1 . 自然界一些微生物能产生脲酶，科研上很多研究和应用都与脲酶有关。回答相关问题：

(1)体检时，测试者口服含¹⁴C标记的尿素胶囊，通过测定呼出的气体是否含有¹⁴C来诊断是否感染幽门螺杆菌，这是因为该菌产生的脲酶能将尿素分解生成___________。
(2)筛选尿素分解菌时，培养基中应该以尿素为唯一氮源，从功能上分析，该培养基属于__________培养基。鉴别该菌时，如果培养基PH_____________，会导致酚红指示剂变红。培养基中可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是__________。
(3)脲酶固定化后稳定性和利用效率提高，固定化方法有___________（答出2种）。
(4)研究人员利用细菌M，在不同条件下分批发酵生产脲酶，结果如图所示。推测__________是决定细菌M高脲酶活力的关键因素，理由是____________。

2 . 我国科学家从黄粉虫肠道内分离出了能够降解聚苯乙烯（塑料的主要成分，缩写PS）的细菌，为解决塑料污染问题打开了一扇新的大门。某科研小组计划在实验室分离纯化能高效降解聚苯乙烯的细菌，然后获取相关酶，以期实现塑料的生物酶降解。其基本思路如下：
   
Ⅰ号培养基：物质X、无机盐、氮源、聚苯乙烯
Ⅱ号培养基：物质X、无机盐、氮源、聚苯乙烯、物质Y
(1)物质X和物质Y分别是________和________。
(2)除了图中所示方法外，还可以通过________法在Ⅱ号培养基上纯化降解PS塑料的微生物菌群，使其生长出单个菌落。然后根据菌落的________（至少写出2种）等特征来进行初步区分不同的品种。
(3)为测定PS降解酶降解塑料的能力，需要先用________法将该酶分离出来，分离PS降解酶的基本过程：样品加入后进行洗脱，而后收集PS降解酶。该方法最后收集到的蛋白质与刚洗脱时收集到的蛋白质相比，分子质量较________（填“大”或“小”），原因是________。
(4)分离得到PS降解酶后，为提高生产效率，需要对酶固定化，固定化酶一般不采用包埋法的原因是________。

3 . 桑果营养丰富，是一种药食同源食物。研究人员通过固定化乳酸菌对桑果发酵工艺进行改进。回答下列问题：
(1)将桑果和适当比例的水进行破碎得到果浆，过滤后获得桑果果汁。在保存营养物质的同时杀死果汁中的杂菌，可将果汁进行_______________（填消毒或灭菌方法）。
(2)将乳酸菌培养基装入三角瓶后封口，然后置于灭菌锅中进行灭菌。影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、时间，以及_______________（写出1点即可）。
(3)研究人员发现氯化钙浓度对乳酸菌包埋率有影响，实验结果如下表：

氯化钙浓度／％	10	15	20	25	3.0
包埋率／％	58	72	83	80	78

请根据所学知识分析，上述结果形成的原因是_______________。
(4)若要分离乳酸菌膜蛋白，将除去了细胞壁的乳酸菌原生质体加入蒸馏水使其吸水涨破，再用_______________法分离得到乳酸菌细胞膜，加_______________瓦解细胞膜后，再用固定化_______________技术将磷脂分子分解为甘油、脂肪酸和胆碱，经其他方法除去杂质得到含多种膜蛋白的溶液，将该溶液用_______________法分离，再做SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定，在电冰中用SDS处理的作用是_______________。

4 . 随着垃圾分类实行，餐厨垃圾高效处理迫在眉睫，餐厨废液中含有淀粉、蛋白质等有机物能够被微生物分解并利用。下图为餐厨垃圾处理与资源化利用的过程。请回答：

(1)废渣养殖红头丽蝇得到的蝇蛆成虫除主要作为高蛋白饲料原料外，还可从提取的蛋白粉中通过凝胶色谱法或_______等技术分离出凝集素和抗菌肽等不同种类的蛋白质，以实现高产值利用。采用凝胶色谱法分离凝集素（分子量为80000～335000KDa）和抗菌肽（分子量为2000-7000KDa）时，先洗脱出来的是_____，理由是_______。
(2)为测定废水中活菌数，可用__________法接种于基本培养基中培养。进行计数时，选取菌落数在__________内的平板计数。若出现菌落计数结果为稀释倍数低的计数结果小于稀释倍数高的，导致该结果的原因最可能是__________。
(3)脂肪酶有助于催化废油脂转化为生物柴油，若要从废油脂中筛选产脂肪酶菌株，主要的操作思路是：____________。为加快废油脂转化，可投放固定化脂肪酶，将酶固定化的常用方法是__________。

5 . 我国科技工作者发明的维生素C“二步发酵法”生产工艺是世界首创。第一步发酵用醋酸杆菌为菌种，第二步发酵用氧化葡萄糖酸杆菌（“小菌”）和假单胞杆菌（“大菌”）混合菌种。如图为二步发酵法的生产流程，请回答下列问题：

(1)为纯化和保存菌种，取适量一步发酵液稀释后用_____法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，以_____（填下列选项代号）为最佳指标，分离保存菌种。
A．菌落直径大小                    B．溶钙圈大小                    C．溶钙圈直径与菌落直径比值
(2)对一步发酵培养液检测发现几乎没有杂菌存在，推测可能的原因是_____。
(3)二步发酵过程中大小菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前需对种液中的大小菌计数。计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加_____。在培养基上，可根据菌落的_____等特征（至少写两个）对大小菌分别计数。
(4)某检测员将种液稀释接种了3个平板，统计假单胞杆菌的菌落数分别是30、100和200，取平均值110．该结果可信度低，原因是_____。
(5)若要尝试固定化混合菌进行二步发酵生产古龙酸，应选择_____法进行固定。结合题意，你认为固定化混合菌操作时要注意哪些方面？_____（答出一点即可）。

6 . 桑椹成熟的季节集中在四五月份，因鲜果容易腐烂不易保存，以桑椹鲜果为原料加工成桑椹果汁，不仅可以丰富果汁饮料品种，还可以提高果农的经济效益。请根据所学的相关知识回答下列问题：
(1)桑椹中含有较多的天然食用色素桑椹红，可用萃取法提取。萃取前将原料粉碎的目的是__________________________。研究发现，萃取时辅以纤维素酶和_________酶处理可提高桑葚红的提取率。
(2)工业上常用固定化果胶酶技术处理桑椹汁，反应后酶可以与产物分离提高产品品质，并可__________________，节约成本。某同学拟在果泥用量、温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种果胶酶的活性。通常酶活性的高低可用_____________________________来表示。
(3)获得的桑椹汁也可以制桑椹酒，操作过程中要先通气后密封，先通气的目的是_______________________________________。
(4)利用桑椹酒制成桑椹醋，从桑椹醋中初筛醋酸菌，须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末，形成不透明的培养基。接种桑椹醋后，经培养筛选_______________________的菌落。初筛醋酸菌时，兼性厌氧型乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分初筛平板上的醋酸菌和乳酸菌，写出实验思路：______________________。

7 . 南阳市淅川县是河南省最大的柑橘产地，利用柑橘可以制作柑橘汁，利用柑橘皮可以提取橘皮精油。请回答下列问题：
(1)在制作柑橘汁的过程中要加入果胶酶，果胶酶能够将果胶分解成___________，从而使浑浊的果汁变得澄清。为了使果胶酶能够被反复利用，可以对果胶酶采用___________（方法）进行固定。
(2)通常采用___________法提取橘皮精油。提取橘皮精油不宜采用水中蒸馏的方法，原因是___________。
(3)提取橘皮精油时，为了提高出油率，需要将新鲜的柑橘皮___________，并用___________浸泡。
(4)在提取橘皮精油的过程中有两次过滤，两次过滤分别使用的材料是___________和___________。

9 . “爆爆蛋”又叫海藻魔豆，口感Q弹爽滑，轻咬外皮“噗呲”流出香甜的果汁，深受消费者喜爱。“爆爆蛋”目前作为食品添加剂广泛应用于果汁、奶茶、冷饮、雪糕、沙拉、甜品等食品加工中。如图是“爆爆蛋”制作流程，请回答下列问题：

(1)利用果胶酶制备的果汁比鲜榨果汁更澄清的原因是__________。用果胶酶处理果泥时需要不断地搅拌反应混合物，目的是_______。
(2)配制海藻酸钠溶液时加热的要求是___________________。固定化果汁颗粒，就是将第三步的混合液逐滴地加入到________中。
(3)“爆爆蛋”颜色过浅，原因是______________________；“爆爆蛋”口感偏硬，咬不动，可能的原因是_____________________。
(4)工业上最后一步杀菌最好选用____________（“煮沸消毒”或“瞬间高温灭菌”）的方式。

10 . 乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，在工业生产中具有重要价值。乳精酶的制备及固定化步骤如图。回答下列问题：

(1)筛选产乳糖科的微生物L时，培养基中唯一的碳源应该是______________，在实验室培养微生物L时，一方面需要为L提供合适的营养和环境条件，另一方面需要______________以获得纯净的培养物。
(2)将微生物L研磨破碎得到提取液后，可采用凝胶色谱法对乳糖酶进行分离纯化，其中，比乳糖酶相对分子质量大的蛋白质，会_______________（“先”或“后”）被洗脱分离，原因是_______________________。
(3)若要长期保存乳糖酶需在_______________条件下保存。若要将乳糖酶固定化，一般_______________ （填“适宜”或“不适宜”）采用包埋法，原因是______________，与使用游离酶相比，工业生产中使用固定化酶的优点是____________________________。