工业生产中,提取天然β-胡萝卜素的方法之一是利用红酵母等微生物进行发酵,经菌体裂解、离心后进行萃取。回答下列有关问题:
(1)若要初步确定某一菌株是否为红酵母菌株,相对简便的操作是通过_________ 法将菌种接种于培养基上,接种时要对微生物的接种工具进行_______ 。并在适宜的条件下培养一段时间,观察其形成的菌落的_________ (填两个)等特征,此过程中获得纯净培养物的关键是________________ 。
(2)碳源对β-胡萝卜素的产量有很大的影响,若要通过实验为红酵母菌株选择最佳碳源,则氮源在该实验中属于_______ 变量,为使培养基中的碳源得到充分利用需用_________ (物理性质)培养基。
(3)科研人员尝试利用紫外线处理红酵母,以获得高产菌株。经定量分析后,若得到高产菌株,要对其进行长期保存,可采用_____________ 法在____ 。C的冷冻箱中保存。
(1)若要初步确定某一菌株是否为红酵母菌株,相对简便的操作是通过
(2)碳源对β-胡萝卜素的产量有很大的影响,若要通过实验为红酵母菌株选择最佳碳源,则氮源在该实验中属于
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更新时间:2017-11-16 02:35:09
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解题方法
【推荐1】为了筛选出高效降解聚乙烯地膜的菌种,科学家进行了如下实验,实验过程中用到的两种培养基如下:
培养基甲:MgSO₄、CaCl₂、KH₂PO₄、K₂HPO₄、NH₄NO₃、FeCl₃、蒸馏水
培养基乙:蛋白胨、牛肉粉、氯化钠、蒸馏水、琼脂
回答下列问题:
(1)甲乙培养基接种前应该采用的灭菌方法是__________________ 。甲乙培养基按照物理性质划分区别是__________________ 。
(2)取地膜覆盖内1g新鲜土壤,加入100mL无菌水充分摇匀,制得土壤稀释液;取20μL稀释液接种到100mL培养基甲中并加入________________ ,于25℃、150 r/min培养,待菌液浓度上升并趋于稳定后,进行下一步操作。
(3)地膜降解菌的纯培养:取1mL培养基甲中的菌液到培养基乙进行传代培养,每7d进行一次传代,3次重复,按照菌落特征挑取单菌落,该过程得到的纯培养物是指__________________ 。
(4)通过上述过程得到了BP1—4四种菌株,欲通过实验进一步比较四种菌株对地膜的降解率,请设计简单的实验思路:__________________________________ 。
(5)将地膜降解菌用于环境保护实践时还需要考虑的问题有__________________ 。
培养基甲:MgSO₄、CaCl₂、KH₂PO₄、K₂HPO₄、NH₄NO₃、FeCl₃、蒸馏水
培养基乙:蛋白胨、牛肉粉、氯化钠、蒸馏水、琼脂
回答下列问题:
(1)甲乙培养基接种前应该采用的灭菌方法是
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【推荐2】纤维素酶广泛存在于自然界的细菌、真菌等生物中。为纯化菌种,在鉴别培养基上接种纤维素降解细菌,培养结果如图所示。回答下列问题:
(1)纤维素酶是一种复合酶,它至少包括_____________________ 三种组分,即若实验小组从不同微生物中分别获取了纤维素酶,同等条件下对纤维素进行水解得到的各产物含量不完全相同,原因可能是____
(2)对培养皿常用的灭菌方法及目的分别是_____________________ 据图判断该纯化培养能否达到纯化的目的,并写出判断依据_____________________
(3)图示中采用的接种微生物的方法是______________ 法,该方法把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面,为达到这一目的,应注意的操作有_______________ (至少答2点)
(4)为弄清固体培养基中的非目的菌落来自菌种还是培养基,应设置对照组为___________
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【推荐3】下图表示使用滤膜法进行微生物计数,其大致流程为:先用滤膜过滤待测水样,水样中的微生物留在滤膜上,再将滤膜转移到培养基上培养并统计菌落数目,滤膜法常被用于液体中微生物的检测。回答下列问题。
(1)本实验中用到的滤杯、滤瓶、镊子等,需通过____________ 法进行灭菌;培养基需要通过____________ 法进行灭菌。若要用来检测水样中破伤风芽孢杆菌的含量,需要提供____________ 的条件。
(2)为检测灭过菌的培养基是否合格,可采取的实验方法是(写出实验思路)____________ 。
(3)现有一罐打开数日的可乐,实验小组取5mL可乐,稀释100倍后取10mL进行过滤处理,将滤膜置于培养基上培养,获得了35个菌落,则该罐可乐中每毫升含有微生物____________ 个。
(4)大多数饮料中含有防腐剂,能抑制微生物的繁殖,用滤膜法测定的菌落数量比直接用涂布平板法测定的菌落数量偏______ (填“大”或“小”),其原因是____________ 。
(1)本实验中用到的滤杯、滤瓶、镊子等,需通过
(2)为检测灭过菌的培养基是否合格,可采取的实验方法是(写出实验思路)
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解题方法
【推荐1】三七是我国名贵中药材,栽培周期一般需要3年以上。某些种植者为了追求短期经济效益,在种植过程中大量使用化肥和农药,使土壤板结酸化,导致三七发病率上升。生物炭是土壤改良材料,科研人员以10年三七连作地为实验对象,探究生物炭改善土壤环境的作用,实验结果如图1、2、3所示,相对丰度是指含量的多少。回答以下问题:
(1)要了解三七种植地的土壤状况,首先要调查分析该群落的____ 。鉴定统计土壤中细菌和真菌的种类及数量,可用____ 法。
(2)被孢霉属为健康三七根际土壤优势菌群。据图1分析,随着____ ,被孢霉相对丰度增加。科研人员推测,生物炭的高孔隙率为真菌的生长提供了____ ,有助于减少不同真菌的____ ,从而促进土壤中多种真菌共存。
(3)镰刀菌属中许多菌种会引起植物病害,其中尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌均可引起三七根腐病。据图2、3可知,生物炭能_____ ,从而降低三七发病率。研究发现,土壤pH与尖孢镰刀菌相对丰度呈显著负相关。根据以上信息分析,生物炭可以降低三七发病率的原因是____ 。
(1)要了解三七种植地的土壤状况,首先要调查分析该群落的
(2)被孢霉属为健康三七根际土壤优势菌群。据图1分析,随着
(3)镰刀菌属中许多菌种会引起植物病害,其中尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌均可引起三七根腐病。据图2、3可知,生物炭能
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【推荐2】某同学发现超市里袋装牛奶的灭菌方式有两种:一种是巴氏灭菌,保质期时间短;一种是超高温灭菌,保质时间长。该同学想通过实验的方法验证超高温灭菌的牛奶所含的细菌比巴氏灭菌的牛奶少(不考虑奶牛品种、产地等因素),以下是相关检测实验,回答下列问题:
(1)一般来说,培养基中的营养成分应含有__________________________ 。(写出四种)
(2)对培养基进行灭菌的方法是________________ ,在对培养基进行灭菌后,待培养基冷却至50℃,需要在_____________ 附近倒平板,平板冷凝后,要将平板__________ ,这样放置的原因是:__________ 。
(3)待测牛奶在涂布前需进行系列稀释,原因是__________________________ 。
(4)下表为一些实验工具和灭菌方法,涂布牛奶稀释液应选择的工具是_________ (填数字),该涂布工具最适合的灭菌方法是_________ (填字母)。
(5)实验结束后,统计的菌落数目比实际活菌的数目要_________ (填“多”或“少”)。
(6)实验结果表明,超高温灭菌的牛奶形成的菌落数要比巴氏灭菌的少,从细菌中酶的角度理解,这体现了酶的_________ 的特性。
(1)一般来说,培养基中的营养成分应含有
(2)对培养基进行灭菌的方法是
(3)待测牛奶在涂布前需进行系列稀释,原因是
(4)下表为一些实验工具和灭菌方法,涂布牛奶稀释液应选择的工具是
实验工具 | ||||
灭菌方法 | A.高温高压灭菌 | B.火焰均烧 | C.紫外线照射 | D.酒精擦拭 |
(5)实验结束后,统计的菌落数目比实际活菌的数目要
(6)实验结果表明,超高温灭菌的牛奶形成的菌落数要比巴氏灭菌的少,从细菌中酶的角度理解,这体现了酶的
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名校
【推荐3】乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶的分泌量较少,导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖,从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时,需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量,科研人员从牧民的奶酪(一种近似固体的发酵牛奶制品)中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌,下图为流程示意图。请回答下列问题:(1)将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是________________________ 。
(2)若要将培养基甲中的菌液稀释10倍,应进行的操作是________________________ 。
(3)将菌液接种到培养基乙所采用的方法是______ ,该过程所用的接种工具是______ ,对该接种工具进行的灭菌操作及注意事项有____________ (写出具体操作流程)。
(4)X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时,挑选的依据是________________________ 。
(5)分离纯化能高效生产乳糖酶的酵母菌后需要检测酶的活力,以便更好地将酶用于生产实践,乳糖酶活性大小的表示方法是________________________ 。在牛奶中添加适量乳糖酶,以获得无乳糖牛奶,此过程并不会破坏牛奶中的其他营养成分,原因是______________________________ 。
(2)若要将培养基甲中的菌液稀释10倍,应进行的操作是
(3)将菌液接种到培养基乙所采用的方法是
(4)X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时,挑选的依据是
(5)分离纯化能高效生产乳糖酶的酵母菌后需要检测酶的活力,以便更好地将酶用于生产实践,乳糖酶活性大小的表示方法是
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【推荐1】某污水处理厂欲处理一批含As3+和硝酸盐浓度较高的污水,研究人员通过对肠道微生物的分离与筛选,得到了耐砷的反硝化细菌,它在厌氧条件下能够将硝酸盐还原为N2O和N2。分离耐砷的反硝化细菌具体步骤如下:
采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选________ :该培养基中含有适宜浓度的________ ,从而有利于该菌的生长,抑制其他微生物的生长。此种培养基属于________ 培养基。
接种:取采集的人体新鲜粪便样品0.3g,接种至该培养基上。
(2)耐砷反硝化细菌的分离与纯化:取200~300μL上述培养液,均匀地涂布在已经添加了5mmol/LAs3+和10mmol/LNO的细菌固体培养基上。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是__________________ ;涂布完成后,将平板置于温度为____________ 的恒温培养箱中培养24h。挑取长势比较良好、形态大小不同的菌落利用平板划线法进行分离纯化,用该种方法进行接种时,接种工具是__________ 。操作时,在第二次及其以后的划线时,总是从上一次划线的____________ 开始划线,目的是____________________ 。
对分离纯化后的菌株进行鉴定。
(3)测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力:挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养,吸取1 mL菌液离心收集菌体后,分别接种到含有0mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L、10mmol/LAs3+和10mmol/LNO的液体培养基中,测定其OD值(OD值越大,表明菌体数量越多),并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论:________________________________ 。
采集健康人体的新鲜粪便样本。
(1)配制培养基以筛选
接种:取采集的人体新鲜粪便样品0.3g,接种至该培养基上。
(2)耐砷反硝化细菌的分离与纯化:取200~300μL上述培养液,均匀地涂布在已经添加了5mmol/LAs3+和10mmol/LNO的细菌固体培养基上。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是
对分离纯化后的菌株进行鉴定。
(3)测定菌株在不同砷浓度下的生长、繁殖能力:挑取单菌落加入到液体培养基中进行培养,吸取1 mL菌液离心收集菌体后,分别接种到含有0mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、5mmol/L、10mmol/LAs3+和10mmol/LNO的液体培养基中,测定其OD值(OD值越大,表明菌体数量越多),并绘制曲线如下图。结合曲线可以得出结论:
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【推荐2】下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方,请根据表格和所学知识回答下列相关问题。
(1)若根据用途划分,该培养基属于______ (填选择或鉴别)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌,培养基的营养成分需怎样更改?________ ,并用_______ 作为指示剂。
(2)将下列微生物纯培养过程的相关步骤按顺序排列________ 。
①接种 ②灭菌 ③配制培养基 ④培养 ⑤分离
(3)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的_______ 。此外,测定微生物数目的另一种方法是______ 。
(4)图1所用的接种方法,应选择菌落数为______ 的平板进行计数,统计的菌落数往往比活菌的实际数目_______ 。
(5)按图2所示进行划线。下列有关叙述合理的有________ 。
a、获得图2平板,使用的接种环需要灼烧灭菌5次
b、划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c、为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
d、挑取菌落时,应挑取多个菌落,以保证获得目的菌种
e、可以通过逐步提高培养基中NaCl的浓度,获得高耐盐菌株
成分 | 蛋白胨 | 乳糖 | 蔗糖 | K2HPO4 | 指示剂 | 琼脂 |
含量(g) | 10 | 5 | 5 | 2 | 0.2 | 12 |
将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL |
(1)若根据用途划分,该培养基属于
(2)将下列微生物纯培养过程的相关步骤按顺序排列
①接种 ②灭菌 ③配制培养基 ④培养 ⑤分离
(3)图1和图2是培养某细菌的结果图,其对应的两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的
(4)图1所用的接种方法,应选择菌落数为
(5)按图2所示进行划线。下列有关叙述合理的有
a、获得图2平板,使用的接种环需要灼烧灭菌5次
b、划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
c、为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
d、挑取菌落时,应挑取多个菌落,以保证获得目的菌种
e、可以通过逐步提高培养基中NaCl的浓度,获得高耐盐菌株
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适中
(0.65)
【推荐3】某生物兴趣小组按如图所示过程从土壤中筛选能降解纤维素的细菌。回答下列问题:
(1)步骤②是_________________ 。为了筛选目的菌,步骤③的培养基中加入的唯一碳源为______ ,这种培养基属于_____________ (填“鉴别”或“选择”)培养基。
(2)上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是_____________________ 。一般在灼烧接种环之后,要等其冷却后再进行划线,原因是________________________________ 。
(3)将接种后的培养基和作为对照的______________ 同时放入恒温培养箱中培养,为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定,可在培养基中加入_______ 。选取鉴定出的具有较大透明圈的菌种可接种到_______ 培养基上临时保藏。
(1)步骤②是
(2)上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是
(3)将接种后的培养基和作为对照的
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