1 . 微生物培养时常利用无菌技术避免杂菌的污染，下列有关叙述正确的是（       ）

A．实验室可利用石炭酸配合紫外线进行灭菌

B．实验员双手可用50％的酒精进行消毒

C．实验操作时应在酒精灯火焰附近进行

D．为防止倒平板时污染培养基，可先倒平板灭菌

2 . 微生物的接种方法有很多种，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关纯化大肠杆菌的叙述，错误的是（       ）

A．使用平板划线法时，首次灼烧接种环和末次灼烧接种环的目的是不同的

B．使用平板划线法时，每次划线前均须用接种环蘸取适量菌液

C．稀释涂布平板法中一般选择3个不同稀释度下的菌液涂布接种进行培养

D．使用这两种方法得到的培养基上的单个菌落不一定都是由一个细菌繁殖而来的

3 . 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。无菌技术往往围绕如何避免杂菌的污染展开。下列关于无菌技术的叙述，错误的是（       ）

A．分别对实验操作的空间和操作者的衣物、手进行灭菌和消毒

B．将用于微生物培养的器皿、接种工具和培养基等进行灭菌

C．为避免周围环境中微生物的污染，某些实验操作应在酒精灯火焰附近进行

D．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触

4 . 扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢产物棒曲霉素（Pat）是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处，取样分离的5个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题：


(1)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表，根据物理性质划分该培养基属于_____________培养基，判断依据是_____________，NaNO₃的作用是_____________（答两点）。

蔗糖	NaNO3	MgSO4	KCl	FeSO4	KH2PO4	蒸馏水
30g	2g	0.5g	0.5g	0.1g	1g	1000mL

(2)培养扩展青霉菌种时可向扩展青霉培养液中加入青霉素，目的是______________
(3)用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是_____________。（答出一点即可）
(4)接种扩展青霉前，应对苹果进行_____________（表面消毒/高压灭菌）。研究人员测定了病斑直径为1、2、3cm的苹果中①~⑤号部位的Pat含量，该实验的自变量是_____________，根据实验结果_____________（能/不能）根据病斑大小来确认腐烂部位的果肉中Pat含量的高低，为什么?_____________。
(5)去除腐烂部位后的苹果不建议食用，请结合图中信息分析______________。

5 . 下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤。有关叙述错误的是（       ）

A．步骤①操作时，倒好平板后应立即将其倒置，防止冷凝水落在培养基上造成污染

B．步骤②接种环和试管口应先在火焰上消毒，接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液

C．步骤③沿多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后可根据出现的单个菌落计数

D．步骤④将培养皿放在恒温培养箱中培养，一段时间后所得到的都是X细菌菌落

6 . 培养基是一种人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。下表是某微生物培养基的配方，其相关叙述正确的是（       ）

编号	①	②	③	④	⑤
成分	(NH)2SO4	KH2PO4	FeSO4	CaCl2	H2O
含量	0.6g	5.0 g	0.7g	0.7g	l00 mL

A．此培养基可用来培养自养型微生物

B．加入的KH2PO4既可从养分上提供P和K，又可为微生物提供能量

C．若要观察微生物的菌落特征，培养基中还需要添加葡萄糖

D．该培养基可选用干热灭菌进行灭菌

7 . 土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收和利用的可溶性磷的优良菌株Q。图1是某同学利用平板划线法分离菌株Q的示意图，图2是分离鉴别菌株Q的结果。固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解，会在菌落周围形成透明圈，透明圈直径（D）与菌落直径（d）的比值（D/d）代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良菌株。下列说法错误的是（       ）

菌株	透明圈直径（D）	菌落直径（d）
M-3-01	18.8	12.3
B3-5-6	20.7	8.0
T-4-01	9.1	6.5

A．在牛肉膏蛋白胨培养基上进行图1操作后培养可获得图2

B．图1所用方法不能用于计数样品中活菌的数目

C．图1中，整个过程需要对接种环至少进行6次灼烧

D．根据实验结果分析溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是B3-5-6

8 . 金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一，A、B、C、D四种抗生素均可治疗SAU引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列叙述错误的是（       ）

A．可采用干热灭菌的方法对该实验使用的培养皿和培养基进行灭菌

B．抗生素D治疗SAU感染的效果最好

C．滤纸片b周围抑菌圈中出现一个菌落，可能是形成该菌落的SAU发生了基因突变

D．接种涂布后的培养皿立即倒置放置于37°C的恒温箱中培养

9 . 某研究小组分离提纯葡萄皮上的野生酵母菌时，选取了从自然界中采集到的葡萄，用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中进行培养。回答下列问题：
(1)配制酵母菌培养液时，需控制培养液的浓度，另需加入一定剂量的青霉素等抗生素，其目的是___________。

(2)该研究小组成功分离出某品种的酵母菌后，用等量菌液分别接种于3个盛有等量液体培养基的锥形瓶中，并分别置于转速为150r/min、200r/min、250r/min的摇床上培养，检测结果如图1所示，摇床转速为250r/min的酵母菌种群密度最大的原因是___________。
(3)图2是实验操作规范的情况下，采用血细胞计数板直接计数和稀释涂布平板法计数两种方法计数培养液中酵母菌数量时得到的结果，其中采用稀释涂布平板法计数得到的是曲线____________，下列判断依据中正确的有____________。
①稀释涂布平板法只计数活的酵母细胞，死细胞无法形成菌落
②采用血细胞计数板直接计数时，可能会将死细胞与活细胞一起计数
③采用稀释涂布平板法计数时，两个或多个细胞连在一起长成一个菌落
④采用稀释涂布平板法计数时，因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目
(4)通过如图3所示的方法进行纯化培养时，用移液枪取最终的酵母菌稀释液0.1m滴在培养基表面，然后将沾有少量酒精的涂布器___________后再进行涂布。在恒温培养箱中培养一段时间后，其中某组的4个平板上菌落数分别为69个、52个、44个、26个，则可以推测原酵母菌液中每毫升含菌数为____________个。

(5)稀释涂布平板法的计数原理是___________。
(6)在无菌技术中，操作者用酒精擦拭双手属于_____________，对金属用具、玻璃器皿（如培养皿）等需要___________，而培养基只能用____________灭菌。

10 . 下列关于无菌操作的叙述，错误的是（       ）

A．倒平板和接种操作都需在酒精灯火焰旁进行，以防杂菌污染

B．用划线法接种时，如果有五个划线区域，则接种环至少灼烧五次

C．适当喷洒石炭酸或煤酚皂溶液，再用紫外线照射可加强消毒效果

D．高压蒸汽灭菌时，需要用棉塞塞住盛有培养基的锥形瓶口并包上牛皮纸