【推荐1】双歧杆菌是人体肠道内一类自然菌，有资料表明，其双歧杆菌脂磷壁酸（LTA）具有抗肿瘤的作用。研究人员提取并制备了一定量的LTA（100mg/mL）母液，欲研究LTA浓度、作用时间与抗肿瘤效果的关系，请以细胞增殖抑制率为指标，利用下列材料完成对该课题的探究。
材料：肿瘤细胞、基础培养液、LTA（100mg/ml.）母液、生理盐水、培养瓶、培养箱、血细胞计数板等。
请回答下列问题：
（1）实验思路：
①将培养瓶随机均等地分组，并编号为A、B、C、D、E、F；…_____________
（2）若LTA的最佳作用浓度和时间分别是80mg/ml.、5天，请用曲线图的形式表示5天内（含5天）各组最可能的实验结果___________。
（3）分析与讨论：
①有人认为LTA的抗肿瘤作用不仅体现在抑制肿瘤细胞的增殖，还可能是促使肿瘤细胞__________，最终导致细胞数目减少。
②若对体外培养的肿瘤细胞添加RNA合成抑制剂，则肿瘤细胞将广泛停留在__________期。

【推荐2】2022年4理学或医学奖颁发给瑞典生物学家、进化遗传学家斯万特·帕博，以表彰他发现了与已灭绝古人类和人类进化相关的基因组。他们从大量木乃伊中获得少量木乃伊DNA，并在细菌中进行克隆，复制了2400年前的DNA．兴趣小组同学通过阅读相关资料，模拟了其中部分研究过程，设计了如下实验（Mspl、Bamlll、Mbol、Smal为4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C^↓CGG、G^↓GATCC、^↓GATC、CCC^↓GGG）。请回答以下问题：

(1)若将图2中质粒和木乃伊基因通过同种限制酶处理后进行连接，构建重组质粒，应选用的限制酶是______。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，最可能的原因是_______；为有效解决此类问题，措施是______。
(2)据图3分析，培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A、B还应分别含有______。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______菌落中的细菌。

【推荐3】研究人员利用农杆菌介导法和花粉管通道法培育出转抗寒基因PgLCBF1的月季石榴，主要过程示意图如下。请回答下列问题：

(1)过程①是____（填步骤名称），用限制酶XbaⅠ分别切割质粒和抗寒基因，原因是____。
(2)过程②筛选时，使用的培养基除水、无机盐、碳源、氮源和生长因子外，还应加入的物质有____。实验中过程③扩大培养的主要目的是____。
(3)转基因农杆菌借助萌发的花粉管运输，将PgLCBF1导入____中，最终获得转基因种子，经播种、筛选出抗寒月季石榴新品种。与农杆菌直接转化月季石榴叶肉细胞相比，花粉管通道转化法具有的优点有____。
(4)为探究上述农杆菌菌液浸染的合适介质和时期，研究人员进行了如下实验，请完成下表。

实验步骤	简要操作过程
采集花粉	摘取花粉成熟的月季石榴花，自然阴干，收集花粉
配制不同介质	配制植物组织培养液(MS)、质量浓度为5%蔗糖溶液、MS＋5%蔗糖混合溶液
配制①____	取5 mL转基因农杆菌菌液，分别与②____混匀
③____	蘸取收集好的花粉，轻轻点涂在花柱的柱头上
浸染转化	分别在授粉时和授粉后24 h，选择柱头未开裂的花，④____，并作标记，每个处理浸染10朵花。
结果统计分析	分组获得月季石榴种子，催芽播种、培植植株，统计坐果率、种子出芽率和转化阳性率。(坐果率＝坐果数/浸染花数×100%；出芽率＝出芽数/播种数×100%；转化阳性率＝⑤____/播种数×100%)。

【推荐1】生物修复技术已变成对生态环境进行保护过程中的一类最有价值的修复手段，下图为从某植物根际土壤中筛选出高效石油降解菌的部分流程示意图，请据图回答：

(1)用于培养石油降解菌的培养基在接种前需要通过______法进行灭菌。步骤I为低温石油降解菌的富集培养。称取1g土壤样品加入预先装有100mL以______为唯一碳源的培养基的三角瓶中，在15°C、160r/min的恒温振荡摇床中培养6d．在相同的培养条件下连续培养四个周期。摇床培养的目的是______。
(2)在操作II、III中，采用的接种方法分别是______、______。
(3)研究人员通常根据菌落的______特征来初步区分不同种的微生物，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到______时。
(4)目前，已知有200多种微生物能降解石油，但多数微生物的降解速率都很低，现在分离筛选得到三株降解石油能力较强的菌株，请提出鉴定不同菌株降解石油能力大小的方法______。
(5)石油主要含有烷烃、环烷烃和芳香烃，科研人员已经筛选出分别降解三种烃类的细菌B、C、D（每种菌只含有一种相应的烃类降解酶）探究菌A高效降解石油的原因，凝胶电泳技术分离相关蛋白，结果如图：

①检测微管蛋白的目的是______。
②依据实验结果分析菌A降解石油的能力强于菌B、C、D原因是______。

【推荐2】氢气是一种清洁能源，可由产氢菌群无氧发酵产生。科研人员从厌氧活性污泥中获得产氢菌群，并利用硫酸纤维素钠和聚二甲基二烯丙基氯化铵能形成中空微胶囊的特性将其固定化。在此基础上比较固定化产氢菌和游离产氢菌的菌体浓度随时间的变化、不同温度条件下氢气产率的变化，结果如下图。请分析回答：

（1）本实验中，固定化产氢菌采用的方法称为______。
（2）分离纯化产氢菌的方法有平板划线法和_______法，由图1可知，与游离的产氢菌相比，固定化的产氢菌培养后菌体浓度增加较快，其主要原因是_____。
（3）由图2可知，固定化产氢菌生产氢气的优势表现在氢气产率高、______。
（4）在生产实践中，为了充分发挥固定化产氢菌的优势，除了探究固定化产氢菌发酵所需的适宜条件外，还需探究______。

【推荐3】请回答下列有关生物技术实践方面的问题:
(1)微生物的培养和鉴别技术是一项基本技术.为了从样本中获取细菌的单菌落,可用______________法或_____________法将样本接种于______________表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得所需细菌.培养基进行灭菌时,应该采用的方法是_____________。为统计样品中活菌的数目,在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落,一般选择菌落数在______________的平板进行计数.
(2)泡菜虽然好吃,但其中的亚硝酸盐会危害人体健康.亚硝酸盐在特定条件下会转变成_______________,这是一种致癌物,测定亚硝酸盐含量的原理是在________________条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应,生成玫瑰红色物质，正常情况下,随着腌制时间的延长,亚硝酸盐含量的变化趋势是___________。

【推荐1】尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌．设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”，过程如图所示：                    
                    
（1）为达到实验目的，本实验所配制的培养基成分应包括：__．（填入编号）                    
①水②无机盐（不含氮）   ③NH₄NO₃④尿素   ⑤葡萄糖   ⑥牛肉膏⑦蛋白胨   ⑧伊红美蓝     ⑨琼脂       
（2）为能够进行菌落计数，本实验应采用的接种方法是__，接种工具是__。                    
（3）在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是__．根据题意，为使菌液稀释10倍，每次应加入的无菌水量是__ml。                    
（4）甲同学设计了“计算→称量→溶解→灭菌→倒平板→接种土壤样本→菌落计数”的实验步骤，该同学忘记了在__（步骤名称）之前还需要__（遗忘的步骤名称）。                    
（5）乙同学分别接种了3个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了54个、46个、50个菌落，根据甲的实验结果，该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌__个。

【推荐2】请回答微生物培养和分离的有关问题：
（1）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_____（填“消毒”或“灭菌”）﹔操作者的双手需要进行清洗和_____（填“消毒”或“灭菌”）。若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_____（填“消毒”或“灭菌”）处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
（2）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_____。
（3）欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以_____为唯一氮源且加入了_____指示剂的培养基。
（4）为筛选出纤维素酶高产菌株，应到_____环境中取样。样液需用_____（“液体”或“固体”）培养基进行扩大培养，目的是_____。纤维素酶是一种复合酶，至少包含C₁酶、C_x酶和_____。鉴别纤维素分解菌时，需在培养基中添加_____作指示剂，可通过菌落周围_____大小选出高效分解纤维素的菌株。
（5）用平板培养细菌时一般需要将平板_____（填“倒置”或“正置”）。有些使用后的培养基在丢弃前需要经过_____处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。

【推荐3】乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备步骤如下：
产乳糖酶微生物L的筛选→产乳糖酶微生物L的培养→乳糖酶的提取纯化
（1）下表的培养液pH均为7．0，若要筛选微生物L，则不能选择表中的_____培养液。

培养液	乳糖	乳糖酶	NaNO2	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4·7H2O	FeSO4
A	25g/L	/	/	/	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
B	/	/	3g/L	/	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
C	25g/L	1μg/L	/	3g/L	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L
D	25g/L	/	3g/L	/	1g/L	0．5g/L	1g/L	0．01g/L

（2）为了获得能产乳糖酶的微生物L的单菌落，可采用_______________法将初筛菌液接种在固体培养基上。
（3）扩大培养微生物L时，通过增加营养物质的比例________(可以/不可以)提高种群密度，分析说明原因_____________________________________________________________________________。
（4）研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4在不同温度和pH条件下进行发酵，测得发酵液中酶活性的结果见图，推测菌______更适合用于发酵，理由是____________________________。

【推荐1】大量农作物的秸秆及其附属物的焚烧，曾经一度成为人们的热门话题。有的人认为，秸秆焚烧省时省力，焚烧后的灰烬可以肥田；有的人认为，秸秆焚烧产生的烟雾对环境有害，也易引发火灾；有的人认为，可以利用现代生物技术处理农作物秸秆及其附属物，以获得更大的经济效益和社会效益。请回答下列问题。
(1)玉米秸秆中的纤维素能被土壤中的纤维素分解菌分解，这是因为纤维素分解菌能够产生_________。
分离纤维素分解菌的培养基称叫做选择培养基，培养基中的碳源为______________。
(2)为了获得纤维素分解菌，可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。原因是___________________。
(3)玉米棒脱粒后的玉米芯含较多的木聚糖，利用从土壤中筛选出来的菌株H发酵，能使木聚糖转化为木寡糖等高附加值低聚糖，发酵设备如下图所示：

①为了得到使木聚糖转化为木寡糖等高附加值低聚糖的性状优良的菌种，可以从土壤中直接筛选，也可以通过___________________（答全）获得。从土壤中获得目的菌后，为进一步纯化目的菌并计数可将稀释度合适的、含有目的菌的土壤溶液，利用__________________法接种到培养基上，以获得单个菌落。
②为了获得更多的发酵产品，需要进一步优化提升发酵设备性能，可将该发酵设备改造后连接计算机系统，以对发酵过程中的__________________（至少答两点）等条件进行监测和控制，还可以进行反馈控制，使发酵全过程处于最佳状态。
③生产过程中，以一定的速度在加料口不断添加新的培养基，同时又以同样速度在出料口放出旧的培养基，可大大提高生产效率，原因是___________________（答一点即可）。
(4)某学习小组在稀释倍数为10⁶条件下涂布了三个平板（每个平板涂布0.1mL稀释液），接种后，将培养皿倒置培养一段时间，然后统计菌落数分别为240、250、260，则稀释前1mL菌液中所含细菌数为__________________。
(5)图1和图2是培养大肠杆菌的结果图，可以用来计数的接种方法是__________________（填图1或者图2）其可以用来计数的原理为_____________________。

(6)以下过程中所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌较相似的有__________________。

A．制作果酒

B．由果酒制作果醋

C．制作泡菜

D．制作腐乳

【推荐2】塑料（聚乙烯）在自然界中很难降解，俗称“白色污染”，北京航天大学杨军教授偶然发现装米的塑料袋上有许多孔洞，还有虫子和飞蛾爬出。带着这些疑问，杨军教授对虫子消化道的微生物进行分离，从而找到了能降解塑料的微生物，回答有关问题：
（1）实验室分离聚乙烯塑料降解菌时应当以_________为唯一碳源。在获取肠道微生物后应先进行选择培养，其目的是__________,选择培养时所用的培养基从物理性质上属于____________培养基。
（2）对选择培养后的微生物分离时，可以采用平板划线法和稀释涂布平板法，当采用平板划线法分离微生物时，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________，当采用稀释涂布平板法分离微生物时，_________(需要/不需要）进行梯度稀释。两种方法都得到了多种菌落，根据它们的菌落特征对细菌进行分类，菌落特征包括菌落形状、大小、________和__________等方面。

【推荐3】回答下列（一） （二）小题；
（一）酵母菌不仅应用于各种酒类的酿造和面包的制作，而且因富含各种营养物质，可以食用和药用，也可作为饲料及微生物的培养基成分。在利用酵母菌进行酿酒时，若要获得较高酒精度的酿造酒，需要含糖分较高的发酵基质，因此选育耐高糖酵母菌在实际生产过程中具有重要意义。
回答下列与培育耐高糖酵母菌有关的问题。
（1）出发菌株（用来育种处理的起始菌株）的获得：一般从_____
A．腐烂水果堆放处周围       B．肉类加工厂周围       C．生活污水池周围 D．养猪场周围获得土样，用无菌水稀释，备用。
（2）出发菌株的分离与诱变：利用_____将菌液涂布到平面培养基上，分离得到酵母菌株，并接种到液体培养基中进行扩大培养，再用紫外线和亚硝酸钠处理菌液，紫外线的作用是_____；其中扩大培养时需要振荡，目的是_____。
（3）耐糖酵母菌的筛选和检测：
诱变处理的酵母菌等量接种于装有含有_____ 酵母菌培养液的营养瓶中，设计多个重复，每天测量发酵瓶重量，并记录每日失重情况，6天后结束实验，计算总重量。选择失重情况作为检测指标的依据是_____。除了通过失重情况外还可测量_____（答2点即可）确定酵母菌的发酵能力。
显微镜下观察到高糖培养液中能正常发酵的酵母菌大小和形态与低糖培养液中的酵母菌基本一致，说明耐高糖酵母菌能通过_____适应高糖培养基。
（二）科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因（Pin-Ⅱ）通过农杆菌导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。图中Ap^r表示氨苄青霉素抗性基因，Ne^r表示新霉素抗性基因，箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。回答下列问题；
（1）过程①应该选择_____（限制酶）作用于含目的基因的 DNA 和Ti质粒。
（2）Ti质粒是基因工程中常用的运载体，农杆菌上Ti质粒上T-DNA区段的作用是_____。②过程完成后，为使CaCl₂处理过的农杆菌恢复正常状态，可加入_____。
（3）过程③之前需要对农杆菌进行筛选，可以利用下述_____
A．只用含氨苄青霉素的培养基B．只用含新霉素的培养基C．先用含氨苄青霉素的培养基，再用含新霉素的培养基D．先用含新霉素的培养基，再用含氨苄青霉素的培养基
培养基筛选出含重组Ti质粒的农杆菌，还可以采用_____方法鉴定重组 DNA分子是否导入到农杆菌。被侵染的愈伤组织需要_____后再进行培养，否则最终得到的抗虫植株容易长瘤。
（4）通过调节营养物质和植物生长调节剂的适当配比，可以诱导愈伤组织再生出抗虫杨树。若愈伤组织中缺乏_____将无法再生形成植株。图中培育抗虫杨树新品种的整个过程就是_____技术。