤维病属于常染色体隐性遗传病,大多数患者是由于CFTR基因变异引起的。图3是囊性纤维病(基因为A、 a)和血友病<基因为H、h)的家系图,请据图回答:
①II-2和II-3结婚,生育一个两病都患的女孩的概率为
②请写出二号家庭有关血友病的遗传图解。
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【推荐1】为筛选出能与SARS病毒的S蛋白特异性结合的受体蛋白,研究人员在S蛋白末端添加TAP标签(能特异性地与人和哺乳动物体内IgG类抗体结合),再利用该标签在病毒敏感细胞(如非洲绿猴肾细胞)中快速纯化出S蛋白及其相互作用的蛋白质,具体过程如下图。其中XhoI、SmaI、EcoRI、BamHI表示限制酶,PCMV、T7表示启动子,Kozak序列是翻译起始因子结合位点的编码序列,Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,or表示复制原点。回答下列问题:
(1)为成功构建重组质粒pcDNA3.1—S—TAP,在利用PCR扩增S基因时,应在S基因的5’端引入______ 序列,3’端删除______ 的编码序列。为了防止PCR扩增发生突变,常选择高保真的PyrobestDNA聚合酶,该酶具有TaqDNA聚合酶所不具备的3’→5’核酸外切酶活性,PyrobestDNA聚合酶能防止突变的原因是______ .
(2)将S基因和TAP序列的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示两个片段均得到扩增且与预期值大小相一致。再经______ 证实正确后,将这两个片段经______ 酶连接定向克隆入质粒pcDNA3.1。
(3)重组质粒pcDNA3.1—S—TAP转染细胞前,需将vero细胞置于37℃、______ (填气体条件)下培养18-24h进行传代。将传代的细胞与重组质粒pcDNA3.1—S—TAP以适宜比例混合,在转染试剂的作用下转染细胞(实验组),为保证实验的科学性,还需设置对照实验,具体做法为______ 。将转染24h的细胞置于载玻片,洗涤、固定后滴加正常人血清稀释液和荧光素标记的羊抗人IgG抗体稀释液,荧光显微镜下观察,若______ ,则说明S—TAP融合蛋白在vero细胞中得以表达。
(4)通过上述检测发现,S-TAP融合蛋白表达量较低,其原因不可能是______ 。
A.重组质粒pcDNA3.1-S—TAP在vero细胞中大量复制
B.S-TAP融合基因在vero细胞中转录出的mRNA量较少
C.S基因与病毒宿主细胞的基因有不同的密码子偏爱,翻译相应mRNA的tRNA数量不足为增强融合蛋白的表达
研究人员在质粒转染前预先用重组痘苗病毒vTF7-3感染vero细胞,表达出的vTF7—3DNA聚合酶和T7RNA聚合酶(能选择性高效激活T7启动子)留存在细胞质基质中发挥作用。请据此解释重组质粒pcDNA3.1-S-TAP和重组痘苗病毒vTF7-3共转染细胞能提高融合蛋白表达效率的原因______ 。
(1)为成功构建重组质粒pcDNA3.1—S—TAP,在利用PCR扩增S基因时,应在S基因的5’端引入
(2)将S基因和TAP序列的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示两个片段均得到扩增且与预期值大小相一致。再经
(3)重组质粒pcDNA3.1—S—TAP转染细胞前,需将vero细胞置于37℃、
(4)通过上述检测发现,S-TAP融合蛋白表达量较低,其原因不可能是
A.重组质粒pcDNA3.1-S—TAP在vero细胞中大量复制
B.S-TAP融合基因在vero细胞中转录出的mRNA量较少
C.S基因与病毒宿主细胞的基因有不同的密码子偏爱,翻译相应mRNA的tRNA数量不足为增强融合蛋白的表达
研究人员在质粒转染前预先用重组痘苗病毒vTF7-3感染vero细胞,表达出的vTF7—3DNA聚合酶和T7RNA聚合酶(能选择性高效激活T7启动子)留存在细胞质基质中发挥作用。请据此解释重组质粒pcDNA3.1-S-TAP和重组痘苗病毒vTF7-3共转染细胞能提高融合蛋白表达效率的原因
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【推荐2】大刍草是玉米的原始祖先,具有较强的抗病抗逆特性,为玉米育种提供了原始的遗传材料。研究发现大刍草基因组中有一个D基因仅在体细胞(2n)和精子中正常表达,在卵细胞中不转录。为研究D基因表达对卵细胞的影响,设计了实验。据图回答:
(1)D基因在大刍草卵细胞中不转录,从基因结构角度推测其可能的原因是卵细胞中______ 。
(2)要构建大刍草的CDNA文库,应从大刍草______ 或______ 中提取总RNA.由总RNA在相关酶的作用下获得D基因编码蛋白的序列。按如图所示构建重组表达载体。
(3)在过程①、②转化筛选时,过程_____ 中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上。
(4)从转基因植株未成熟种子中分离出胚,观察到细胞内仅含一个染色体组,判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的,而一般情况下大刍草卵细胞在未受精时不进行发育,由此表明________ 。
(5)在大刍草基因组中发现另一个B基因与其育性相关,为进一步研究B基因的功能,研究者将一段T-DNA插入到B基因中,致使该基因失活,失活后的基因记为b,现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验,统计母本植株的结实率,结果如表所示:
①表中数据表明B基因失活后使______ (雌/雄)配子育性降低。
②让杂交a的F1给杂交b的F1授粉,得到F2.为验证F2植株的基因型,研究者据B基因、T-DNA的序列设计了3种引物,如图所示:
随机选取F2植株若干,提取各植株的总DNA,分别用“引物I+III”组合及“II+III”组合进行PCR,检测是否能扩增(完整的T-DNA过大,不能完成PCR扩增)。如果引物“I+III”组及“II+III”组进行PCR均可完成扩增,则相应植株的基因型为______ 。如果_______ ,则相应植株的基因型为BB.
(1)D基因在大刍草卵细胞中不转录,从基因结构角度推测其可能的原因是卵细胞中
(2)要构建大刍草的CDNA文库,应从大刍草
(3)在过程①、②转化筛选时,过程
(4)从转基因植株未成熟种子中分离出胚,观察到细胞内仅含一个染色体组,判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的,而一般情况下大刍草卵细胞在未受精时不进行发育,由此表明
(5)在大刍草基因组中发现另一个B基因与其育性相关,为进一步研究B基因的功能,研究者将一段T-DNA插入到B基因中,致使该基因失活,失活后的基因记为b,现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验,统计母本植株的结实率,结果如表所示:
杂交编号 | 亲本组合 | 结实率 |
a | ♀BB×♂bb | 0.1 |
b | ♀bb×♂BB | 0.5 |
c | ♀BB×♂BB | 0.5 |
①表中数据表明B基因失活后使
②让杂交a的F1给杂交b的F1授粉,得到F2.为验证F2植株的基因型,研究者据B基因、T-DNA的序列设计了3种引物,如图所示:
随机选取F2植株若干,提取各植株的总DNA,分别用“引物I+III”组合及“II+III”组合进行PCR,检测是否能扩增(完整的T-DNA过大,不能完成PCR扩增)。如果引物“I+III”组及“II+III”组进行PCR均可完成扩增,则相应植株的基因型为
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非选择题-解答题
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较难
(0.4)
【推荐3】哺乳动物体内一定含量的w-3多不饱和脂肪酸(LCPUFA)可以起到预防心血管疾病的作用,但LCPUFA在大多数动物体内不能合成,只能从食物中摄取。科研人员从秀丽隐杆线虫中获得LCPUFA合成酶基因fat-1(1229bp),培育转fat-1基因家兔,其部分流程如图一所示。(1)PCR扩增fat-1基因的前提是______ ,以用于特异性制备PCR扩增需要的引物。PCR扩增过程中,经过4轮循环后,得到的产物中只含一种引物的DNA分子占比为_______ 。
(2)在构建PEBf质粒时,为确保fat-1基因按正确方向插入,需要双酶切,还需对fat-1基因的引物进行相应设计。已知fat-1基因转录的模板链为a链,与b链结合的引物5'端添加了限制酶识别序列GAATTC,则另一引物5’端需添加的限制酶识别序列为______ ,理由是_______ 。
(3)转染是将外源分子如DNA、RNA等导入真核细胞的技术。为了检验图一家兔成纤维细胞是否转染成功,科研人员分别提取培养液中各细胞的DNA,利用fat-1基因引物进行PCR扩增后电泳,部分结果如图二所示。据图分析,1组和2组分别是____ 细胞组PCR产物。
(4)检测转基因家兔细胞中是否含有LCPUFA合成酶,可采用______ 技术。如果fat-1基因已正确插入PEB质粒且成功转染,但在转基因家兔细胞中没有检测到LCPUFA合成酶,从构建基因表达载体的角度分析,可能的原因是_______ 。
(2)在构建PEBf质粒时,为确保fat-1基因按正确方向插入,需要双酶切,还需对fat-1基因的引物进行相应设计。已知fat-1基因转录的模板链为a链,与b链结合的引物5'端添加了限制酶识别序列GAATTC,则另一引物5’端需添加的限制酶识别序列为
(3)转染是将外源分子如DNA、RNA等导入真核细胞的技术。为了检验图一家兔成纤维细胞是否转染成功,科研人员分别提取培养液中各细胞的DNA,利用fat-1基因引物进行PCR扩增后电泳,部分结果如图二所示。据图分析,1组和2组分别是
(4)检测转基因家兔细胞中是否含有LCPUFA合成酶,可采用
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