1 . 下图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图，图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列有关描述错误的是（       ）

A．利用PCR技术扩增目的基因时不需要解旋酶而需要耐高温的DNA聚合酶

B．引物是子链合成延伸的基础，子链沿着模板链的5'→3'方向延伸

C．从理论上推测，第四轮循环产物中只含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16

D．在第三轮循环产物中才开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段且占1/2

2 . 基因定点突变是指按照特定的要求，使基因的特定序列发生插入、删除、置换、重排等变异。下图甲是一种 PCR 介导的基因定点突变示意图。图乙是研究人员利用基因 M1 构建基因表达载体的过程。表格是研究人员利用图中相关酶对基因 M 和产物 A、B 进行充分酶切后得到不同的片段。以下正确的是（　　）

   

	基因M	A	B
长度（kb）	3.24、2.8、0.15、0.13	2.8、0.09	3.24、0.05

A．据图分析，得到中间产物 A、B 需要的引物对分别是引物1和引物3、引物2和引物4

B．图中技术要进行3次PCR

C．图中基因敲除片段的长度为0.29kb ，基因 M1 的长度为6.03kb

D．为构建基因 M1 与 Ti 质粒的重组质粒，在基因 M1 的 C、D 两端分别加上HindⅢ、PstⅠ的识别序列

3 . 易错PCR是利用低保真的Taq酶和改变PCR的反应条件，降低DNA复制的准确性，使扩增产物出现较多点突变的一种体外诱导DNA序列变异的方法。Taq酶的某一区域负责将碱基与模板链正确地互补配对，Mn²⁺可以降低这一功能；非互补的碱基对由于氢键不易形成，稳定性差，Mg²⁺可以提高该错配区的稳定性。下列说法正确的是（       ）

A．PCR反应体系中需要加入模板、引物、原料、Taq酶、ATP

B．Taq酶能将单个脱氧核苷酸加到引物5'端

C．与普通PCR相比，易错PCR体系中应适当提高Mn2+和Mg2+浓度

D．易错PCR可用于蛋白质工程，生产自然界中不存在的蛋白质

4 . 呼吸道合胞病毒（RSV）的遗传物质是RNA，是引起小儿病毒性肺炎的最常见病原体。采用基因工程的方法构建的RSV疫苗，是以复制缺陷型人5型腺病毒（遗传物质为双链DNA）为载体。该疫苗可表达F抗原（F蛋白），拟用于预防小儿病毒性肺炎。如图为该疫苗开发过程的示意图。下列叙述正确的是（       ）

A．以从RSV提取的RNA片段为模板，通过PCR可得到过程①所用的F抗原蛋白基因

B．可通过PCR技术从分子水平检测F抗原蛋白基因是否转录

C．在过程④中可提取志愿者血清与F蛋白进行抗原—抗体杂交，若有杂交带出现，表明志愿者体内已成功产生抗F蛋白抗体

D．将RSV的F抗原蛋白基因与复制缺陷型人5型腺病毒的DNA进行剪切时需要同种限制酶，识别特定核苷酸序列，并断开氢键，形成相同粘性末端

5 . 某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期待能获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（　　）

A．Gata3基因的启动子也能控制GFP基因的表达

B．翻译时先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白

C．2号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子，4号条带的小鼠是野生型

D．若用引物1和引物3进行PCR，将不利于区分杂合子和纯合子

6 . 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针（探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段），当TaqDNA聚合酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列相关叙述错误的是（　　）

   

A．引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则

B．反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量关系不大

C．若用cDNA（部分基因文库）作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平

D．TaqDNA聚合酶催化DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸

7 . 科学家从某植物中提取乙烯受体基因（Ers1），通过基因工程技术将Ers1基因反向连接到质粒中，筛选出转入反义Ersl基因的该种植物，其果实的储藏期将延长，过程如图所示。下列说法错误的是（       ）

A．PCR时需在Ers1基因左右两端分别添加XhoI、HpaI酶切序列

B．过程②可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中

C．过程③后可在培养基中添加卡那霉素对转化的植物细胞进行筛选

D．可利用抗原—抗体杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因

8 . 稻米胚乳直链淀粉含量高会导致食用品质差。研究发现，水稻蜡质基因（Wx）编码直链淀粉合成酶。若Wx基因中第226位碱基是正常的G，该位点所在的内含子能被正常剪接，胚乳中直链淀粉含量高，基因型记做GG；若该位点突变成T，则不能被正常剪接，胚乳中直链淀粉的合成水平会降低，基因型记做TT。为检测Wx基因该位点碱基是G或T，研究人员以待测水稻叶片总DNA为材料，以Wx基因片段设计引物，对PCR扩增产物经Accl酶切后电泳。如图所示，已知引物1为5'-GCTTCACTTCTCTGCTTGTG-3'，Accl酶的识别位点为5'-GTATAC-3'，两引物之间无另外的Accl酶的识别位点。下列叙述正确的是（       ）

   

A．若图示所给引物1设计区碱基序列所在的DNA链为转录的模板链，则终止子在其上游

B．该实验中需设计的引物2为5'-ATGATTTAACGAGAGTTGAA-3'

C．若电泳结果只能观察到460bp左右的DNA条带，则表明该水稻品种为TT型

D．GT杂合型水稻品种酶切电泳结果为3条条带

9 . PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基，5'端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列如下图。下列叙述不正确的是（       ）

A．当温度下降到65℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合

B．一个DNA分子经PCR进行4个循环后共消耗了15对引物

C．PCR反应缓冲液中一般要添加镁离子，因为真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要镁离子激活

D．用图中引物扩增至少四个循环后才能获得两端均添加限制酶切点的目的产物

10 . 用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液（Marker），10号为电泳缓冲液。进行PCR时加入的模板DNA如图所示。据此做出分析正确的是（       ）

A．在凝胶中，DNA的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小等有关，与DNA构象无关

B．PCR产物的分子大小在250～500bp之间，9号样品对应植株不是所需的转基因植株

C．10号的电泳结果能确定反应体系等对实验结果没有干扰

D．电泳鉴定时，如果扩增结果不止一条条带可能是因为引物设计过短、退火温度过低等原因