1 . 新冠病毒已蔓延至全球，研制新冠疫苗，广泛接种疫苗可以快速建立免疫屏障。下图1是利用新冠病毒包膜表面的S蛋白制备疫苗的相关过程，质粒A上的m、n分别是启动子和终止子，SUC2是标记基因。下表1是5种限制酶及其识别序列，请回答问题：

表1

限制酶	BamHI	NheI	NcoI	SphI	Sau3AI
识别序列和切割位点	5'-G↓CTAGC-3'	5'-G↓GATCC-3'	5'-C↓CATGG-3'	5'-A↓AGCTT-3'	5'-↓GATC-3'

(1)新冠病毒的基因是有遗传效应的______________片段，为了使目的基因正常复制并成功导入质粒，需要在PCR扩增之前设计两种引物分子，并在引物分子的_____________（填“5'”或“3'”）端添加合适的限制酶识别序列。引物的作用是_____________。
(2)图1中②过程所使用的两种限制酶是_____________，图中目的基因表达的模板链是_____________（填“上链”或“下链”），理由是______________。
(3)以RNA为模板，通过RT-PCR（反转录PCR）技术可获取大量目的基因。进行RT-PCR时，一般要加入4种脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）而不是脱氧核苷酸，原因是dNTP能为子链的延伸过程提供_____________，同时需加入的酶有____________
(4)PCR的产物一般通过电泳来鉴定，结果如下图2所示。1号泳道为标准（Marker），2号泳道为阳性对照（提纯的S蛋白基因片段），3号泳道为实验组。标准（Marker）的实质为______________，阴性的样本有时在3号泳道中也会出现假阳性的杂带，其原因一般有_____________（至少答出两点）。

(5)DNA和mRNA也能够成为疫苗。在两者中，_____________的安全性更有优势，因为它可以被正常细胞降解，不会整合到人体细胞的基因组中造成难以预料的结果而备受人们青睐；另外，它的研发周期较短，对快速应对大规模爆发性传染疾病具有重要的意义。

2 . 新型冠状病毒肺炎是一种由新型冠状病毒引起的急性传染病，面对新型冠状病毒的疫情，药物开发成为一个迫在眉睫的国家重大战略需求。经过科研工作者的不懈努力，多种新冠疫苗已被研发并陆续投入市场，并仍有多种疫苗处于研发当中。初步实验得知，某种疫苗总剂量8 μg为最佳剂量，为了确定最佳接种方案，研究人员进行了进一步的研究，结果如下表所示，回答下列问题：

组别		A1	A2	B1	B2	C1	C2	D1	D2
接种试剂剂量（μg/针）	疫苗	a	/	4	/	4	/	4	/
	X	/	a	/	4	/	4	/	4
第一针接种时间		第0天
第二针接种时间		不接种		第14天		第21天		第28天
相应抗体相对含量		14．7	0	169．5	0	282．7	0	218．0	0

注：A₁、B₁、C₁、D₁组分别接种该疫苗，A₂、B₂、C₂、D₂组分别接种X试剂
（1）从表中可看出，该实验的自变量有____________________。（写不全不给分）
（2）表中试剂X是__________，a的剂量应该为__________。
（3）根据实验结果分析：
①疫苗接种两次组的抗体含量均明显高于接种一次组，原因是____________________。
②疫苗两次接种时间间隔__________天的效果最好，间隔时间过短影响效果的原因可能是______。

3 . 目前，新型冠状病毒仍在全球肆虐横行，各国研制的疫苗相继进入临床阶段并有望投入市场。我国研制出某种疫苗，初步实验得知该疫苗总剂量8ug为最佳剂量，为了确定最佳接种方案，进一步进行了临床实验研究，如下表所示，请回答以下相关问题：

组别		A1	A2	B1	B2	C1	C2	D1	D2
接种试剂剂量（μg/针）	疫苗	a	/	4	/	4	/	4	/
	X	/	a	/	4	/	4	/	4
第一针接种时间		第0天
第二针接种时间		不接种		第14天		第21天		第28天
相应抗体相对含量		14.7	0	169.5	0	282.7	0	218.0	0

注：A₁、B₁、C₁、D₁组分别接种该疫苗，A₂、B₂、C₂、D₂组分别接种X试剂。
（1）从表中可看出，该实验的自变量有_____________。
（2）表中试剂X是生理盐水，a的剂量应该为_____________μg/针。
（3）B组中产生抗体的细胞来自______________的增殖分化。
（4）根据实验结果分析：
疫苗接种两次组的抗体含量均明显高于接种一次组，原因是___________________________。疫苗两次接种时间间隔__________________________天的效果最好，间隔时间过短影响效果的原因可能是__________________________。

4 . 目前，新型冠状病毒仍在全球肆虐横行，各国研制的疫苗相继进入临床阶段并有望投入市场。我国研制出某种疫苗，初步实验得知该疫苗总剂量8 μg为最佳剂量，为了确定最佳接种方案，进一步进行了临床实验研究，如下表所示，请回答以下相关问题：

组别		A1	A2	B1	B2	C1	C2	D1	D2
接种试剂剂量 （ μg/针）	疫苗	a	/	4	/	4	/	4	/
	X	/	a	/	4	/	4	/	4
第一针接种时间		第0天
第二针接种时间		不接种		第14天		第21天		第28天
相应抗体相对含量		14.7	0	169.5	0	282.7	0	218.0	0

注： A₁、B₁、C₁、D₁组分别接种该疫苗，A₂、B₂、C₂、D₂组分别接种X试剂
（1）从表中可看出，该实验的自变量有_______________。
（2）表中试剂X是___________________，a的剂量应该为____________。
（3）A₁组中产生抗体的细胞来自______________的增殖分化。
（4）根据实验结果分析：
①疫苗接种两次组的抗体含量均明显高于接种一次组，原因是_____________。
②疫苗两次接种时间间隔_________的效果最好，间隔时间过短影响效果的原因可能是________________。

5 . 新型冠状病毒（SARS-CoV-2）的核酸检测采用逆转录PCR技术。将待测样本处理后，先将样本RNA逆转录成cDNA，再以cDNA为模板进行扩增。请回答下列问题：
（1）样本RNA逆转录成cDNA的原料是________________。
（2）逆转录PCR反应中使用的DNA聚合酶是从水生栖热菌Thermus Aquaticus（ Taq）中分离提取的，与普通DNA聚合酶相比，该酶的特点是__________________。
（3） PCR-般要经历三十多次循环，每次循环可以分为_____________、_______________和延伸三步。在循环之前，常要进行一次______________，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。
（4）下表是用于新冠病毒的cDNA扩增的两种引物序列，请据表回答相关问题：

引物名称	引物序列（5＇—3＇）
引物1	TTCGATGTT	GAGGGTG	CTCAT
引物2	TCACACCAGTTGAAAATCCTAATTG

①引物1方框内对应的模板链序列为_______________。
②下图为cDNA的部分序列，请问引物1和引物2分别对应的位置是_____________。

6 . 新冠肺炎是近期肆虐全球的一种传染性疾病，它是由新冠 病毒（RNA病毒）感染引起来的，可以表现为发烧、咳嗽、乏力、腹泻、肌痛或者咽 痛，有的病人还会出现呼吸窘迫、呼吸衰竭以及多脏器的功能的衰竭甚至死亡的情况。 请回答下列有关新冠病毒的预防、检测和治疗的考查问题：
(1)新冠病毒的遗传物质为_________
(2)新冠病毒的检测方法目前主要有核酸检测法和抗体检测法。下列说法错误的是（       ）

A．检测出抗体的个体可能检测不到新冠病毒核酸片段

B．检测出新冠病毒核酸片段的个体可能检测不到抗体

C．检测出新冠病毒核酸片段的无症状者不具有感染性

D．核酸检测方法利用了核酸分子杂交和PCR技术

(3)新冠病毒特异性IgM抗体多在发病3－5天后开始出现，当产生IgM的B细胞进入淋巴结，接受辅助性T细胞和抗原呈递细胞的刺激，进一步增殖分化为浆细胞，进而大 量产生IgG抗体，并且IgG持续时间较长。结合下图可知，若检测出_________抗体阳性可提示该患者近期感染而不是感染时间较长或既往感染。

(4)若某人抗体检测阳性，核酸检测阴性，可能的原因有________，与抗体检测相比，核酸检测的优点有________。
(5)2022年3月11日，国家卫健委印发《新冠病毒抗原检测应用方案（试行）》，增加抗原检测作为核酸检测的补充手段。抗原检测采用双抗体夹心法，其原理如图。结合 垫处含有足量的、可移动的、与胶体金结合的抗体1， T处固定有抗体2，抗体1和抗 体2与新冠病毒表面同一抗原N蛋白的不同位点发生特异性结合，呈红色。C处固定有 抗体1的抗体，与抗体1结合也呈红色。检测过程中反复进行了抗原TC体的特异性结 合，若检测结果为阳性，则过程中此特异性结合共发生_____次。若待测样本中不含新 冠病毒，显色结果为 _____，结果为阴性。

(6)有人感染新冠病毒后会发烧，结合下图分析发烧的原因是_________________。

已知布洛芬药物它是一种非螢体类的消炎和止痛的药物，这种药物能使患者的发烧 情况得到治疗和缓解。布洛芬的退烧原理，是由于布洛芬具有抑制_____调节中枢的作用，还可以抑制前列腺素的合成，前列腺素减少，可以加快散热的速度，从 而起到降温的作用。

7 . 2021年11月24日，南非首次向WHO报告了新冠奥密克戎（Omicron）变异株的感染病例，此后迅速成为南非主要流行株，并传播至全球多个国家和地区。科学家发现Omicron变异株中突变氨基酸残基数量为43个，远高于Delta变异株，再结合南非的流行病情况，科学家猜测艾溢病患者更易感染Omicron变异株。
(1)目前治疗艾滋病的药物有6大类30多种，其中有一类是有机小分子NRTls，其化学结构与___相似，可竞争性与___酶结合，从而阻止逆转录过程。
(2)请用所学免疫学知识解释艾滋病患者更易感染Omicron变异株的原因：___。
(3)目前，接种新冠疫苗加强针是应对Omicron的有效手段，已知S蛋白是新冠病毒识别宿主细胞受体的一种关键蛋白，我国科学家正在研制腺病毒载体重组疫苗。其中腺病毒是一种DNA病毒，毒性很弱，感染后一般不会出现严重症状，通过基因工程改造，使腺病毒携带能表达新冠病毒S蛋白的DNA片段，人接种疫苗后，改造过的腺病毒侵染细胞后不会在细胞内复制，但可以表达出S蛋白，诱导入体产生免疫反应。
①接种腺病毒载体重组疫苗后，机体产生的S蛋白被___（填一种即可）细胞识别并呈递给___细胞，产生特异性免疫。
②若在接种该种疫苗前，机体曾感染过腺病毒，则会使该种疫苗的有效性___。
(4)2021年12月8日，我国首个抗新冠病毒特效药获批上市，其有效成分是从新冠康复患者体内分离出的两种抗体，经评估该特效药Omicron仍有效。则该特效药的使用方法是___。（填“口服”或“静脉注射”）

8 . 阅读下面的材料，完成（1）~（5）题。
新型冠状病毒是一种RNA病毒，表现出极高的传染性和快速的人群间传播能力。截至2020年11月12日，各国研制中的新冠疫苗超过200种，其中48种处于临床试验阶段。除了传统的灭活疫苗和减毒疫苗外，目前在研制中的还有基因工程重组疫苗、腺病毒载体疫苗、核酸疫苗（DNA疫苗、mRNA疫苗）等新的疫苗类型。我国在新冠疫苗研发领域处于领先地位。
2020年2月21日，西湖大学周强研究团队报道了新冠病毒表面S蛋白的受体结合结构域与细胞表面受体ACE2蛋白的结构，揭开了新冠病毒入侵人体细胞的神秘面纱。研究显示，S蛋白是病毒识别宿主细胞受体的一种关键蛋白，与ACE2蛋白表现出较强的结合能力，目前各国多种疫苗的研究都是针对S蛋白进行的。
传统疫苗是用灭活或减毒的病原体制成的生物制品。军事科学院陈薇院士团队采用的路线是腺病毒载体重组疫苗。腺病毒是一种DNA病毒，毒性很弱，感染后一般不会出现严重症状。通过基因工程改造，使腺病毒携带能表达新冠病毒S蛋白的DNA片段，人接种疫苗后，改造过的腺病毒侵染细胞后不会在细胞内复制，但可以表达出S蛋白，诱导入体产生免疫反应。
mRNA疫苗是一种新型核酸疫苗，目前全世界还没有正式上市流通的案例。除了考虑稳定性，mRNA疫苗递送入细胞也是技术难点，这将直接影响疫苗的效应，目前常采用的方法是利用脂质体纳米颗粒包裹mRNA（如图）。

一支疫苗从研发到上市通常需要经过8到20年的漫长历程。为了应对新冠疫情，各国都采用了不同形式的应急途径，安全高效的疫苗将是人类战胜疫情的关键性武器。
（1）在新冠肺炎的治疗过程中，曾经尝试过血清疗法，即为患者输入新冠肺炎康复者的血清，血清中含有________，有利于患者康复。
（2）腺病毒载体重组疫苗的巧妙之处在于改造后的腺病毒进入细胞后________。S蛋白被________等抗原呈递细胞识别后，传递给________细胞，通过特异性免疫，在体内产生________，并可长时间保留。当再次遇到相同抗原会迅速高效地产生免疫反应。若在接种该种疫苗前机体曾感染过腺病毒，则会使该种疫苗的有效性________。
（3）包裹mRNA疫苗的脂质体颗粒与________的基本结构类似。你认为研制新冠mRNA疫苗还需要考虑的问题有________。
A．mRNA在细胞质中易被降解
B．mRNA在细胞中可能难以正确翻译
C．mRNA可能会插入到人体的染色体
D．该疫苗是否适于快速大批量生产
（4）腺病毒载体重组疫苗和mRNA疫苗产生抗原的场所都是在________（填“内环境”或“细胞内”。与传统的减毒疫苗相比，腺病毒载体重组疫苗和mRNA疫苗等新型疫苗的安全性有所提高，是因为________。
（5）目前科学家还致力于开发多联疫苗，即注射一剂疫苗便可获得对多种病原体的免疫，对此你认为更有开发潜力的是本文所述疫苗中的哪种（或哪些），并陈述理由________。

9 . 2019年新型冠状病毒，即“2019-nCoV”，为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50-200nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒看起来如同花冠，故而得名。2019-nCoV基因组长度为29．8Kb，为单股正链RNA（ 正链RNA能与核糖体结合，具有mRNA的功能），结构不稳定，容易产生基因突变，给疫苗研制带来困难。“万众一心战疫情”，逆行的医生进入重症病房，与时间赛跑，严防病毒入侵，长时间的不进食不喝水，成为新时代可歌可泣的人。请回答下列问题：
(1)人感染新型肺炎冠状病毒后，经常出现发热症状，原因之一是淋巴因子刺激了下丘脑中的_______中枢，使有关腺体分泌的________________激素和肾上腺素的量增加，从而使产热增加。
(2)长时间不进食而饥饿的医生血糖的主要来源是：____________________；他们的血糖能保持相对稳定，与胰岛A细胞分泌的胰高血糖素密切相关，与正常情况相比，这些医生血液中胰岛素与胰高血糖素的比值__________。
(3)长时间不喝水会使医生的细胞外液渗透压升高，_________渗透压感受器感受刺激产生兴奋，一方面将兴奋传至大脑皮层，产生渴觉；另一方面会使垂体释放的______________增加，促进肾小管和集合管重吸收水，从而使尿量减少。排尿过程的调节属于神经调节，神经调节的基本方式是反射，排尿反射的低级中枢位于_________，成年人可以有意识地控制排尿，说明排尿反射也受高级中枢控制，该高级中枢位_______________。
(4)某患者在初次感染时，14天后检测到了该病毒的抗体，再次感染时，第2天时就检测到了该抗体，请简要解释再次感染时，该抗体迅速产生的原因是________。
(5)科研工作者正努力研制预防新冠肺炎疫苗，从免疫学角度讲，疫苗相当于__________。将疫苗注射人体后会进入血液循环，病毒选择性的入侵肺部细胞，说明它能够识别并结合肺部细胞表面受体，从而寄生在宿主细胞中，________________能识别被寄生的宿主细胞，并与之密切接触，使其裂解死亡；新型冠状病毒被释放出来，而后被_____________免疫产生的抗体所凝集，使之失去感染能力，最后被吞噬细胞吞噬消化。

10 . (5分)2019新型冠状病毒，即“COVID19”（图1），为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50～200 nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠，故而得名。COVID19基因组长度为29．8 kb，为单股正链RNA，其5′端为甲基化帽子，3′端有多聚腺苷酸(Po1yA)结构，可直接作为翻译模板。

(1)下列说法错误的是________(填字母)。
A．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病
B．由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组成一定不含蛋白质
C．病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷、一分子含氮碱基与一分子磷酸
D．此病毒的单股正链RNA，只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上
(2)研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用________法。
(3)病毒入侵人体后，引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了__________________，此原理也可应用于该病的检测。
(4)将COVID19不稳定的RNA转换成DNA后，技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图（图2），在PCR反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当________________催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度除与PCR的循环数相关还与起始状态________含量呈正相关。