1 . 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（       ）

A．实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理

B．对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数

C．由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性

D．野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势

2 . 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：

(1)配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，及时对培养基进行分装，并进行__________________________灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入在培养皿的_____________上做好标记的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约为_____________的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后_____________培养。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。操作时，在第二次及以后的划线，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是_____________________ 。下列关于相关操作叙述合理的有________。
a.为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b.划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株供应。
(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和__________供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞的计数板计数5个中格中的细胞数，理论上_________色细胞的个数应不少于____________才能达到每毫升5×10⁹个活细胞的预期密度。

4 . 为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

（1）通常培养基采用____________法灭菌；在制备固体培养基的倒平板操作时，待平板冷却至_______左右时，应将平板倒过来放置，这样做的目的是___________________________。
（2）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是____________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为___________。
（3）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过___________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是__________________。
（4）示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（5）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。

5 . 下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程：

→→→→

请回答：
(1)配制细菌培养基时通常要加入一定量的氯化钠，其目的是__________________。
(2)培养基和培养器皿常用高压蒸汽灭菌，灭菌后，要待____________时才能打开高压蒸汽锅锅盖。倒平板和接种前要用________擦手。大肠杆菌先接种到液体培养基中的目的是____________。
(3)分离菌群的常用方法有二种，划线分离法与涂布分离法相比，划线分离法的优点是________。
(4)划线后在恒温培养箱中培养时，培养皿须倒置：目的是___________。
(5)下列接种过程中，操作错误的是________。

A．在酒精灯火焰旁倒平板

B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌

C．将接种环伸入试管内，先接触菌体多的部位

D．接种后还要将试管口灭菌加塞

(6)实验完成后，接触过细菌的器皿应如何处理？
____________________________________________________________。

6 . 某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。

请分析回答下列问题。

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选目的菌，这种培养基属于________培养基。
(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________，实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是异养________型。(填“需氧”或“厌氧”)
(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量________。(两空均填“增加”或“减少”)
(4)转为固体培养基时，常采用____________和稀释涂布平板的方法进行接种，在前一种方法接种过程中所用的接种工具是________，这种工具在操作时采用的灭菌方法是________。
(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行________处理才能倒掉，这样做的目的是防止造成______________。