研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如-组卷网

题型：非选择题-实验题难度：0.65 引用次数：140 题号：22632808

研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物中角蛋白的嗜热菌，研究发现堆肥温度随时间变化的曲线如图1，从堆肥中筛选分离出高效降解角蛋白的嗜热菌的流程如图2

(1)为筛选高效降解角蛋白的嗜热菌，将堆肥样品处理后接种至以________（填“尿素”、“角蛋白”或“蛋白胨”）为唯一氮源的培养基上进行培养。
(2)根据图1分析可知，堆肥样品在_________（填“a”、“b”或“c”）点取样，最可能筛选到目标菌。根据接种培养后得到的结果判断，步骤③的接种方法为_________。该方法步骤中，不需要用到的是________（单选）。
A．酒精灯B．涂布棒 C．培养皿D．显微镜
(3)步骤③接种培养后，发现培养基上出现两种菌落，甲菌落周围无透明圈，乙菌落周围出现透明圈，为筛选目标菌，应该选择_______菌落进一步纯化，选择的理由为__________。
(4)有人推测，甲菌可能利用了空气中的氮气作为氮源。若要进一步确定甲菌能否利用空气中的氮气作为氮源，请简要写出实验思路和预期结果，即____________。
(5)在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的角蛋白超过某一浓度时，某菌株对角蛋白的降解量反而下降，可能的原因为______________（答一点）。某学校多个研究小组按图2所示操作步骤筛选出降解角蛋白能力较高的菌株1和2。下表为某一小组配制的过程③和过程④培养基的成分表。

成分	过程③	过程④
葡萄糖	+	+
(NH4)₂SO₄	+	-
NaCl	+	+
KH₂PO₄	+	+
微量生长因子	+	+
角蛋白	-	+
琼脂	+	+

“+”添加；“-”未添加
(6)表中过程③和过程④中的培养基成分配制的不合理之处有__________。

A．过程③中没有添加角蛋白

B．过程③中不应添加(NH4)₂SO₄

C．过程④中不应添加角蛋白

D．过程④中应添加(NH4)₂SO₄

E．过程④中不应添加琼脂

23-24高二下·上海浦东新·期中查看更多[1]

更新时间：2024-04-28 18:31:21 |

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【知识点】培养基的成分及其功能解读培养基的类型及其应用解读微生物的接种方法解读其他微生物的分离与计数解读

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【推荐1】耐酸性酵母菌是一种特殊的酵母菌，可以在pH值为3.0～6.5的酸性环境中生长，而普通酵母菌的适宜pH值范围为4.5～6.0。这种酵母菌通常具有较好的酒精耐受性和高渗透压耐受性，能够在高浓度酒精和渗透压较高的条件下生长。由于其具有较好的酸性耐受性，因此耐酸性酵母菌在酿造工业中有广泛应用，用于酿造果酒、葡萄酒、啤酒等，可以提高产品的品质和口感。酿酒工程师开展了对某酒厂耐酸性酿酒酵母菌的分离与筛选，过程如下图所示，请回答下列问题：

(1)从窖池底泥、黄浆水（窖底部的水呈黄色，含有丰富的有机酸）中寻找耐酸酵母菌的原因是_____。
(2)过程②需充分振荡的主要目的是_____，所用培养基为酵母菌提供的营养成分有_____。
(3)在用稀释涂布平板法纯化培养液中的耐酸性酵母菌时，发现培养基上的菌落连成一片，其原因最可能是_____。对酵母菌进行计数时，既可在显微镜下用_____直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目，选用后者测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是_____。
(4)若将分离的耐酸性酵母菌菌种稀释10⁴倍，在5个固体培养基上分别接种0.1mL该菌液，适宜条件下培养一段时间后，培养基上的菌落数分别为：28、71、126、138、145，其中菌落数为_____的培养基计数有误，则每升菌液中细菌数量为_____个。

2024-05-14更新 | 73次组卷

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微生物的纯培养结合实例考查微生物的选择培养和计数

【推荐2】牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌,设计了如下实验。请分析并回答下列问题。
实验步骤:
Ⅰ.取样:从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。
Ⅱ.培养基的配制和灭菌
①配制全营养LB固体培养基,配方:水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂(一种凝固剂)。
②配制尿素固体培养基,配方:水、葡萄糖、NaCl、K₂HPO₄、尿素、琼脂。
Ⅲ.制备瘤胃稀释液并接种,如图1所示。
Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。

(1)全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质:____。
(2)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下,利用稀释涂布平板法进行分离,需要用到图2中的实验器材有____。
(3)为检测该培养基灭菌是否彻底,应采用的检测方法是______。为了判断尿素培养基是否具有选择作用,实验时还需要同时接种全营养平板,如果同一浓度梯度下,尿素培养基上的菌落数____(填“大于”“等于”或“小于”)全营养培养基上的菌落数,则说明尿素培养基具有选择作用。
(4)为了避免混淆,本实验中使用的平板需要在培养皿的____(填“皿盖”或“皿底”)做好标记。
(5)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养,培养后平板上出现的菌落数如图1所示,则10 mL瘤胃样品中约含有目标活菌______个。该方法统计获得的菌落数往往比实际的活菌数____,原因是_______。

2024-04-04更新 | 155次组卷

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【推荐3】某同学开展从土壤中分离尿素分解菌的研究，请回答下列问题：
（1）尿素分解菌分解尿素与其分泌的____________有关，该物质能将尿素分解成____________。
（2）如表是用于筛选尿素分解菌的培养基的成分表，相比培养大肠杆菌的全营养LB培养基的成分，该培养基成分的主要特点是____________。K₂H₂PO₄和Na₂HPO₄的作用是____________。

K₂H₂PO₄	1．4g
Na₂HPO₄	21．g
MgSO₄·7H₂O	0．2g
葡萄糖	10．0g
尿素	1．0g
琼脂	15g

（3）从土壤取样时，选择pH接近中性且潮湿的土壤这样做的原因可能是____________。
（4）该同学还配制了全营养的LB培养基作为对照，接种后预期的实验结果是LB培养基上菌落的____________较多。对尿素分解菌进行鉴定时，需要在选择培养基中加入____________。

2020-08-13更新 | 23次组卷

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(3) 生产酒的主要微生物是酵母菌，其代谢类型是_______，其产物乙醇与______试剂反应呈现灰绿色,这一反应可用于乙醇的检验。

2018-01-25更新 | 536次组卷

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【推荐2】下表所示为某微生物培养基配方，请分析回答：

(1)根据物理性质，该培养基属于_______培养基；根据用途划分则属于________培养基。
(2)根据培养基原料，所培养的微生物的代谢类型，同化作用类型：_____________，异化作用类型：______________培养的微生物可能是_______________________。
(3)该培养基中的碳源是_____________，氮源是_____________ 。
(4)如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标，至少要加入__________和________，除去___________________。

2017-04-17更新 | 94次组卷

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发酵工程的基本环节结合实例考查基因工程的应用

【推荐3】异丁醇是一种新型能源。科研人员研究了酿酒酵母的异丁醇合成途径（如图1），尝试对其进行改造，以期实现大规模生产（如图2）。其中，质粒pUC18可实现目的基因在真核、原核细胞中过表达。

注：Ampr为氨苄青霉素抗性基因，氨苄青霉素可抑制细菌细胞壁的形成，对真核生物生长无影响his为组氨酸合成酶基因，组氨酸是微生物生长所必需限制性内切核酸酶识别序列及切割位点：BamHI：5’-G↓GATCC-3’ XhoI：5’-C↓TCGAG-3’ Sau3AI：5’-↓GATC-3’ SacI：5’-GAGCT↓C-3’
(1)为实现异丁醇大规模生产，可选取的目的基因是____。

A．酶A基因	B．酶B抑制基因
C．酶E基因	D．酶F抑制基因

(2)若选用XhoI和Sau3AI对质粒pUC18进行切割，为实现其与目的基因的连接，可在目的基因两端添加____。（编号选填）
①XhoI和Sau3AI的识别序列
②XhoI和BamHI的识别序列
③SacI和Sau3AI的识别序列
④SacI和BamHI的识别序列
(3)下列关于培养基I~ III的叙述正确的是____。

A．培养基I是鉴别培养基

B．培养基II可形成单个菌落

C．培养基I和II的营养成分相同

D．培养基I和III的营养成分相同

(4)启动子的表达具有物种特异性，为了大量获得重组质粒并高效筛选异丁醇生产菌种，图10中的大肠杆菌和酿酒酵母需具备的特点是____。

A．氨苄青霉素抗性大肠杆菌

B．氨苄青霉素敏感大肠杆菌

C．组氨酸合成正常酿酒酵母

D．组氨酸合成缺陷酿酒酵母

(5)线性化后的重组质粒可随机整合到酿酒酵母的染色体DNA中并稳定表达。经上述流程获得的异丁醇生产菌种在适宜条件下培养，异丁醇产量较野生型酿酒酵母减少，试分析此类菌种异丁醇产量减少的原因。____。
为初步筛选异丁醇高产菌种，科研人员构建了相关载体，并导入异丁醇生产菌种，载体的部分序列及筛选原理如图3。

(6)已知BmoR基因的编码链序列为5’-GTGTTAATAT······GATTCATGAA-3’，若将其编码的亮氨酸替换为天冬氨酸，可提高BmoR蛋白与异丁醇的结合能力。现利用PCR技术定点突变改造BmoR蛋白，需设计的引物的序列是____。（编号选填）（密码子：亮氨酸5’-UUA-3’，天冬氨酸5’-GAC-3’）
①5’- ATATGTCCAC -3’        ②5’-GTGGACATAT -3’
③5’- GATTCATGAA -3’        ④5’-TTCATGAATC -3’
(7)结合图3及所学知识，分析利用上述载体筛选异丁醇高产菌种的原理____。
(8)发酵罐是发酵工程中常用的生物反应器，其主要作用是____。

A．隔绝外界空气

B．模拟微生物细胞代谢所需环境

C．杀灭微生物的芽孢

D．提供液体环境便于收集发酵液

2023-12-13更新 | 277次组卷

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【推荐1】杨梅果实风味独特，酸甜适中，具有很高的营养价值和保健价值。下图是制作杨梅酒和杨梅醋的流程图。请回答下列问题。
制取发酵液：向杨梅汁中加入白砂糖，将糖的质量分数调至8%，灭菌冷却 → 酒精发酵：接种酵母菌，恒温发酵 → 果醋发酵：加入酒精，接种醋酸菌 →取样检测：对发酵产物进行检测
(1)请写出酒精发酵的化学反应式：______________；用来检验酒精的化学试剂是_____________。温度适宜时杨梅酒发酵时间较短，原因是____________。
(2)下图表示果酒发酵过程中，发酵液的糖度（葡萄糖的质量分数）和酒精度（酒精的体积分数）随时间变化的关系。发酵前24 h，糖度变化很小，酒精度上升很慢，其原因是_____。96 h后酒精度和糖度的变化都趋于平缓，其原因是____________。

(3)野生型伤寒沙门氏菌（his⁺）可合成组氨酸，某种突变体丧失了这种能力，必须在添加组氨酸的培养基上才能生长，称为组氨酸营养缺陷型（his^-），下图甲、乙为培养伤寒沙门氏菌时两种不同的接种方法。图甲和图乙的接种方法分别是（按顺序写）________________；若要培养his^-菌，则除了基础的营养物质外，还需要在培养基中加入__________。

2022-03-20更新 | 180次组卷

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【推荐2】在实验室中，经稀释后用平板分离纯化微生物的方法有稀释涂布平板法和稀释倒平板法。两种方法的主要区别在于：前者是取一定稀释度的样品，用无菌涂布器将其均匀涂布于预先制备好的琼脂平板上；后者则是取一定稀释度的样品与熔化的琼脂培养基混合均匀后，倒入无菌培养皿中。请回答下列相关问题：
(1)在进行稀释倒平板时，已熔化并用_______（填实验仪器）灭菌的琼脂培养基，需要冷却到___左右才能与样品稀释液混合并倒平板。
(2)若要从某土壤中分离数量极少的、能降解对羟基苯甲酸（一种含碳化合物）的微生物，在样品稀释之前，最好先用液体培养基进行_______ ，该培养基中除了含有对羟基苯甲酸以外，还应加入_________等主要营养物质。
(3)若稀释得当，两种方法均可得到_______________菌落，但菌落生长的区域不同。其中，稀释倒平板法的菌落可能生长在平板的____________________。
(4)上述两种方法都只能初步分离纯化菌种。若要保证得到的是纤维素分解菌，还需要通过______________来确定。
(5)有同学在对某种霉菌接种培养的24h之内，每隔8h统计一次菌落数目，然后进行了样品中菌落数量的计算：他的计算结果______（填“大于”、“小于”或“等于”）活菌的真实值，这是因为__________________。

2016-11-26更新 | 88次组卷

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【推荐3】味精的主要成分是谷氨酸，生产上多采用谷氨酸棒杄菌发酵法。在碳源略微不足而氮源相对丰富的培养条件下，谷氨酸棒杆菌细胞内会积累谷氨酸。回答下列问题：
（1）从细胞结构角度看，谷氨酸棒杆菌属于一种__________生物，除碳源和氮源外微生物可能需要的营养物质还有__________。生产味精时应使氮源过量，一般可加入一定量的__________（填“其它氨基酸”、“蛋白质”或“无机氮源”）。
（2）为降低生产成本，设想利用纤维素酶分解作物秸秆生产葡萄糖。为获得产纤维素酶的细菌，可从__________采集土壤样本，然后用__________的选择培养基进行富集培养。纯化菌种的方法有__________。
（3）从发酵液或动、植物材料中提取相关物质的方法有很多，从玫瑰花瓣中提取玫瑰精油用__________法，而萃取法适合提取__________的物质。

2020-05-05更新 | 145次组卷

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【推荐1】为了得到普洱茶中产蛋白酶的微生物，科研人员进行了一系列筛选、检测。
（1）科研人员称取普洱茶1g，加入__________，制备稀释10²倍的茶叶水。再将茶叶水进行梯度稀释，获得10³、10⁴、10⁵倍的稀释茶叶水。取100μL稀释茶叶水，用__________法接种到奶粉培养基，37℃条件下培养4~5天，在培养基中选择菌落周围的__________较大的菌株作为目的菌株。
（2）将获得的多个目的菌株接种于液体茶汤培养基中培养。已知氨基酸都能够和茚三酮反应生成蓝紫色物质，因此可以利用分光光度计测定茶汤中游离氨基酸的量。先用____________________绘制标准曲线，再分别测定培养每个菌株的液体茶汤培养基的吸光值，与标准曲线比较，计算出该茶汤中游离氨基酸的量，氨基酸含量高的，即为__________的菌株。该实验中应测定__________的液体茶汤培养基的游离氨酸含量，作为对照组的数据。

2017-11-11更新 | 140次组卷

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【推荐2】谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠（味精）。下图为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径，通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题：

(1)与酵母菌相比，谷氨酸棒状杆菌在结构上的主要特点是__________________；谷氨酸发酵的培养基成分有豆饼水解液、玉米浆、尿素、磷酸氢二钾、硫酸镁、生物素等，从物理状态看，该培养基属于________培养基。
(2)测定谷氨酸棒状杆菌数目可采用的计数方法有显微镜直接计数法和____________________，后者计数的结果比前者计数的结果值更________（填“大”或“小”），原因是后者计数的是__________数，且可能会出现____________________________的情况。
(3)由图可知，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，微生物这种对自身代谢速率的调节方式是____________________。
(4)在利用谷氨酸棒状杆菌发酵过程中要严格控制发酵液的pH，在________条件下，该菌才能通过代谢积累谷氨酸。

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【推荐3】豆浆是人们热爱的早餐饮品，但它易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：
①取少量变质的豆浆在无菌条件下接种到培养基X上，一天后长出了S₁、S₂和S₃三种菌落，计数后分别制成菌液。
②将三种菌液分别接种到加入了乳酸链球菌素的新鲜豆浆中，一段时间后统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图所示。

（1）步骤①中适宜采用的接种方法是__________。
（2）培养基X应使用__________。
A．加伊红、美蓝染料的选择培养基 B．牛肉膏蛋白胨通用培养基
C．加四环素的选择培养基 D．加青霉素的选择培养基
（3）据图可知最能耐受乳酸链球菌素的细菌是__________。为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量的最适浓度为__________mg/kg左右。
（4）腐败细菌细胞膜内侧附着有少部分核糖体，合成运输到胞外的蛋白酶。由此可知，在蛋白合成和加工过程中，真核细胞中__________结构的作用最类似于腐败细菌细胞膜。
（5）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是__________。

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