【推荐1】GA3是一种由C、H、O三种元素构成的与赤霉素作用类似的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌发。GA3的广泛施用会导致其在土壤中残留，研究小组从长期施用GA3农田的土壤中筛选出了能降解GA3的菌株。据图回答下列问题：

(1)过程②是将稀释的含有降解GA3的菌株接种到甲瓶培养液中，这样做的目的是__________。
(2)乙培养基中含有的唯一的碳源应该是__________，所以从培养基的功能看，乙培养基属于__________。
(3)过程③将菌种接种到乙培养基上通常采用的方法是__________上。接种时需要将涂布器通过__________，目的是__________。
(4)图中获得纯培养物的过程⑤称为__________。

【推荐2】科研人员对四川汶川高山森林的土壤微生物进行分离和鉴定，欲从中筛选出多种功能性降解菌，根据实验流程，回答相关问题：
→→→
（1）下表是富集培养基的配方：

马铃薯	200 g/L
蔗糖	20 g/L
pH	7.2

从物理性质判断，上述培养基为_________培养基，富集培养的作用是：_____________________________。
（2）研究人员要想获得某种微生物，优先考虑从相应的土壤中获取，其原因是：________________________。
在菌落的分离纯化培养过程中采用___________法进行菌落的分离计数，并根据菌落的特征进行初步的分类。
（3）将分离出的菌株点到油脂培养基上，油脂水解产生的脂肪酸使培养基的pH降低，培养基中的中性指示剂从淡红色变为深红色，在菌落周围形成深红色的水解圈，水解圈越大，则红色斑点越多，可依据_______初步判断菌株降解油脂的能力。
（4）在无菌操作台上，使用经灭菌的牙签挑取少量菌体分别涂抹在滴有1滴3%H₂O₂的载玻片上，可根据肉眼观察_______________________，简单判断该菌种分解H₂O₂的能力。

【推荐3】塑料制品方便人们生活的同时，也造成了短时期难以降解的“白色污染”。研究人员欲比较肠杆菌YT1和芽孢杆菌YP1两类细菌降解塑料（主要成分为聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）和聚丙烯（PP）等，两类细菌主要降解PE）的能力，并通过基因工程拼接黄粉虫肠道内菌株WZ的降解PVC的胞外酶基因CD3D，培育降解塑料的“超级菌”。
(1)菌株的筛选。配置固体培养基，接种菌株后表层覆盖0.1mm厚度的PE塑料。分组实验结果如图所示：

培养基及接种菌株	培养基1	培养基2	培养基3
	单独培养并接种YT1	单独培养并接种YP1	混合培养YT1和YP1后，选取YP1接种
降解圈（直径D/mm）	3.5	1.8	4.2

①在筛选分解PE塑料能力大小的菌株时，应将两类菌株接种到以______为唯一碳源的培养基，从功能上讲，该培养基属于____________。
②筛选分解PE塑料能力强的菌株不能直接以降解圈的大小为指标，其原因是________________________。培养基3中接种混合培养后的YP1，其降解圈直径明显加大，其原因可能是________________________。
(2)培育“超级菌”。对菌株WZ改造后的CD3D基因进行研究，把CD3D基因和His标签基因（His标签由6个组氨酸组成）连接起来构建融合基因，并构建重组基因表达载体，图2为载体、CD3D基因的结构、不同限制酶的识别序列及切割位点，欲将标签基因连接在CD3D基因编码区的末端，已知组氨酸的密码子为CAU，终止密码子为UAG。
   
限制酶识别序列及切割位点：MunI：CAATTG； XhoI：CTCGAG； BcoRI： G↓AATTC；Sal I：G↓TCGAC
①写出His的基因编码链的碱基序列5′______3′。
②为构建融合基因并将其插入载体，科研人员设计了一对与CD3D基因编码区两端序列互补配对的引物，设计时需在引物______（填“A”或“B”）的5′端增加相应的限制酶识别序列和His基因的编码序列，请写出该引物开头的12个碱基序列：5′______3′。

【推荐1】组织培养某植物中发现，有一个MS培养基中没有加入杠杆激素（生长素和细胞分裂素）的培养瓶中也长出了与加有杠杆激素的培养瓶中一样的愈伤组织，瓶中还长出了一些某种真菌的菌落。
(1)回顾操作过程，操作环境的消毒过程、培养基和器具的灭菌过程应该没有问题，可能是对外植体的____处理和接种外植体环节没有____进行严格的无菌操作。
(2)研究人员没有放弃这难得的机遇，初步做出一个假设，继续进行实验：他们就地取材，在MS培养基上采用______法纯化培养该真菌。再增设一组实验，具体做法是，在MS培养基中加入经湿热灭菌处理的该种真菌，再接种外植体，其他环境条件与正常组织培养相同，观察能否培养出正常的愈伤组织。预测结果：如果产生了正常的愈伤组织，支持该假设。如果没有产生愈伤组织，不支持假设。他们做的假设是：_____。
(3)去该植物生长地考察发现，根系发达的植物土壤中该真菌的密度很大。据此推测该植物和该真菌的种间关系很可能是______。
(4)设想将它们融合培育成一种新的植物。先在一定浓度的蔗糖溶液中加入某些酶处理植物，制备出所需的原生质体，真菌也做类似的处理。再经过______（化学法）诱导融合，利用____技术，最终长成新的植物体。

【推荐3】下图是花药培养产生花粉植株的两种途径，回答下列相关问题：

（1）通过花药培养产生花粉植株，该过程依据的生物学原理是_________________，图示两种产生花粉植株的途径并没有绝对的界限，主要取决于培养基中_________________。
（2）选材时，从花粉发育来看，一般选择处于___________期的花粉培育成功率较高。确定花粉发育时期最常用的方法是_________________。
（3）材料消毒过程中用到的试剂有_________________、质量分数为0.1%的氯化汞溶液、无菌水。
（4）消毒后的花蕾要在________条件下接种到培养基上，培养过程不需要光照，同时要控制好温度。
（5）在配制用于植物组织培养的MS培养基时，往往需要加入适量的蔗糖，理由是___________________________________________。

【推荐1】抗凝血酶Ⅲ在人体中主要由肝脏合成，是存在于血浆中的一种重要的抗凝血因子。研究者将人的抗凝血酶Ⅲ基因导入奶山羊细胞，获得乳汁中含有大量人抗凝血酶Ⅲ的转基因克隆奶山羊。已知β-酪蛋白广泛存在于哺乳动物的乳汁中。回答下列问题：
(1)获取人抗凝血酶Ⅲ基因：从人的肝细胞中提取mRNA，再通过___获取cDNA，利用PCR扩增目的基因。根据人抗凝血酶Ⅲ基因上游及下游的碱基序列，设计2种特异性引物，在PCR过程中，两个引物是___的结合位点，也是子链延伸的起点，dNTP在此过程中的作用是___。
(2)基因表达载体的构建：重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、人抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子等结构组成，其中___决定了人抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
(3)成纤维细胞的转化：取幼龄雌性动物的组织，经酶处理后获得成纤维细胞悬液，放在动物细胞培养液中培养，从幼龄动物取材的原因是___。然后用___法将基因表达载体导入成纤维细胞。
(4)转基因奶山羊的获得：从奶山羊中获取卵母细胞，将阳性转基因成纤维细胞注入___，通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚。常通过___（填物理方法）激活重构胚，培养获得早期胚胎，胚胎移植前，需要用孕激素对受体母羊进行同期发情处理。
(5)克隆羊的鉴定：取少量克隆羊组织细胞提取DNA，将用___处理后的产物进行电泳，检测目的基因是否成功导入。待克隆羊成年并产奶，收集奶样，可用___技术鉴定克隆羊是否成功表达人抗凝血酶Ⅲ。若最终获得的抗凝血酶Ⅲ不能很好地发挥其功能，可利用___工程进行改造。

【推荐2】干燥综合征（SS）是一种自身免疫病，患者血清中存在多种抗体， 其中SSB抗体特异性最强。科研人员为生产SSB抗体的检测试剂，利用基因工程获得重组SSB蛋白，流程如下，请回答：

(1)利用RNA 通过①过程获得cDNA 需要________酶，从而获得 SSB基因，SSB基因通过PCR扩增，其延伸阶段需要___________酶的参与，而且在缓冲液中添加_______________以便激活该酶的活性。 目的基因片段扩增n代，共需要________个引物。
(2)PCR循环之前，常要进行次预变性，预变性的目的是增加_________________的概率，用PCR方法扩增目的基因时____________（填“必须”或“不必”）知道基因的全部序列。
(3)为与PET41a质粒连接，获得的目的基因A 两端要含有________（写出限制酶名称）酶切位点。DNA 连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是_______。为了提高获得重组DNA的效率，除了考虑适宜的外界条件外，还需考虑_______________。（至少两点）
(4)获得含 SSB基因的重组质粒后，进行如下实验切割原质粒和重组质粒，获得片段大小见表格（1kb=1000碱基对），分析数据，计算可得SSB基因的长度为________。与人基因组文库中的SSB基因相比，通过①过程获得的SSB基因结构特点________（填“有”或“无”）启动子、终止子和内含子等非编码序列。

限制酶	EcoRI	BanHI 和 XhoI
原质粒	8.1kb	2.7kb、5.4kb
重组质粒	3.4kb、5.0kb	未做该处理

(5)②过程目的是将重组质粒转入到用____处理过的大肠杆菌内，并接种于添加______的培养基上，收集菌落进行鉴定，将阳性菌落进一步纯化后再将菌体________处理，筛选得到重组SSB蛋白。

【推荐3】我国科学家屠呦呦因青蒿素的研究荣获2015年诺贝尔生理学和医学奖。青蒿素是目前世界上最有效的治疗疟疾药物，为青蒿植株的代谢产物，其化学本质是一种萜类化合物，其生物合成途径如图1所示。正常青蒿植株的青蒿素产量很低，难以满足临床需求，科学家为了提高青蒿素产量，将棉花中的FPP合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达，获得了高产青蒿植株，过程如图2所示。

（1）研究人员从棉花基因文库中获取FPP合成酶基因后，可以采用________技术对该目的基因进行大量扩增，该技术除了需要提供模板和游离的脱氧核苷酸外，还需要提供__________、________________________等条件。在基因工程中通常选择细菌质粒作为运载体，原因之一是____________________________；如果某质粒由1000个核苷酸组成，核苷酸平均分子量为a，则该质粒的质量为____________。
（2）图2中的①为_____________，形成过程中需要____________________等酶；棉花FPP合成酶基因能够和质粒连接成①的主要原因是_____________________________。
（3）若②不能在含有抗生素Kan的培养基上生存，则原因是_________________。
（4）由题意可知，除了通过提高FPP的含量来提高青蒿素的产量外，还可以通过哪些途径来提高青蒿素的产量？（试举一例）________________________________。

【推荐1】下图是植物细胞杂交过程示意图，请据图回答：
   
(1)自然条件下，番茄和马铃薯不能进行杂交，原因是__________________。
(2)植物体细胞杂交技术的核心步骤是__________________，人工诱导②过程的物理方法有_________、电融合法等。若利用此技术生产治疗癌症的抗癌药物——紫杉醇，培养进行到_________（填字母编号）即可。
(3)与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为_________。在④⑤培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素及氨基酸外，往往还需要在培养基中加_________，最终得到的杂种植株_________（可育/不可育）。

【推荐2】番茄和马铃薯同属于茄科植物，如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄一马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。

（1）图中①②过程使用了纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，以便获得植物_________。在动物细胞培养中，可用_________酶处理剪碎的动物组织，使细胞相互分离。
（2）过程③发生细胞融合时常使用的化学药剂是_________，与该过程不相同的是动物细 胞融合的方法中可以使用_________。
（3）过程⑤、⑥的名称分别是_________，⑥过程的发生其实质是_________。
（4）过程⑤一⑦应用了_________技术获得完整植株，该过程的原理是_________。

【推荐3】传统的人工繁殖兰花的方法是分株繁殖和种子繁殖，随着科学技术的进步，人们开始采用“组织培养繁殖兰花”，如下图所示。

(1)图中①过程为________，②与④相比分化程度________，全能性________。
(2)兰花的叶肉细胞之所以能培养为新个体，是因为细胞中含有________________，具有发育成完整个体的潜能。
(3)图中③与①过程相比较，培养基中各种激素的种类________(填“相同”或“不同”，下同)，各种激素的含量________。
(4)有人利用植物体细胞杂交技术解决兰花生根速度慢、幼苗生存能力弱的问题，但操作后得到的“韭菜—兰花”并没有预想中的“繁殖容易，香气浓郁”，可能的原因是___________________。
(5)若①是花药，经过组织培养可获得____________植株，继续对其使用________处理可获得正常植株，该过程称为______________________。