1 . 基因治疗将推动21世纪的医学革命。某高血糖患者患有遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)，相关基因治疗设计过程如下图所示，请据图回答:

(1)图示过程中，①和②代表的细胞或结构分别是___，③和④所示的生物工程技术分别是___。
(2)④所示的生物工程技术中，获取的健康胰岛B细胞基因可通过PCR技术进行大量扩增.进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中___的设定与引物有关。

A．变性温度

B．复性(冷却)温度

(3)培养重组细胞b的培养液中除加入各种营养物质外，通常还需加入___等一些天然成分，并需定期更换培养液，更换培养液的目的是___。
(4)图示基因治疗过程称为___(填“体内”或“体外”)基因治疗。

2 . 探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在。图一所示是某实验小组制备的两 种探针，图二是探针与目的基因杂交的示意图。请回答下列有关问题:
   
(1)核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循___________。设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一。图一所示的两种核酸探针(探针 2只标注了部分碱基序列)都不合理，请分别说明理由_________________________________。`
(2)cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备 cDNA 探针时，首先需提取、分离获得__________作为模板，在__________的催化下合成 cDNA探针。利用制备好的 β-珠蛋白基因的 cDNA探针与 β-珠蛋白基因杂交后，出现了图二中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构” ，原因是_______________________________。
(3)基因工程中利用乳腺生物反应器生产 α-抗胰蛋白酶，应选用__________切割含有目的基因的 DNA片段和载体，并用_________方法导入___________中，再利用 SRY探针( Y染色体上的性别决定基因)进行检测，将检测反应呈阴(雌)性的胚胎进行移植培养。

3 . 根据材料，回答下列问题。

(1)以从人体得到的乙肝病毒抗原基因作为目的基因时，通常删去基因的_____________等部分，从而减小目的基因的相对分子质量，利于将目的基因导入受体细胞。由图可知，过程①用到限制酶是___________________，在培养农杆菌的培养基中添加____________可筛选得到含重组质粒的农杆菌。
(2)将目的基因导入农杆菌时，首先用________处理农杆菌，使其成为______________细胞，利于农杆菌吸收目的基因完成转化过程。将农杆菌导入番茄细胞时，受损的番茄组织更有利于农杆菌的侵染，原因是____________________。
(3)转基因番茄的细胞可以形成愈伤组织，再进一步发育形成试管苗，原理是植物细胞具有_______。除图示方法外，还可用我国科学家独创的___________法将目的基因导入番茄细胞。
(4)可用该植株结的番茄饲喂小鼠，若在小鼠的血清中检测到__________________，则说明转基因植物疫苗口服有效。

4 . 让羊产牛奶，科学家对此做了相关的构想，过程如下图所示。请据图判断，下列说法正确的是（　　）

A．图中涉及的现代生物技术有动物细胞核移植、胚胎移植、胚胎分割和动物细胞融合等

B．小羊a、小羊b、小羊c的性状表现不同，小羊a与羊N的性状表现相同

C．若研究发现羊N细胞中线粒体基因的表达产物丰富，故而它的产奶率高，则小羊a会有这一优良性状

D．依据目前的生物技术和理论，还不能通过生物工程手段获得新物种“羊-牛”

5 . CAR-T细胞免疫疗法，是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法。借助基因工程给T细胞装上定位导航装置CAR（肿瘤嵌合抗原受体），T细胞就能获得特异性识别和攻击肿瘤细胞的能力，犹如“细胞导弹”，能精确“点射”肿瘤细胞，但又不会伤及正常细胞。治疗流程如下图所示。下列说法错误的是（       ）

A．该免疫疗法属于体外基因治疗

B．改造T细胞时，可利用病毒载体把CAR基因导入T细胞

C．基因改造后，T细胞内的mRNA和蛋白质种类增多

D．CAR-T细胞回输到体内后，能有效激活各类肿瘤细胞的溶酶体酶活性

6 . 苯丙酮尿症（PKU）是一种由致病基因决定的氨基酸代谢病，常造成新生儿神经系统损害而智力低下。图1是某家庭中该病的遗传系谱图，为避免再生下患儿，该家庭成员去医院进行了基因检测，已知被检测的PKU基因为142bp（bp表示碱基对）。检测人员用特定限制酶酶切部分家庭成员（III—1、III—2、III—3）的PKU基因，产生了大小不同的几种片段，结果如图2所示。下列叙述不正确的是（       ）

A．苯丙酮尿症是单基因遗传病，由一个基因决定

B．若III—2与III—3近亲结婚，生一个患病孩子的概率是六分之一

C．III—1的每个PKU基因中均有2个该特定限制酶的酶切位点

D．可以在患者家系中调查该遗传病的发病率

8 . 遗传性肾上腺脑白质营养不良（X-ALD）是一种单基因遗传病。下图为X-ALD家系图，经检测I₁与I₂只有1人携带该致病基因。下列相关分析错误的是（       ）

A．可以判断该病在人群中男性患者多于女性患者

B．II5与正常男性婚配，生出患病男孩的概率为1/8

C．若II2为致病基因携带者，则Ⅲ1为携带者的概率为1/2

D．可通过基因诊断避免I2生出患病孩子

9 . 人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白，需经过内质网和高尔基体加工后才具备活性。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程，图中Tet^r表示四环素抗性基因，Amp^r表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BclⅠ	Sau3AⅠ	NotⅠ
识别序列及切割位点	G↓GATCC CCTA↑GG	GG↓CC CC↑GG	T↓GATCA ACTAG↑T	↓GATC CTAG↑	GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG

(1)图中质粒上的Amp^r和Tet^r是____________，作用是__________________。
(2)若选用牛作为转基因动物，可将人乳铁蛋白基因与________________的启动子等调控组件重组在一起，可通过____________方法将基因表达载体导入受精卵中，然后使其发育成转基因动物。
(3)据图分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含_____________的培养基上进行，能在该培养基生长的受体细胞可能已经导入重组质粒。
(4)要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是_______，若BamH Ⅰ酶切的DNA末端与Bcl Ⅰ酶切的DNA末端连接起来，形成有6个碱基对序列的连接部位，对于该部位，这两种酶____________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。若要检测转基因动物DNA上是否插入了目的基因，用相关方法检测后，如果显示出______，则表明目的基因已插入染色体DNA中。
(5)利用转基因大肠杆菌（工程菌）不能生产有活性的人乳铁蛋白，这是因为___________。

10 . 下图为水稻的几种不同育种方法示意图，据图回答：

(1)B过程常用的方法是_____；可能用到秋水仙素的过程有_____（用图中字母表示）。若只考虑F₁分别位于n对同源染色体上的n对等位基因，则通过B培育成的幼苗应有_____种类型（理论数据）。
(2)E育种过程能把苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因“嫁接”到运载体上并在植物体内成功表达出毒蛋白，其原因是_____、_____（答至少2点）。
(3)假设要培育一个稳定遗传的水稻品种，它的性状都是由隐性基因控制的，其最简单的育种方法的过程是_____（用图中的字母表示）；如果都是由显性基因控制的，为缩短育种时间常采用的过程是_____（用图中的字母表示）。
(4)G方法中，所搭载种子的条件是_____（“干燥的、萌发的、休眠的”）。