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解题方法
1 . 玉米中含有β-胡萝卜素，为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。___ 。
(2)通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中，植物需要依赖培养基中的蔗糖，其中蔗糖的作用是___ （请至少答出两点）。
(3)乙方案中，在体细胞杂交前需要用___ 酶除去细胞壁获得原生质体，获得原生质体后，将其置于___ 溶液中防止其吸水涨破。常用化学试剂____________ 诱导原生质体的融合。
(4)甲乙两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值，两者共有的优点是___ 。
(2)通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中，植物需要依赖培养基中的蔗糖，其中蔗糖的作用是
(3)乙方案中，在体细胞杂交前需要用
(4)甲乙两方案在育种工作中都具有广泛的应用价值，两者共有的优点是
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10次组卷
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2卷引用：宁夏回族自治区石嘴山市第一中学2023-2024学年高二下学期5月月考生物试题
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解题方法
2 . 马铃薯是世界上重要的粮菜兼用型作物，在人们的日常生活和国民经济中起着重要作用。但病虫害的问题严重限制了马铃薯产业的发展，且人们对马铃薯的需求也在发生着变化，马铃薯育种势在必行。生产上常采用马铃薯的块茎进行繁殖，杂合子的马铃薯要比纯合子的产量高，表现出杂种优势现象。回答下列问题：
(1)生产上的用种，杂交后代与块茎繁殖后代的不同体现在_____ 。
(2)现有某高产（A）马铃薯品种，将一个抗病毒基因B导入该品种细胞培育成高产抗病的植株，则该育种方法利用的原理是_______ 。该植株的基因型为______ ，马铃薯进行_________ 繁殖，后代不会出现性状分离，均表现高产抗病，这些植株就可以直接用于农业生产。
(3)现有一批只含有一个抗病基因B的高产抗病的马铃薯植株（不考虑交叉互换），若想探究基因B转入染色体的位置，可采取的措施是_______ 。预期结果：①若后代表现型及比例为__________ ，则高产基因和抗病毒基因位于一对同源染色体上；②若后代表现型及比例为__________ ，则高产基因和抗病毒基因位于两对同源染色体上。
(1)生产上的用种，杂交后代与块茎繁殖后代的不同体现在
(2)现有某高产（A）马铃薯品种，将一个抗病毒基因B导入该品种细胞培育成高产抗病的植株，则该育种方法利用的原理是
(3)现有一批只含有一个抗病基因B的高产抗病的马铃薯植株（不考虑交叉互换），若想探究基因B转入染色体的位置，可采取的措施是
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3 . 严重复合型免疫缺陷症的基因治疗方法是：先从病人体内获得淋巴细胞进行体外培养，然后将腺苷酸脱氨酶基因利用逆转录病毒作为运载体转移到淋巴细胞，再筛选成功转移的细胞增殖培养，最后重新输入患者体内。回答下列问题：
(1)体外培养淋巴细胞的原理是______ 。该培养过程需要定期更换培养液的作用是_______ 。
(2)该基因治疗过程是在逆转录病毒的______ 作用下，使RNA逆转录为DNA，与目的基因整合后插入到淋巴细胞基因组中。基因表达载体除含有目的基因外，还必须含有______ 等控制基因表达的信号序列。
(3)基因治疗是指把_____________ 导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。上述题目背景中描述的是__________ （体内/体外）基因治疗。
(4)淋巴细胞的DNA上是否插入了目的基因，一般用______ 标记的腺苷酸脱氨酶基因作为探针，通过_________________ 技术检测。
(1)体外培养淋巴细胞的原理是
(2)该基因治疗过程是在逆转录病毒的
(3)基因治疗是指把
(4)淋巴细胞的DNA上是否插入了目的基因，一般用
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4 . 苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为A、B、C三种质粒，图乙为含有目的基因D的DNA片段，图丙为重组载体的示意图。Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物X-gal转化成蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoRI（0．6Kb）、PvuI（0．8Kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。回答下列问题：
(1)基因工程操作的核心步骤是___________ 。图甲中三种质粒适宜作为运载体的是质粒_________________ ，原因是_________________ 。
(2)获取目的基因D时应选择乙图中的___________ 对其所在的DNA进行切割。如果仅知道D基因首尾的部分核苷酸序列，根据D基因已知核苷酸序列合成___________ ，利用PCR扩增目的基因。
(3)培育抗虫转基因农作物的优点是___________________________ 。
(4)利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是______ 。
(1)基因工程操作的核心步骤是
(2)获取目的基因D时应选择乙图中的
(3)培育抗虫转基因农作物的优点是
(4)利用自身不含lacZ基因且对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，要在已转化的含重组质粒、已转化的含空质粒的受体细胞和未转化成功的细胞中筛选出已转化的含重组质粒的受体细胞的方法是
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5 . 草甘膦是农业生产中使用的除草剂，从某种细菌中提取草甘膦抗性基因转入棉花植株，获得抗草甘膦的转基因棉花。回答下列问题。
(1)从细菌DNA中提取草甘膦抗性基因时，需要用特定的_____ 处理细菌DNA．提取到的草甘膦抗性基因可通过_____ 扩增。
(2)草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5’_____ATGGCT………AGGAAC_____3’
3’_____TACCGA………TCCTTG_____5’
根据上述序列，应选择_____（填字母）作为引物进行草甘膦抗性基因的扩增。
(3)要使草甘膦抗性基因能在受体细胞中正常表达，需要利用质粒构建成_____ ，不能直接将草甘膦抗性基因导入受体细胞，原因是_____ 。
(4)农杆菌转化法把草甘膦抗性基因导入棉花细胞，脱分化形成_____ 后，草甘膦抗性基因没有表达，再分化发育成棉花植株后，草甘膦抗性基因正常表达，原因是_____ 。
(1)从细菌DNA中提取草甘膦抗性基因时，需要用特定的
(2)草甘膦抗性基因的部分序列如下：
5’_____ATGGCT………AGGAAC_____3’
3’_____TACCGA………TCCTTG_____5’
根据上述序列，应选择_____（填字母）作为引物进行草甘膦抗性基因的扩增。
| A．引物：5’-TACCGA-3’ | B．引物：5’-GTTCCT-3’ |
| C．引物：5’-AUGGCU-3’ | D．引物：5’-ATGGCT-3’ |
(4)农杆菌转化法把草甘膦抗性基因导入棉花细胞，脱分化形成
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2023-05-06更新
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206次组卷
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3卷引用：2023届宁夏六盘山高级中学高三第三次模拟考试理科生物试题
6 . 科研人员为从羊乳腺生物反应器中获得治疗血友病的抗凝血酶，设计了如下图所示的生物工程流程。
(1)为了获得成纤维细胞的单细胞悬液，羊胚组织剪碎后一般需用_____ 处理，所使用的合成培养基中通常需要添加_____ ，以满足细胞对某些细胞因子的需求。
(2)导入的OSNL基因能诱导成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞，推测OSNL基因对成纤维细胞的作用是_____ 。
(3)根据抗凝血酶基因的相关信息，如_____ （答出2点即可），可以从基因文库中得到抗凝血酶基因。
(4)要使抗凝血酶基因在受体细胞中发挥作用，基因表达载体的组成除抗凝血酶基因外，还必须有_____ 。
(5)图中诱导多能干细胞、诱导原始生殖细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是_____ 。
(6)从功能上看，干细胞一般具有_____ 。
(7)该生物工程流程中用到的生物技术有_____ （答出2点即可）。
(1)为了获得成纤维细胞的单细胞悬液，羊胚组织剪碎后一般需用
(2)导入的OSNL基因能诱导成纤维细胞重编程为诱导多能干细胞，推测OSNL基因对成纤维细胞的作用是
(3)根据抗凝血酶基因的相关信息，如
(4)要使抗凝血酶基因在受体细胞中发挥作用，基因表达载体的组成除抗凝血酶基因外，还必须有
(5)图中诱导多能干细胞、诱导原始生殖细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是
(6)从功能上看，干细胞一般具有
(7)该生物工程流程中用到的生物技术有
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2023-03-18更新
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330次组卷
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2卷引用：2023届宁夏回族自治区银川一中、云南省昆明市一中高三下学期联合考试二模理综生物试题
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7 . 当今社会倡导以绿色为核心的生态发展观，绿色农产品的生产是人们健康生活的源头。为降解农产品的农药（马拉硫磷）残留，科学家用基因工程技术生产了CarE（羧酸酯酶）制剂，生产过程如图所示。
(1)提取抗马拉硫磷小菜蛾总RNA，经①_____ 过程获得总cDNA，利用PCR技术可以选择性扩增CarE基因的cDNA，原因是_____ 。
(2)与从基因组文库中获得的基因相比，经①②得到的CarE基因不能直接用于构建基因表达载体，原因是_____ 。在③过程中，要用CaCl2处理大肠杆菌，使其变成_____ 细胞；得到大肠杆菌工程菌后，若要检验CarE基因是否成功表达，可以采用_____ 技术，若没有出现相应的杂交带，则需要用_____ 作探针检验目的基因是否转录出mRNA．
(3)若经以上过程得到的CarE制剂效果不理想，则可以用蛋白质技术，通过_____ ，间接实现对CarE的改造，以满足生产和生活的需求。假如请你为CarE（羧酸酯酶）制剂设计产品说明书，你认为在保存以及使用上应注意哪些事项？（写出1点，合理即可）_____ 。
(1)提取抗马拉硫磷小菜蛾总RNA，经①
(2)与从基因组文库中获得的基因相比，经①②得到的CarE基因不能直接用于构建基因表达载体，原因是
(3)若经以上过程得到的CarE制剂效果不理想，则可以用蛋白质技术，通过
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2022-03-23更新
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370次组卷
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2卷引用：2022届宁夏回族自治区银川一中一模理综生物试题
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8 . 促红细胞生成素(EPO)能促进骨髓中红系祖细胞增殖、分化成成熟红细胞，从而维持血液中红细胞的数量，用于临床治疗因慢性肾功能不全等所致的贫血。下图表示转EPO基因山羊的培育过程，从其乳汁中可以获得有活性的重组人促红细胞生成素(rhEPO)，但科学是一把双刃剑，有人借助基因治疗手段，将EPO基因注入人体，在体内形成局部的EPO制造基地，以此来增加血液中的红细胞含量，从而提高运动成绩，这是基因兴奋剂！这种做法是违法的。回答下列问题：
(1)不是将EPO基因直接导入受精卵，而是经过过程①构建重组表达载体，再经过过程⑤将重组表达载体导入受精卵，其目的是使EPO基因在受体细胞中___ ，能够表达和发挥作用，并遗传给后代。过程①常用到___ 酶，过程⑤常采用___ 仪完成。
(2)图示重组表达载体中，选用某种乳蛋白基因的调控序列作为EPO基因的启动子原件，目的是___ 。
(3)受精卵可以在体外通过___ (填“人工授精”或“体外受精”)技术获得；从___ 。(填“卵巢中采集”或“输卵管中冲取”)的卵母细胞可以直接与用___ (填“假阴道法采集”或“钙离子载体A23187溶液处理”)的精子来完成这一技术过程。
(4)接受EPO基因治疗的人很可能会产生外周血栓和心血管问题，从而患上高血压和中风，原因可能是___ 。
(1)不是将EPO基因直接导入受精卵，而是经过过程①构建重组表达载体，再经过过程⑤将重组表达载体导入受精卵，其目的是使EPO基因在受体细胞中
(2)图示重组表达载体中，选用某种乳蛋白基因的调控序列作为EPO基因的启动子原件，目的是
(3)受精卵可以在体外通过
(4)接受EPO基因治疗的人很可能会产生外周血栓和心血管问题，从而患上高血压和中风，原因可能是
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2022-03-09更新
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356次组卷
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4卷引用：2023届宁夏石嘴山市三中高三一模考试理综生物试题
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9 . 人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：
(1)一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、复制原点、____________ 、 _____________ 等。若选用牛作为转基因动物可将人乳铁蛋白基因与____________________ 的启动子等调控组件重组在一起，可通过___________________ 方法将基因表达载体导入受精卵中，然后使其发育成转基因动物。
(2)要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，则应该选择的限制酶是_____________ 。
(3)据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含____________________ （填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_______________________________ 。
(4)若要检测转基因动物DNA上是否插入了目的基因，检测方法是采用DNA分子杂交技术，即用______________________________________ 作探针，如果显示出杂交带，则表明目的基因已插入染色体DNA中。
(5)利用转基因大肠杆菌（工程菌）不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为_______________________________________________________ 。
| 限制酶 | BamH Ⅰ | Hae Ⅲ | Bcl Ⅰ | Sau3A Ⅰ | Not Ⅰ |
| 识别序列及 切割位点 |  |  |  |  |  |
(1)一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、复制原点、
(2)要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，则应该选择的限制酶是
(3)据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含
(4)若要检测转基因动物DNA上是否插入了目的基因，检测方法是采用DNA分子杂交技术，即用
(5)利用转基因大肠杆菌（工程菌）不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为
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10 . 基因诊断在优生优育上有广泛的应用，现用放射性基因探针（在含有D基因或d基因的DNA片段上用放射性同位素做标记，以此作为探针）对抗维生素D佝偻病（相关基因用D/d表示）患者孕妇甲、其丈夫和该夫妇的双胞胎孩子进行基因诊断，D探针检测基因D，d探针检测基因d，诊断结果如下图。回答下列问题：________________ 。
(2)孕妇甲的丈夫是____ ，这对双胞胎孩子的性别是___________ （填“男孩”“女孩”或“男孩和女孩”），甲和丁的基因型分别是____________ 。
(3)个体乙与正常异性婚配，后代的表现型为____________________________ 。
(2)孕妇甲的丈夫是
(3)个体乙与正常异性婚配，后代的表现型为
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2021-11-02更新
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148次组卷
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5卷引用：宁夏银川市一中2021-2022学年高三上学期第三次月考理综生物试题
宁夏银川市一中2021-2022学年高三上学期第三次月考理综生物试题（已下线）第4章 基因工程 第2节 基因工程及其延伸技术应用广泛 思考与练习陕西省宝鸡市教育联盟2022-2023学年高二上学期期末生物（文科）试题陕西省宝鸡市教育联盟2022-2023学年高一3月月考生物试题甘肃省武威市天祝一中、民勤一中2023-2024学年高一下学期5月期中联考生物试题
