1 . PAXLOVID是迄今为止报告的最为有效的抗新型冠状病毒药物。该药物包含两种有效成分： N和R。作用机理如图所示，其中CYP酶是人肝脏多种代谢酶的统称；3CL蛋白酶是新冠病毒编码的蛋白酶，相对于S蛋白的多变性， 3CL蛋白酶具有高度保守性，用于切割加工新冠多聚蛋白形成RNA复制酶等功能蛋白。以下说法错误的是（       ）

A．单独的R成分不具有抗病毒的作用，但可以延长N的作用时间

B．N成分可以通过抑制3CL蛋白酶的活性来抑制病毒的复制过程

C．3CL蛋白酶基因作为核酸检测靶标，比用S蛋白基因作为靶标更为准确

D．多聚蛋白和功能蛋白刺激不同的浆细胞可以产生不同的抗体

2 . 面对全球暴发的新型冠状病毒肺炎疫情，中国政府付出了巨大的努力。科研人员在新冠病毒的免疫应答机制、快速检测、免疫治疗、预防等方面做了大量的工作，取得了显著的成效，请回答下列问题：
(1)当新冠病毒侵入内环境和感染宿主细胞时，会激发人体的_______免疫过程。
(2)我国对新冠肺炎疫情的快速控制，与对新冠病毒的快速检测能力分不开。除核酸检测外，还可采用_______(写出2种)检测方法，其中核酸检测采用的是实时荧光定量PCR技术，即在PCR反应体系中加入引物的同时加入荧光探针，探针完整时不发荧光。与目的基因结合的探针被耐高温的DNA聚合酶水解，R与Q分离后，R发出的荧光可被荧光监测系统检测(图甲)，结果如图乙。

新冠病毒为RNA病毒，PCR反应体系中除应加入Taq DNA聚合酶外，还应加入_______酶。疾控中心检测5位新冠病毒感染者(图乙)，载毒量最高的是_______，依据是_______。若出现阴性结果也不能排除新型冠状病毒感集，可能产生似阴性的因素有_______。
A 样本中病毒量少，达不到实时荧光PCR检测阈值
B.样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解
C.病毒发生变异
(3)目前，新冠病毒灭活疫苗全程接种需要接种多次，首剂次与第2剂次的接种间隔要在3周及以上，第2剂在首剂接种后8周内尽早完成。二次接种同种疫苗的目的是_______，形成较好的免疫效果。
(4)我国科学工作者研发的重组腺病毒疫苗已获批上审，腺病毒是常见病毒，人类感染腺病毒后仅产生轻微的自限性症状(疾病不会无限扩大，在人体免疫系统正常运作下，会逐渐改善)，且不整合进入染色体。与其他重组DNA疫苗相比，可减少多种临床风险，请说明理由_____。

3 . 新冠病毒抗原检测试剂盒可快速检测新冠病毒感染，检测原理如图所示。操作时，将待测样品稀释后滴加在样品垫上，病毒抗原与胶体金——病毒抗体复合物结合，扩散到检测线处与抗体1结合形成沉淀出现红色检测线。同时，胶体金——抗体2作为参照，扩散到质控线处与抗体3形成沉淀出现红色线。

回答下列问题：
(1)根据以上信息分析，新冠病毒抗原检测所依据的原理是____________。若检测结果只有质控线出现红色，说明_____________。若检测不到红色线，说明检测结果为_____________（填“阳性”“阴性”或“无效结果”）。
(2)检测试纸上的病毒抗体是利用新冠病毒的S蛋白所制备的单克隆抗体。制备该抗体的过程中，先将_____________注入小鼠体内进行免疫，从小鼠分离出B细胞与_____________进行诱导融合，获得的细胞至少经过两轮筛选，两轮筛选的目的分别是____________。
(3)核酸检测是将病毒核酸进行扩增的检测过程，是筛查新冠病毒的主要方法。相比核酸检测，病毒抗原检测的灵敏度较差，原因是____________。

4 . 某公司研发的mRNA新冠疫苗，是使用纳米颗粒（LNP）作为载体，递送新冠病毒（SARS-CoV-2）棘突蛋白的全长mRNA进入人体。预期该疫苗进入人体细胞后，LNP 与受体细胞膜融合，mRNA进入细胞，其表达的新冠棘突蛋白会被人体免疫系统检测到，从而产生针对新冠病毒的抗体，以抵抗将来可能入侵的新冠病毒（过程如图）。回答下列问题：

(1)纳米颗粒（LNP）的成分最可能为_____ 。为了检测棘突蛋白的全长mRNA是否成功进入体外培养的人体细胞，可用分子杂交技术，即用一段放射性标记的 _____作为分子探针，经过放射性自显影技术，若出现_____ ，则说明成功进入。
(2)理论上，mRNA进入人体细胞后会发生_____ 过程。经检测，mRNA虽成功进入细胞，但细胞内无法合成新冠棘突蛋白，失败的原因可能是_____ （答出1点即可）。
(3)新冠病毒是RNA复制型病毒（+RNA），请据此给新冠病毒的基因下一个定义： _____。请写出新冠病毒的遗传信息在人体内的传递途径：_____（参照中心法则的形式）。
(4)研究发现，新冠病毒的遗传物质（+RNA）能够直接翻译成蛋白质外壳，而其互补链（一RNA）不能翻译成蛋白质，可能的原因是_____ 。

5 . 从2020年初至今，新型冠状病毒肆虐全球，为抗击疫情我国采取了多种技术路径对新冠病毒进行防治，为全球抗击新冠疫情做出巨大贡献。

(1)上图表示新冠病毒疫苗制备的几种技术路线。疫苗Ⅰ是灭活病毒疫苗，因为病毒只能寄生活细胞，因此使用非洲绿猴肾（Vero）细胞对病毒进行培养，然后将病毒灭活，但要保留______活性，能诱导机体产生免疫应答。培养细胞过程中还要_____，以防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(2)疫苗Ⅲ是基因工程疫苗，制备采用技术的原理是____________。④过程工程菌常用大肠杆菌，但其产生的S蛋白与天然S蛋白质有较大差异。后经改良，科学家选择CHO细胞（中国仓鼠卵巢细胞）其作为工程细胞。推测其优点是与大肠杆菌相比，CHO细胞具有________________，可以对蛋白质进行更完善加工。已知过程③的DNA和质粒结构如图所示：

限制酶	NcoI	SphI
识别序列和切割位点	C↓CATGG	GCTAG↓C
限制酶	NheI	BamHI
识别序列和切测位点	G↓GATCC	G↓CTAGC

根据DNA序列可判断需要用限制酶__________切割质粒B。
(3)疫苗IV是mRNA疫苗，与疫苗Ⅲ相比，其优点主要是_____。（任写一点）
(4)疫苗V为DNA疫苗，我国科学家将其与缺失E₁等基因的人腺病毒（E₁基因是腺病毒基因组复制的关键基因）结合，构建重组腺病毒感染人体，利用人体细胞自身产生抗原。科学家用HEK细胞培养上述重组腺病毒，HEK细胞应含有___________，以利于重组腺病毒在细胞内大量增殖。对获得的重组腺病毒除用PCR检测S蛋白基因外，还需用_____的方法检测S蛋白。为能精确检测出S蛋白，可用单克隆抗体技术制备S蛋白单克隆抗体，其特点是__________。利用该抗体也能对新冠抗原进行检测，但是检出率不及核酸检测，原因是核酸检测采用实时荧光定量PCR技术，对核酸有一个_________的过程，因此哪怕只有少量的病毒核酸也能被发现。

6 . 新冠疫情出现后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用。回答下列问题。
(1)新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法。这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA，这一过程需要的酶是______，再通过PCR技术扩增相应的DNA片段。根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒。
(2)为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的______来进行。PCR过程每次循环分为3步，其中温度最低的一步是______。
(3)某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明______（答出1种情况即可）；若核酸检测和抗体检测结果均为阳性，说明______。
(4)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S（具有抗原性）的编码序列（目的基因）。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是______。

7 . 新冠病毒抗原检测试剂盒可以作为核酸检测的补充手段，用于特定人群的筛查。它的外观如图A所示，只需要将采集制备的样液滴在点样口（S）处，15分钟后，若T线和C线处同时显示横杠即阳性，要即时隔离、核查就医。它的内部结构如B所示（胶体金法），结合垫，T线和C线处分布有不同种类抗体，其中抗体1、3均能与待测抗原结合，抗体2能与抗体4结合，如果有被聚集沉淀的胶体金则会显色，出现横杠。下列关于该抗原检测试剂盒的推测，不正确的是（       ）

A．使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性

B．抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是不同的

C．点样后，结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散

D．T线C线均不显示横杠即为阴性，没有感染病毒

8 . 新型冠状病毒的检测方法很多，实时荧光RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）法是目前核酸检测的主要方法，操作流程：采集样本→提取RNA→逆转录成cDNA→PCR扩增→结果分析。下图是RT-PCR两步法的过程图，在PCR扩增时加入能与目的基因（新冠病毒的核壳蛋白N基因）结合的荧光探针。目的基因合成越多，荧光信号越强，回答下列问题。

(1)构建cDNA文库时，会利用_____酶，将cDNA断开并与载体结合，然后把各个片段_____到一个受体菌群中储存。cDNA文库构建的意义有_____（回答1点）。
(2)在配置PCR扩增液时，加入的荧光探针序列：5′-TTGCT……AGATT-3′，如果模板中存在N基因序列，与探针结合的序列应该是5′_____3′。如果某人没有感染新冠病毒，则PCR时DNA实时荧光信号强度_____（增强/减弱/不变）。
(3)我国前不久推出新冠病毒抗原检测的方法，相较核酸检测，方便简单，出结果较快，其原理是_____，目前国家推广“抗原筛查，核酸诊断”的监测模式，如果取样中所含病原体数量较少时，核酸检测的优点是_____。

9 . SARS-CoV-2变异性强、传播快，给人们的生活和健康带来了巨大影响。科学家从COVID-19康复的患者中鉴定出了与SARS-CoV-2的S蛋白结合的有效抗体P4A1，可有效治疗COVID-19． 迈阿密大学 CamiloRicordi博士和他的国际合作者团队研究发现：输注脐带间充质干细胞（UC-MSC）能有效且安全地降低COVID-19重症患者的死亡风险并缩短康复时间。依据下图及以上信息，下列推断正确的是（       ）

A．SARS-CoV-2为单链DNA病毒，所以其变异性强

B．用同位素示踪技术，分别标记病毒的蛋白质和核酸，可以用来确定该病毒的遗传物质种类

C．脐带间充质干细胞（UC-MSC）可能具有抗炎和免疫调节作用

D．抗体疗法、干细胞疗法和接种新冠疫苗都是有效的免疫治疗手段

10 . 细胞因子是一种可辅助免疫细胞产生对病原体起杀伤作用的物质。新冠病毒感染可引起多种细胞因子在短时间内迅速增加，让免疫系统短时间内火力全开，对自身组织产生伤害（即细胞因子风暴）。科研人员进行了相关研究，结果如下：
结果1：细胞因子风暴可以上调ACE2、EGFR等新冠病毒感染所需的宿主蛋白含量；
结果2：抑制宿主细胞内的RPK1激酶活性，可以抑制新冠病毒感染引发的细胞因子风暴；
结果3：新冠病毒的RNA依赖性RNA聚合酶（NSP12）是激活RIPK1激酶的主要因子。
下列叙述正确的是（       ）

A．细胞因子风暴引起自身组织损伤，属于免疫缺陷

B．适量使用RIPK1激酶抑制剂可减轻新冠肺炎症状

C．NSP12是由新冠病毒自身编码的并在其核糖体上合成的蛋白质

D．新冠病毒可以通过细胞因子风暴形成负反馈，使病毒更容易感染人体