乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶的分泌量较少,导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖,从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时,需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量,科研人员从牧民的奶酪(一种近似固体的发酵牛奶制品)中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌,下图为流程示意图。请回答下列问题:(1)将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是________________________ 。
(2)若要将培养基甲中的菌液稀释10倍,应进行的操作是________________________ 。
(3)将菌液接种到培养基乙所采用的方法是______ ,该过程所用的接种工具是______ ,对该接种工具进行的灭菌操作及注意事项有____________ (写出具体操作流程)。
(4)X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时,挑选的依据是________________________ 。
(5)分离纯化能高效生产乳糖酶的酵母菌后需要检测酶的活力,以便更好地将酶用于生产实践,乳糖酶活性大小的表示方法是________________________ 。在牛奶中添加适量乳糖酶,以获得无乳糖牛奶,此过程并不会破坏牛奶中的其他营养成分,原因是______________________________ 。
(2)若要将培养基甲中的菌液稀释10倍,应进行的操作是
(3)将菌液接种到培养基乙所采用的方法是
(4)X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时,挑选的依据是
(5)分离纯化能高效生产乳糖酶的酵母菌后需要检测酶的活力,以便更好地将酶用于生产实践,乳糖酶活性大小的表示方法是
更新时间:2024-05-12 09:03:05
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【推荐1】利用基因工程生产人胰岛素有两种方法。
方法一:将胰岛素基因转入细菌细胞。进行微生物培养,提取胰岛素。
方法二:将胰岛素基因转入哺乳动物的受精卵,培养成转基因动物并从其乳汁中提取胰岛素。
(1)使用方法一时,在细菌细胞中合成的胰岛素原需在________ (填“蛋白酶”、“DNA酶”或“脂肪酶”)的作用下才能变成具有活性的胰岛素;为使胰岛素基因能顺利进入细菌细胞,应用________ 处理细菌细胞。
(2)方法二将目的基因导入受体细胞常用的方法是________ ,要保人胰岛素基因只在哺乳动物的乳腺细胞中表达,应该采取的措施是在人胰岛素基因的首端加上________ 。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需的药品,因此称为________ 。
(3)利用PCR技术扩增胰岛素基因的前提是已知胰岛素基因两端的核苷酸序列,以便根据这一序列________ ,每次循环可以分为________ 三步。
方法一:将胰岛素基因转入细菌细胞。进行微生物培养,提取胰岛素。
方法二:将胰岛素基因转入哺乳动物的受精卵,培养成转基因动物并从其乳汁中提取胰岛素。
(1)使用方法一时,在细菌细胞中合成的胰岛素原需在
(2)方法二将目的基因导入受体细胞常用的方法是
(3)利用PCR技术扩增胰岛素基因的前提是已知胰岛素基因两端的核苷酸序列,以便根据这一序列
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解题方法
【推荐2】某研究小组为探究影响过氧化氢分解的因素,做了三个实验,相应的实验结果如图所示(实验1、实验2均在最适条件下进行,实验3其他条件适宜)。请分析回答:
(1)实验1、2、3中的自变量分别为_______ 、_______ 、_______ 。
(2)实验1体现了酶具有______ ,与无机催化剂相比的作用机理是______ 。
(3)实验1若温度升高10℃,加过氧化氢酶的催化反应曲线斜率将_____ (填“增大”或“减小”)。
(4)实验2探究了过氧化氢溶液的浓度对酶促反应速率的影响,bc段O2产生速率不再增大的原因最可能是_______ 有限。
(5)探究pH对酶活性的影响不推荐使用淀粉酶与淀粉的原因是_____ 。实验3实验结果表明,过氧化氢酶的最适pH为_______ (填字母)。当pH小于d或大于f时,过氧化氢酶的活性将永久丧失,其原因是______ 。
(1)实验1、2、3中的自变量分别为
(2)实验1体现了酶具有
(3)实验1若温度升高10℃,加过氧化氢酶的催化反应曲线斜率将
(4)实验2探究了过氧化氢溶液的浓度对酶促反应速率的影响,bc段O2产生速率不再增大的原因最可能是
(5)探究pH对酶活性的影响不推荐使用淀粉酶与淀粉的原因是
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【推荐3】1894年,科学家提出了“锁钥”学说,认为酶具有与底物相结合的互补结构;1958年,又有科学家提出“诱导契合”学说,认为在与底物结合之前,酶的空间结构不完全与底物互补,在底物的作用下,可诱导酶出现与底物相结合的互补结构,继而完成酶促反应。为验证上述两种学说,科研人员利用枯草杆菌蛋白酶(S酶)进行研究。该酶可催化两种结构不同的底物CTH和CU,且与两者结合的催化中心位置相同。科研人员进行了4组实验,绘制出反应曲线,如图所示。
注:SCTH表示催化CTH反应后的S酶,SCU表示催化CU反应后的S酶
(1)酶活性是指__________________________________ ,实验中应维持适宜的反应环境。S酶的活性可以用_____________________________ 表示。
(2)“诱导契合”学说在“锁钥”学说的基础上提出:酶与底物结合时,____________ 会发生相应改变。
(3)为更直观的呈现实验过程和结果,科研人员用字母和箭头表示反应简式(P表示反应产物),则实验①可以表示为:S酶+CTH→SCTH+P。请参照实验①的写法,写出实验③的反应简式________________ 。
(4)根据上述学说内容,对比①和②两组实验结果,出现该结果的原因可能是_____________ ,该结果支持_____________ 学说。
(5)为进一步探究SCTH不能催化CU水解的原因是SCTH失去活性,还是出现空间结构的固化,请设计一个补充实验,写出实验思路:__________________________ 。
注:SCTH表示催化CTH反应后的S酶,SCU表示催化CU反应后的S酶
(1)酶活性是指
(2)“诱导契合”学说在“锁钥”学说的基础上提出:酶与底物结合时,
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(4)根据上述学说内容,对比①和②两组实验结果,出现该结果的原因可能是
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解题方法
【推荐1】野生型菌株X能在基本培养基上生长,亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸,只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法(一种类似“盖章”的接种方法,使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落)纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图。回答下列问题:_______ 等营养成分,培养基灭菌常用的方法是_____ ,基本培养基与完全培养基相比,成分不同的是_______ 。
(2)进行过程②操作时,必须先将丝绒布转印至______ (填“基本培养基”或“完全培养基”)上,从______ 培养基上可获得亮氨酸缺陷型突变菌株。
(3)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同,所以应挑取_______ (填“菌落A”或“菌落B”)获得亮氨酸缺陷型突变菌株。将该菌种在培养液中扩大培养时,需将菌液充分振荡,目的是_______ 。
(1)培养微生物的培养基通常应含有水、无机盐、
(2)进行过程②操作时,必须先将丝绒布转印至
(3)利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同,所以应挑取
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解题方法
【推荐2】某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题:
(1)培养基中加入化合物A的目的是___ ,这种培养基属于___ 培养基。
(2)目的菌生长所需的氮源和碳源来自培养基中的___ 。实验需要振荡培养,由此推测目的菌的代谢类型是___ 。
(3)对培养基进行灭菌的常用方法是___ 。用稀释涂布平板法测定细菌数目时,实际活菌数要比测得的数目___ 。
(4)某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用稀释倍数为104、105、106的稀释液进行涂布,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是___ ,此对照实验的目的是___ 。
(5)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量___ (填“增加”或“减少”)的培养液,接入新的培养液中连续培养,使目的菌的数量___ (填“增加”或“减少”)。
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行___ 处理后才能倒掉,这样做的目的是防止造成___ 。
(1)培养基中加入化合物A的目的是
(2)目的菌生长所需的氮源和碳源来自培养基中的
(3)对培养基进行灭菌的常用方法是
(4)某同学计划统计污水池中目的菌的总数,他选用稀释倍数为104、105、106的稀释液进行涂布,每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看,还应设置的一组对照实验是
(5)培养若干天后,应选择培养瓶中化合物A含量
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行
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【推荐3】近日市卫计委发布的卫生监测信息显示多家美容美发场所的毛巾、理发用具等大肠杆菌含量严重超标,回答下列相关问题。
(1)在检查某美发店的卫生状况时对该美发店毛巾浸泡液中的大肠杆菌进行计数可采用稀释涂布平板法,也可采用如图甲所示_____________ 法,图甲中a的孔径应______ (填“大于”或“小于”)大肠杆菌,培养大肠杆菌时,需将PH调至______ 。在伊红和美兰培养基上可观察到大肠杆菌菌落呈______ 色。
(2)如图乙是大肠杆菌鉴别培养基的配方,在该配方中缺少的营养成分是______ ;若是要进行选择培养,则对培养基配制的要求是_______ 。在用稀释涂布平板法对大肠杆菌进行计数时,计数结果往往比实际偏小,原因是______ 。
(3)若该美发店需要对毛巾进行定期消毒,最简单有效的消毒方法是______ 。
(1)在检查某美发店的卫生状况时对该美发店毛巾浸泡液中的大肠杆菌进行计数可采用稀释涂布平板法,也可采用如图甲所示
(2)如图乙是大肠杆菌鉴别培养基的配方,在该配方中缺少的营养成分是
(3)若该美发店需要对毛巾进行定期消毒,最简单有效的消毒方法是
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【推荐1】如图是大肠杆菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。
(1)制作牛肉膏蛋白胨培养基制备的过程有:计算→称量→溶化→________ →________ 。
(2)操作时需在________ 附近操作,其原因是________ 。
(3)纯化大肠杆菌的原理是:在培养基上将细菌稀释或分散成________ ,使其生长成单个的菌落,其常用的方法有________ 、________ ,要求无菌操作.
(4)图中在________ (填图中编号)区域出现了单个菌落。
(1)制作牛肉膏蛋白胨培养基制备的过程有:计算→称量→溶化→
(2)操作时需在
(3)纯化大肠杆菌的原理是:在培养基上将细菌稀释或分散成
(4)图中在
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【推荐2】味精的主要成分是谷氨酸的钠盐,目前主要利用谷氨酸棒杆菌发酵生产谷氨酸。为了提高谷氨酸产量,科研人员不断优化培养条件,以获得最佳发酵工艺。回答下列问题:
(1)纯种菌株的获取:采集5cm深的土壤样品,与适量的无菌水充分混合形成土壤稀释液,采用___________ 法将菌液接种到细菌选择性培养基平板上,通过观察菌落形态,从平板上挑取生长较好的谷氨酸棒杆菌的________________ ,转入培养基临时保存。
(2)菌株的培养:将斜面培养基上保存的谷氨酸棒杆菌接种到______ (物理状态)培养基中,32℃摇床培养,以达到活化菌株的目的。每隔一段时间利用______________ ,在显微镜下计算样品中谷氨酸棒杆菌的数量,了解菌株的生长周期,并通过初筛、复筛,确定谷氨酸棒杆菌菌株具有高产谷氨酸的能力。
(3)发酵条件的优化:在基础发酵培养基的基础上,科研人员利用不同碳源种类(葡萄糖、蔗糖)、无机氮源种类(尿素、硝酸钾)、初始pH(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5)探究谷氨酸棒杆菌产生谷氨酸量的联合影响,实验结果如下图。
根据实验结果,选择__________ 组合获得的谷氨酸产量最高,这可作为最优发酵条件。此外,温度对发酵的影响是多方面的,原因是_______ (写出2点)。
(4)谷氨酸棒杆菌的发酵:为了满足工业大规模发酵的需要,往往在接种发酵之前,对菌种进行____________ 。
(5)谷氨酸的获得:发酵结束后,需对发酵液的产物进行提取、分离、______ ,获得的谷氨酸需要进行质量检查,进一步加工合格后才能成为产品。
(1)纯种菌株的获取:采集5cm深的土壤样品,与适量的无菌水充分混合形成土壤稀释液,采用
(2)菌株的培养:将斜面培养基上保存的谷氨酸棒杆菌接种到
(3)发酵条件的优化:在基础发酵培养基的基础上,科研人员利用不同碳源种类(葡萄糖、蔗糖)、无机氮源种类(尿素、硝酸钾)、初始pH(5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5)探究谷氨酸棒杆菌产生谷氨酸量的联合影响,实验结果如下图。
根据实验结果,选择
(4)谷氨酸棒杆菌的发酵:为了满足工业大规模发酵的需要,往往在接种发酵之前,对菌种进行
(5)谷氨酸的获得:发酵结束后,需对发酵液的产物进行提取、分离、
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【推荐3】不同品牌的酸奶具有不同的口味。某研究小组利用含碳酸钙的固体培养基探究甲、乙两品牌酸奶中乳酸菌的类型是否相同(乳酸能够溶解碳酸钙,使培养基变透明)。请回答下列问题:
(1)将甲、乙两品牌酸奶中的乳酸菌纯化,分别接种在含碳酸钙的固体培养基中培养,根据菌落周围透明圈的大小可确定酸奶中乳酸菌的类型。不同乳酸菌菌落透明圈大小不同的原因是___________________________________________ 。
(2)家庭制作酸奶时,在纯牛奶中加入少量酸奶相当于微生物培养技术中的________ 操作。纯牛奶变成酸奶,改变了口味但含有的能量减少,原因是_______________________________________ 。
(3)该研究小组进一步探究甲品牌酸奶中乳酸菌数量,实验操作如图。接种微生物的方法有很多,图中过程①②③所示的方法为________________ 。用该方法统计样本菌落数后,所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/mL),这里的n=________ 。如果平板菌落数超过300,一般还需进一步________ 。
(1)将甲、乙两品牌酸奶中的乳酸菌纯化,分别接种在含碳酸钙的固体培养基中培养,根据菌落周围透明圈的大小可确定酸奶中乳酸菌的类型。不同乳酸菌菌落透明圈大小不同的原因是
(2)家庭制作酸奶时,在纯牛奶中加入少量酸奶相当于微生物培养技术中的
(3)该研究小组进一步探究甲品牌酸奶中乳酸菌数量,实验操作如图。接种微生物的方法有很多,图中过程①②③所示的方法为
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【推荐1】自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,科学家欲从果园的葡萄上或土壤中分离这种酵母菌,操作如下:
(1)制备的酵母菌培养基在进行倒平板操作时,为防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染,应_____ 。
(2)平板划线法纯化菌株时,为从聚集的菌落中获得单个菌落,第二次及以后划线时,应从______ 开始划线。划线的某个平板培养后,第一划线区域的第一条线上都不间断地长满了菌落,第二划线区域的第一条线上无菌落,其他线上有菌落,造成这种现象的原因是_________ 、_____________ 。
(3)将从自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一_________ 的固体培养基上,在适宜的条件下培养。
(4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用______ 法。在接种前,随机取若干灭菌后的空白平板培养基培养一段时间,这样做的目的是______________ 。
(5)获得纯净培养物的关键是__________________ 。
(1)制备的酵母菌培养基在进行倒平板操作时,为防止培养皿盖的冷凝水落入培养基造成污染,应
(2)平板划线法纯化菌株时,为从聚集的菌落中获得单个菌落,第二次及以后划线时,应从
(3)将从自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用涂布器涂布接种于以木糖为唯一
(4)若要检测土样中的酵母菌含量,应采用
(5)获得纯净培养物的关键是
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【推荐2】某水厂为检测自来水中的大肠杆菌含量是否超标,取水样进行检测。回答下列相关问题∶
(1)培养大肠杆菌用LB培养基,该培养基的成分有蛋白胨、酵母提取液、氯化钠和水,其中蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养是_____ ,在制备该培养基时需要将 pH调节至_____ 。
(2)在对制备的培养基进行灭菌时,发现当灭菌锅内压力升到 100 kPa时,温度未达到121℃,其原因是_____ 。在培养基上接种水样之前,需要检测培养基是否被污染,对固体培养基应采用的检测方法是_____ 。
(3)鉴别大肠杆菌时,需要在固体培养基中加入_____ ,研究人员将一定体积的水样过滤后,将滤膜放在该培养基上进行培养,培养时需要将培养基倒置,原因是_____ 和避免培养基中的水分过快地挥发。每隔 24 小时统计_____ 色的菌落,间隔 24小时统计的目的是_ _____ 。
(1)培养大肠杆菌用LB培养基,该培养基的成分有蛋白胨、酵母提取液、氯化钠和水,其中蛋白胨为大肠杆菌提供的主要营养是
(2)在对制备的培养基进行灭菌时,发现当灭菌锅内压力升到 100 kPa时,温度未达到121℃,其原因是
(3)鉴别大肠杆菌时,需要在固体培养基中加入
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【推荐3】微生物絮凝剂是一类由微生物或其分泌物产生的代谢产物。它是利用微生物技术,通过细菌,真菌等微生物发酵,提取,精制而得的,不仅具有絮凝沉降废水的作用,同时具有自身降解的能力。是一类无毒,安全,环保、不造成二次污染的絮凝剂。科研人员通过生物技术筛选稳定。高效的微生物絮凝剂产生菌。回答下列问题:
(1)将所取的土壤样本加入___________ 制成菌液,从培养基的物理形态上讲,一般将菌液接种到________ 培养基中进行富集培养,再通过__________ 法接种到固体培养基,数天后,挑选出生长较好,表面光滑带黏性的单个菌落,分别接种到M型液体培养基中继续培养。
(2)已知微生物絮凝剂可以将水体中的颗粒集聚变大形成絮团。从而加快粒子的聚沉,达到固一液分离的目的。为研究不同微生物絮凝剂去除生活污水中有机物颗粒的效果,科研人员又进行了如下实验:
①向接种了单个菌落的多个M型液体培养基中(假设每个培养基中微生物数目相等)加入等量且适量的生活污水,其中对照组设置为___________ ,目的是______________________ 。
②经过一定时间后,观察___________ 。从而对不同微生物的絮凝效果做出判断。
(1)将所取的土壤样本加入
(2)已知微生物絮凝剂可以将水体中的颗粒集聚变大形成絮团。从而加快粒子的聚沉,达到固一液分离的目的。为研究不同微生物絮凝剂去除生活污水中有机物颗粒的效果,科研人员又进行了如下实验:
①向接种了单个菌落的多个M型液体培养基中(假设每个培养基中微生物数目相等)加入等量且适量的生活污水,其中对照组设置为
②经过一定时间后,观察
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