图为构建苘麻抗除草剂基因A重组质粒的技术流程,其中NptⅡ是卡那霉素抗性基因,GUS基因仅在真核细胞中表达,表达产物可催化底物呈蓝色。下列说法错误的是( )
A.PCR扩增A时可在引物中加入PstI和XhoI的酶切位点 |
B.在培养基中添加卡那霉素初步筛选导入重组质粒的农杆菌 |
C.用农杆菌转化植物愈伤组织选择呈现蓝色的组织进行培养 |
D.启动子若为除草剂诱导启动子将减少细胞物质和能量浪费 |
更新时间:2024-04-10 20:55:38
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【推荐1】实时荧光定量PCR简称qPCR,灵敏度高特异性好,是目前检测微小残留病变的常用方法。将荧光标记的Taqman探针与待测样本DNA混合,当探针完整时,不产生荧光。在PCR过程中,与目的基因结合的探针被TaqDNA聚合酶水解,R与Q分离后,R发出的荧光可被检测到在特定光激发下发出荧光(如图所示),随着循环次数的增加,荧光信号强度增加,通过实时检测荧光信号强度,可得Ct值(该值与待测样本中目的基因的个数呈负相关)。下列相关叙述错误的是( )
A.每个模板DNA分子含有2个游离的磷酸基团 |
B.在反应过程中,无需ATP为新链的合成提供能量 |
C.做qPCR之前,需要先根据目的基因的核苷酸序列合成引物和Taqman探针 |
D.荧光信号达到设定的阈值时,经历的循环数越少,说明含有的病变的概率越小 |
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解题方法
【推荐2】脱氧核苷三磷酸((dNTP)3'-C上的一OH 脱 O 后转化为双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)。在 PCR 反应体系中加入模板、4 种dNTP、1种³²P标记的ddNTP 和1种引物及其他所需材料,经扩增后获得不同长度的DNA片段混合物。分别利用如图所示 4 种³²P标记的adNTP 进行PCR 后,将产物点样在变性凝胶上进行电泳分离,通过放射性自显影检测,不可以读出DNA的核苷酸序列。下图为某待测DNA 片段的电泳检测结果,下列说法错误( )
A.PCR反应体系中的退火温度适当升高可以提高PCR 特异性 |
B.连接到核苷酸链上的ddNTP 因3’—C 上没有—OH 而导致 DNA 延伸中断 |
C.该 DNA 片段的待测碱基序列为5'-TTGGCTGCAA-3' |
D.该 PCR 过程中待测 DNA 片段只有 1条链作为模板 |
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【推荐3】下图为我国新型冠状病毒(RNA病毒)核酸检测的基本流程,采用的是“实时荧光定量RT-RCR”技术,1~2h内即可得到检测结果。其基本原理是DNA的复制,过程中加入与特定模板链互补的荧光探针,这样每新合成一条DNA链,就会产生一个荧光分子,通过检测荧光信号即可确定是否为阳性。下列相关说法错误的是( )
A.①②过程都需要加入四种游离的脱氧核糖核苷酸作为原料 |
B.若样本被污染,RNA酶将病毒RNA降解,检测结果可能为阴性 |
C.若只考虑一个DNA,其复制了n次,则整个过程中可以检测到2n+1-2个荧光信号 |
D.若样本RNA中A占碱基总数的20%,则通过①产生的DNA中T占碱基总数的20% |
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【推荐1】将两个抗虫基因A导入大豆(2n=40),筛选出两个A基因成功整合到两对同源染色体上的抗虫植株M。取植株M的某部位一个细胞在适宜条件下培养,连续正常分裂两次,产生4个子细胞。用荧光分子检测A基因(只要是A基因,就能被荧光标记),下列叙述不正确的是
A.要将抗虫基因整合到运载体上,需要用相同的限制酶切割以形成互补的黏性末端 |
B.若每个子细胞都只含有一个荧光点,则子细胞中的染色体数是40 |
C.若同时出现含0、1、2个荧光点的子细胞,则说明细胞分裂过程发生了交叉互换 |
D.若含有A基因的植株表现出抗虫性,则说明该大豆植株具有A基因表达的条件 |
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【推荐2】下表列出了几种限制酶的识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点,下列叙述正确的是( )
限制酶 | BamHⅠ | HindⅢ | EcoRⅠ | SmaⅠ |
识别序 列及切 割位点 |
A.一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后,分别含有0个和4个游离的磷酸基团 |
B.若对图中质粒进行改造,插入的SmaⅠ酶切位点越多,质粒的热稳定性越高 |
C.用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,可以使用SmaⅠ切割 |
D.使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化 |
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【推荐3】为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因,研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列(简称phb2基因),大小为0.9kb(1kb=1000碱基对),利用大肠杆菌表达该蛋白。图1为所用载体图谱示意图,图中限制酶的识别序列及切割位点见下表,phb2基因序列不含图1中限制酶的识别序列。转化后的大肠杆菌提取质粒,再用选中的两种限制酶进行酶切,酶切产物经电泳分离,结果如图2.下列叙述错误的是( )
相关限制酶的识别序列及切割位点(注:箭头表示切割位点)
相关限制酶的识别序列及切割位点(注:箭头表示切割位点)
名称 | 识别序列及切割位点 | 名称 | 识别序列及切割位点 |
HindⅢ | A↓AGCTT TTCGA↑A | EcoRI | G↓AATTC CTTAA↑G |
PvitⅡ | CAG↓CTG GTC↑GAC | PstI | CTGC↓AG GA↑CGTC |
KpnI | G↓GTACC CCATG↑G | BamHI | G↓GATCC CCTAG↑G |
A.需设计特异性的引物通过PCR技术扩增phb2基因 |
B.为使phb2基因与载体正确连接,在扩增的phb2基因两端分别引入KpnⅠ和EcoRⅠ两种不同限制酶的识别序列 |
C.需用CaCl2处理大肠杆菌制备感受态细胞,以提高转化率 |
D.图2中3号的质粒很可能是含目的基因的重组质粒 |
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【推荐1】图甲、乙分别表示质粒和外源DNA,其中箭头表示相关限制酶的酶切位点,下列叙述正确的是( )
A.用质粒和外源DNA构建重组质粒过程中,不能使用SmaI切割 |
B.图甲所示的质粒分子在经SmaI酶切割后含有4个游离的磷酸基团 |
C.为获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入DNA聚合酶 |
D.用EcoRI、HindⅢ和BamHI中的任意一种酶切割质粒和外源基因都可以 |
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【推荐2】杨树被农杆菌感染后会增生并长出瘤状物,称为冠瘿。冠瘿的形成是由于农杆菌携带有天然的Ti质粒,结构如下图。其中,冠瘿碱是一种含氮有机物,只有农杆菌可以利用,作为专属“食物”。下列相关分析,错误的是( )
A.质粒上的细胞分裂素基因在农杆菌寄生过程中不发挥作用 |
B.农杆菌利用杨树冠瘿中的含氮物质合成冠瘿碱 |
C.质粒上冠瘿碱合成和代谢基因的相对位置是自然选择的结果 |
D.Ti质粒过多的农杆菌不利于在种内斗争中存活 |
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【推荐1】下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。下列说法正确的是( )
限制酶 | BamHI | HindⅢ | EcoRI | SmaI |
识别序列及切割位点 | G↓GATCC CCTAG↑G | A↓AGCTT TTCGA↑A | G↓AATTC CTTAA↑G | CCC↓GGG GGG↑CCC |
A.一个图1所示的质粒分子经SmaI切割前后,分别含有1、2个游离的磷酸基团 |
B.若对图中质粒进行改造,插入的SmaI酶切位点越多,质粒的热稳定性越低 |
C.与只使用EcoRI相比较,使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒和外源DNA可以防止质粒和含目的基因的DNA自身环化 |
D.为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在只含蔗糖的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测 |
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【推荐2】“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段。下列叙述错误的是( )
A.单倍体育种时,需对F1的花药进行筛选后才可继续进行组织培养 |
B.培育转基因抗虫棉时,需从分子水平及个体水平进行筛选 |
C.胚胎移植前,需对通过体外受精或其他方式得到的胚胎进行质量筛选 |
D.制备单克隆抗体时,需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞 |
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