1 . 图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点。下列关于培育转基因大肠杆菌的叙述错误的是（       ）

A．若通过PCR获取该目的基因，应该选用引物甲和引物丙

B．图中质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和Hind Ⅲ剪切

C．若将基因表达载体导入受体细胞中，需选用Ca2+转化法

D．在受体细胞中，氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达

2 . 我国有大面积的沿海滩涂和盐碱地，利用生物技术培育出耐盐农作物，可以合理利用这些沿海滩涂和盐碱地，以此增大我国的人均可用耕地面积。如图表示构建基因表达载体所用到的外源DNA和质粒，其中箭头指向是限制酶识别的核苷酸序列所在位置。另外；BamH I、Sma I和Hind Ⅲ三种限制酶切割DNA时形成的末端均不同。请回答下列问题。

(1)获得的耐盐基因在细胞外进行扩增时，常采用的技术是____________。该技术用到的酶与普通的胞内酶相比，最大的特点是____________。
(2)构建该重组质粒时，图中不能使用的限制酶是____________，理由是________________________。
(3)重组表达载体除了含有目的基因和图中标出的结构外，还必须有____________、____________，其中后者具有____________酶识别和结合的位点。
(4)设计一个实验，从细胞水平上鉴定受体细胞内是否成功导入该重组质粒，请写出简要实验思路： __________

3 . 基因工程自20世纪70年代兴起后，通过理论的突破和技术的创新，最终将科学原理转化为工艺和产品。回答下列问题：
（1）1944年艾弗里通过不同类型肺炎双球菌的转化实验，证明了生物的遗传物质是DNA，同时也证明了_________________，因此这项工作可以说是基因工程的先导。科学研究发现，未经人工转基因操作的番薯都含有农杄菌的部分基因，而这些基因的遗传效应促使番薯根部发生膨大产生了可食用的部分，因此番薯被人类选育并种植，这项发现给我们的启示是_________________________。
（2）我国研制出了重组新冠疫苗在全社会开展免费接种，以增强群体免疫能力。下图所示为重组新冠疫苗的制备流程：

从SARS－CoV－2中分离出a个RNA，图中③过程中通过PCR技术经过n次循环获得大量的S蛋白基因，共消耗引物________个。设计引物时可在两种引物5＇端上加入特定的核苷酸序列，使S蛋白基因两端具有不同酶切位点，其目的是_______________________________。
（3）人群中有些人食用牛奶后，对牛奶中乳糖不能完全消化会出现过敏、腹泻、恶心等不适症状。运用基因工程技术解决这一问题，简要写出方法思路。___________________________。

4 . 下列生物学实验或实践活动中，不能够达成目的的是（　　）

A．利用无水乙醇提取并分离菠菜叶片中的光合色素

B．选择紫色洋葱鳞片叶的外表皮进行植物细胞的质壁分离及复原实验

C．灭菌后的外植体接种到无菌培养基上，培养获得愈伤组织

D．PCR仪扩增目的基因时应加入解旋酶提高解旋的效果