1 . 某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。

回答下列问题：
（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。
（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×10⁷ 个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。
（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。
（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。
（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。

2 . 回答下列与细菌培养相关的问题。
（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO₃”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是________。硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是____________。
（2）用平板培养细菌时一般需要将平板____________（填“倒置”或“正置”）。
（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________。
（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过____________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。

3 . 下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是

A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌

B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧

C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染

D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基

5 . 农民生活用水通常取自于水田或水井，饮水安全很重要，为助力“美丽乡村”建设，常用滤膜法测定大肠杆菌的总数来测定水样是否符合饮用水的卫生标准。滤膜法的大致流程如图所示，请回答下列问题：

(1)大肠杆菌在含有__________的固体培养基（EMB培养基）上长出的菌落呈黑色，从功能上看，EMB培养基属于________培养基。
(2)无菌操作下将90mL无菌水加入到10mL待测水样中，这样就将待测水样稀释了________倍，将稀释后的菌液通过滤膜法测得EMB培养基上的菌落数为45，黑色菌落为5，则1升待测水样中的大肠杆菌数目为________个。
(3)待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上的操作为。对于已使用过的滤膜、EMB培养基等应如何处理？_____________________。
(4)农村取水水源往往被尿素污染，尿素________（填“能”或“不能”）被水源田中农作物直接吸收利用。分离水中分解尿素的细菌实验中常用到选择培养基，该选择培养基的选择原理为________________ 。

6 . 用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时（　　）
①可以用相同的培养基
②都需要使用接种针进行接种
③都需要在酒精灯火焰旁进行接种
④都可以用来计数活菌

A．①②

B．③④

C．①③

D．②④

7 . 牛奶消毒及细菌检测实验的过程如下图所示，下列相关叙述不正确的是（       ）

A．步骤①为巴氏消毒法，这种消毒法的特点是既能杀死牛奶中的绝大多数微生物，又基本不会破坏牛奶中的营养成分

B．实验中对试管、培养皿的灭菌可采用的方法是干热灭菌，这种方法适用的是能耐高温且需要保持干燥的物品

C．实验中的培养基适宜的灭菌方法是高压蒸汽灭菌

D．实验中采用稀释涂布平板法计数，可能导致实验结果偏高

8 . 下列关于培养基的叙述，正确的是（       ）

A．在培养霉菌时，需将培养基调至中性或弱碱性

B．倒平板时，应将皿盖放在一边，以免培养基溅到皿盖上

C．制作培养基时，灭菌后还需调 pH

D．在培养乳酸杆菌时，在培养基中添加的维生素属于特殊营养物质

9 . 培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所用的灭菌或者消毒方法依次是（       ）
①化学消毒   ②灼烧灭菌   ③干热灭菌   ④紫外线消毒       ⑤高压蒸汽灭菌   ⑥巴氏消毒法

A．⑤③②①④⑥

B．①②③④⑤⑥

C．⑥②③④①⑤

D．③⑤②⑥④①

10 . 下列关于微生物的分离与培养实验的叙述，正确的是（　　）

A．高压蒸汽灭菌加热结束后，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底